Este trabalho foi apoiado pelas Ciências Naturais e Engenharia Conselho Programa Discovery (EUA: 298915), o Fonds de Recherche du Quebec - Santé (CSBN), eo Canadá Research Chairs Programa (EUA).

1. Animais Todos os ratos são tratados de acordo com as diretrizes do Canadian Council on Animal Care e aprovação de todos os procedimentos experimentais foi concedida pelo Comitê da Universidade Concordia Ética em Pesquisa Animal. <ol><li> Obter ratos com 275-300 g (homens) ou 225-250 g (mulheres). Ratos Casa em pares até a cirurgia em gaiolas plásticas padrão contendo cama sabugo de milho e papel picado. </li><li> Manter os ratos em um ciclo claro-escuro invertido (luz desligada às 9:30 AM). </li><li> Certifique-se de comida e água estão disponíveis ad libitum, excepto durante o período de abstinência. Nós usamos uma ração regular (20,9% de proteína, 67,2% de carboidratos e 11,8% de gordura). </li></ol> 2. Cateteres e Conectores <ol><li> Adicione cateteres em grandes quantidades e utilize conforme necessário ao longo de um longo período de tempo após a esterilização em autoclave. </li><li> Corte o tubo de Silastic a 12 centímetros de comprimento. <ol><li> Usar um palito de dentes, para colocar um pequenogota de silicone em torno do cateter, a 3 cm da ponta. </li><li> Deixe secar de silicone para 24 horas e, em seguida, autoclave e armazenar os cateteres. </li></ol></li><li> Dobre o tubo longo da cânula &quot;5-up&quot;, que servirá como um conector, em um ângulo reto com o pedestal de plástico, em seguida, autoclave e armazenar. </li><li> Montar, de forma asséptica, os cateteres no dia da cirurgia, empurrando o lado &quot;longo&quot; do tubo de Silastic sobre o tubo metálico dobrado da cânula &quot;5-up&quot;, cerca de metade do caminho para o suporte de plástico. <ol><li> Ligue o &quot;5-up&quot; de tubo através de tubos Tygon e uma agulha embotada 22 L a uma seringa de 1 ml cheio com uma solução salina estéril. </li><li> Solução salina através do cateter para garantir o fluxo desobstruída. </li></ol></li></ol> 3. Cirurgia Cateterismo intravenosa <ol><li> Permitir que os ratos de uma semana de aclimatação na unidade de cuidados de animais (ACF) antes da cirurgia. Não realizar a cirurgia em ratos com peso corporal menorde 300-325 g (homens) ou 250-275 g (mulheres). </li><li> Antes da cirurgia pesam e anestesiar os ratos com uma mistura de cetamina / xilazina (90/13 mg / kg; ip). <ol><li> Shave, e depois limpar a cabeça ea área no ombro direito (perto de base do pescoço) com álcool e paramentação. </li><li> Injectar penicilina (450.000 Ul / rato, sc) para proteger contra a infecção e 2 ml de solução salina (SC) para a hidratação. Aplique gel lágrima nos olhos do rato para prevenir o ressecamento induzida por anestesia. </li></ol></li><li> Colocar o rato sobre o seu abdómen e fazer uma incisão, utilizando um bisturi, no topo da cabeça, entre os olhos, e caudalmente para as orelhas do rato. </li><li> Colocar o rato na sua parte traseira com os antebraços coladas à superfície. Levantar a pele no local da incisão, apenas rostral da clavícula, com uma pinça e fazer de 1 cm de corte longitudinal com pequenas tesouras. </li><li> Usando duas pinças retas, separe a gordura e outros tecidos até o vei jugular externan é exposta. </li><li> Empurrar as pontas das pinças rectas sob a veia para levantar e separar a veia do tecido circundante. Limpe cuidadosamente a veia de qualquer tecido aderir e, em seguida, inserir uma pinça curva sob a veia para mantê-lo levantado e ligeiramente alongadas. </li><li> Adicione uma pequena, em forma de v, cortado na superfície superior da veia utilizando uma tesoura pequena mola. <ol><li> Segurar o corte aberto usando um vaso dilatador, e avançar o &quot;curto&quot;, 3 centímetros da ponta do cateter dentro da veia para o coração até a gota de silicone está no ponto de incisão. </li><li> Amarrar o cateter na veia com 3 suturas: um caudal tão longe quanto possível, apenas uma rostral à gota de silicone e o terceiro uma tão longe quanto possível rostral. </li><li> Passa salina através do cateter depois de cada sutura para assegurar que permanece livre e que as suturas não são muito apertadas. </li></ol></li><li> Retire a fita em torno dos braços e coloque rato lado ventral para baixo. <ol><li> Insira uma pinça hemostática ttravés do lado caudal da incisão cabeça e empurrar para separar a pele do tecido subjacente para criar uma &quot;bolsa&quot; subcutânea. </li><li> Orientar a pinça hemostática sob a pele para a abertura nos ombros onde o cateter foi inserido. </li><li> Romper o tecido conjuntivo usando a hemostática, e prender firmemente o cateter no ponto mais rostral, abaixo da base da &quot;5--se.&quot; </li></ol></li><li> Retire a &quot;5-up&quot; e passe a ponta mais longa do cateter sob a pele e para fora da incisão localizada na parte superior da cabeça do rato. <ol><li> Use a tesoura para cortar o cateter abaixo de onde a pinça hemostática foi pinçada e recolocar a ponta mais longa da &quot;5-up.&quot; </li><li> Puxar o cateter ao longo do eixo de metal do &quot;5&quot; toda a maneira para o suporte de plástico. Passe salina através de garantir o livre fluxo. </li></ol></li><li> Coloque o rato em suas costas, e suturar a incisão apenas perto da clavícula. A incisão cabeça deve remaem aberto. </li><li> Colocar o rato num aparelho estereotáxico. Puxe a pele longe na incisão no topo da cabeça com grampos de bulldog e limpar e secar a superfície do crânio. </li><li> Use uma broca manual, para perfurar 04:56 buracos no crânio e insira parafusos nos furos para atuar como andaimes para a cabeça-cap. <ol><li> Coloque o conector &quot;5-up&quot; entre os parafusos e guarde o excesso de comprimento do cateter para o &quot;bolso&quot; subcutâneo feito anteriormente usando a pinça hemostática. </li></ol></li><li> Use cimento dental para fixar a &quot;5-up&quot; para o topo do crânio. Remover o rato a partir do aparelho estereotáxico após o cimento está completamente seco. </li><li> Submeter o rato pós-operatório cuidados, que consiste de cetoprofeno (analgésico, 5 mg / kg, sc) e 2 ml de solução salina (sc). Administrar cetoprofeno por mais 2 dias após a cirurgia para ajudar com a gestão da dor. </li><li> Começando após a cirurgia de 48 horas, lave ratos diárias wom uma mistura de heparina e gentamicina em solução salina estéril (7,5 UI + 12 ug; 0,2-0,3 ml) ao longo do período de recuperação de aproximadamente 2 dias e, durante a fase de auto-administração de heroína. </li></ol> 4. Procedimento Behavioral A linha de tempo para o procedimento de comida induzida por restrição de aumento de procura de heroína é apresentado na Figura 1. <ol><li> Câmaras de condicionamento operante. <ol><li> Casa ratos individualmente em câmaras de condicionamento operante fechado em som atenuando compartimentos de madeira, equipados com um ventilador. </li><li> Cada câmara é composta por um piso de aço inoxidável grade de metal, uma frente e de trás da parede de acrílico e duas paredes laterais do painel de metal. Monte duas alavancas retráteis nove centímetros acima do chão da parede lateral direita, e localizar um cue-luz acima de cada alavanca. Respondendo sobre a alavanca (ativo) emparelhado de drogas ativa uma bomba de infusão, respondendo sobre a alavanca (inativo) pareado nondrug não tem consequências programáveis. &lt;/ Li&gt; <li> Localize um módulo de som (2,9 kHz) acima da alavanca ativa, e posicionar uma casa de luz vermelha na parte superior central da parede lateral esquerda. </li><li> Ligar a bomba de drogas para o cateter através de um suporte giratório de líquido e tubagem Tygon protegido com uma mola de metal. Além disso, equipar cada uma das câmaras com um funil de comida e uma garrafa de água que permite o acesso irrestrito a água e comida. </li></ol></li><li> Dia habituação: <ol><li> Após a recuperação da cirurgia, os ratos mover para as câmaras operantes de formação e permitir, por um período de habituação de 24 horas. </li><li> Não conecte os ratos para a mola de metal e não ativar o complexo cue-light/tone. </li><li> Certifique-se de que a alavanca ativa permanece retraída, mas garantir a alavanca inativo é estendido para ajudar com a discriminação entre as duas alavancas durante o treinamento. </li></ol></li><li> A heroína auto-administração: <ol><li> Conecte o conector de 5 até o tubo Tygon e anexar a mola de metal. </li><li> Permitir que os ratos se auto-administer heroína (0,1 mg / kg / infusão) durante 10 dias, durante três sessões de 3 hr, separadas por intervalos de 3 h. </li><li> Comece cada sessão após o início da fase escura (cerca de 9h30 em nosso laboratório) com a extensão das alavancas ativos e inativos, bem como a iluminação da casa de luz e ativação do complexo cue-light/tone para 30 seg. </li><li> Respostas sobre o resultado alavanca ativa na ativação da bomba de drogas (5 seg, 0,13 ml / infusão) e início de um período de tempo limite de 20 segundos durante o qual a casa de luz é desligada eo complexo luz cue / tom acima da alavanca ativa é ativado (FR-1, 20 seg timeout). Durante o período de tempo limite, as respostas alavanca ativos são registrados, mas não reforçados. Respostas alavanca inativos são registrados, mas não têm consequências programáveis. </li><li> Após cada sessão de 3 horas, a alavanca ativa é recolhido enquanto a alavanca inativo permanece estendido até 1 hora antes da primeira sessão do dia seguinte. </li></ol></li><li>Abstinência e da restrição alimentar: <ol><li> Após o treinamento de auto-administração, remover os ratos das câmaras de condicionamento operante e individualmente abrigá-los na ACF, e dar acesso irrestrito a água e comida para um dia de drogas washout. </li><li> Divida os ratos em dois grupos: alimentação restrita (FDR) ou saciada, combinados de acordo com o peso corporal, número de infusões e respostas alavanca ativos através dos últimos 5 dias de treinamento. </li><li> Após o dia de drogas lavagem, remover o alimento que os ratos FDR &#39;, e alimentá-los cerca de 15 g de ração às 1:30 AM. Ajuste a quantidade de comida por 14 dias de abstinência para manter o peso corporal dos ratos FDR &#39;(BW) para cerca de 90% do seu próprio BW linha de base. </li></ol></li><li> Teste procurando por drogas: Na manhã do dia 14 de abstinência, o retorno dos ratos para as câmaras de condicionamento operante e anexá-los à mola de metal. Use uma 1 hora ou 3 horas da sessão durante a qual as respostas alavanca ativos e inativos tem as mesmas conseqüências de ums na formação de auto-administração, excluindo a disponibilidade do fármaco (isto é, sob condições de extinção). </li></ol>

<ol>
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H., Quinn, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+dopamine+D1-like+receptors+in+acute+food+deprivation-induced+reinstatement+of+heroin+seeking+in+rats.">A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats.</a> Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).</li><li>Katz, J. L., Higgins, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+validity+of+the+reinstatement+model+of+craving+and+relapse+to+drug+use.">The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use.</a> Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).</li><li>Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+model+of+drug+relapse:+an+assessment+of+the+validity+of+the+reinstatement+procedure.">Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure.</a> Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).</li><li>Zacny, J. P., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+a+restricted+feeding+regimen+on+cigarette+smoking+in+humans.">The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans.</a> Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).</li><li>Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. 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M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+chronic+food+restriction+on+cue-induced+heroin+seeking+in+abstinent+male+rats.">The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats.</a> Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).</li><li>Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambience+and+drug+choice:+cocaine-+and+heroin-taking+as+a+function+of+environmental+context+in+humans+and+rats.">Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats.</a> Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).</li></ol>

Aprovação para todos os procedimentos experimentais foi concedida pelo Comitê da Universidade Concordia Ética em Pesquisa Animal, de acordo com as diretrizes do Canadian Council on Animal Care. Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes. FS e TD igualmente contribuído para o desenvolvimento do processo de aqui e para a redação do manuscrito apresentado.

O procedimento aqui descrito tem forte validade de face, porque 1) que permite a ingestão de drogas voluntária e controle sobre a administração da droga, 2) ele usa uma via de administração que é comum em viciados em humanos, 3) reflete (períodos) prolongados de exposição à droga e abstinência, e 4) que evita a formação de extinção antes do teste de procura de droga que é parte integrante do processo de reintegração, mas é raramente observada em viciados em humanos 14. Além disso, os mode...

Uma das principais dificuldades no tratamento da dependência de drogas é a alta taxa de recidiva, mesmo após longos períodos de abstinência 1,2. Estudos em humanos viciados identificaram uma contribuição crítica dos desafios ambientais, como a exposição a estímulos discretos associada à droga ou ambientes 3 ​​e eventos estressantes da vida 4, para a recaída. Um desafio ambiental comum, que foi encontrado para ter um efeito sobre o consumo de drogas e desejo é restrição alimentar crônica. Por exemplo, foi relatado que a restrição calórica crônica está associada ao aumento do cigarro fumar 5. &#160; Além disso, a gravidade da dieta (restrição calórica) é positivamente correlacionada com um aumento da prevalência do uso de drogas em mulheres jovens 6. No entanto, os mecanismos cerebrais subjacentes não são totalmente compreendidos. Devido a considerações práticas e éticas relacionadas à pesquisa humana, os modelos animais hav sido desenvolvido para identificar os mecanismos neuronais relevantes. Nós já usou o procedimento 7,8 reintegração de demonstrar retomada da droga extinta buscando em ratos expostos a aguda (24-48 horas) privação de alimentos 9,10. No entanto, uma parte integrante do processo de reintegração é um período de extinção que não é uma característica comum de tratamentos de dependência de drogas 11 (mas veja 12 Epstein et al., Para uma discussão abrangente sobre a validade do processo de reintegração). Além disso, no caso particular de manipulações dietéticas em seres humanos, apenas restrição alimentar crônica, mas privação de alimento não aguda, foi mostrado para aumentar a eficácia 5,13 de tirar drogas. Conseqüentemente, sugerimos um &quot;procedimento de abstinência&quot; 14, que permite o estudo dos efeitos da restrição alimentar crônica em busca de drogas. Usando este procedimento que recentemente demonstraram um aumento robusto de heroin buscando em ratos abstinentes após a exposição a 14 dias de restrição alimentar leve 15.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="840">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">Name</td>
			<td style="width:411px;">Company</td>
			<td style="width:252px;">Catalogue Number</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml)</td>
			<td style="width:411px;">Bioniche Animal Health</td>
			<td style="width:252px;">Obtained through local distributer</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Xylazine (Rompun, 100 mg/ml)</td>
			<td style="width:411px;">Bayer</td>
			<td style="width:252px;">Obtained through local distributer</td>
		</tr>
		<tr height="111">
			<td height="111" style="height:111px;width:177px;">Heroin HCl</td>
			<td style="width:411px;">National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA</td>
			<td style="width:252px;"></td>
		</tr>
		<tr height="137">
			<td height="137" style="height:137px;width:177px;">Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml</td>
			<td style="width:411px;">CDMV, Canada</td>
			<td align="right" style="width:252px;">12868</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;">Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">Name</td>
			<td style="width:411px;">Company</td>
			<td style="width:252px;">Catalogue Number</td>
		</tr>
		<tr height="137">
			<td height="137" style="height:137px;width:177px;">Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037)</td>
			<td style="width:411px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:252px;">1118915A</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">GE marine silicon</td>
			<td style="width:411px;">GE</td>
			<td style="width:252px;">SE-1134</td>
		</tr>
		<tr height="137">
			<td height="137" style="height:137px;width:177px;">Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060)</td>
			<td style="width:411px;">VWR</td>
			<td style="width:252px;">63018-044</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">Cannulae (22 G, 5-up)</td>
			<td style="width:411px;">Plastics One</td>
			<td style="width:252px;">C313G-5up</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Liquid swivels, plastic, 22 G</td>
			<td style="width:411px;">Lomir Biomedical, Inc.</td>
			<td style="width:252px;">RSP1</td>
		</tr>
		<tr height="137">
			<td height="137" style="height:137px;width:177px;">Fixed speed infusion pump (3.3 rpm)</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">A73-01-3.3</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">Rat test cage</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H10-11R-TC</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Stainless steal grid floor</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H10-11R-TC-SF</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">House light-rat</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H11-01R</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Single high-bright cue-rat</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H11-03R</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Tone module 2.9 kHz</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H12-02R-2.9</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">Retractable lever-rat</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H23-17RA</td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:177px;">Balance arm</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H29-01</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Sound attenuation boxes</td>
			<td style="width:411px;">Concordia University</td>
			<td style="width:252px;">Home made</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">System controller 2</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">SYS CTRL 2</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:177px;">System power base</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H01-01</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Habitest Universal Linc</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H02-08</td>
		</tr>
		<tr height="137">
			<td height="137" style="height:137px;width:177px;">Environment connection board &#38; Linc cable</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">H03-04</td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:103px;width:177px;">Graphic State Notation 3</td>
			<td style="width:411px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:252px;">GS3</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats

Em humanos viciados em drogas, a exposição a estímulos ou ambientes que foram previamente associados com o consumo de drogas associada à droga pode desencadear uma recaída durante a abstinência. Além disso, vários desafios ambientais pode exacerbar este efeito, bem como aumentar a ingestão do medicamento em curso. O procedimento que descrevemos aqui destaca o impacto de um desafio comum ambiental, restrição alimentar, na ânsia de drogas que se expressa como um aumento da procura de droga em ratos abstinentes. Os ratos são implantados com cateteres intravenosos iv crônicas e treinados para pressionar uma alavanca para iv heroína ao longo de um período de 10-12 dias. Após a fase de auto-administração de heroína os ratos são retirados das câmaras de condicionamento operante e alojados nas instalações de cuidados com os animais por um período de pelo menos 14 dias. Enquanto um grupo é mantido sob acesso irrestrito a alimentos (grupo saciado), um segundo grupo (grupo FDR) é exposto a um mild regime de restrição alimentar que resulta em seus pesos corporais mantida a 90% do seu peso corporal não restrita. No dia 14 de restrição alimentar os ratos são transferidos de volta para o ambiente de formação de drogas, e um teste de procura de droga é executado em condições de extinção (ou seja. Prensas de alavanca não resultam na entrega de heroína). O procedimento aqui apresentado resulta em um aumento muito forte de busca de heroína no dia do teste nos ratos alimentos restrito. Além disso, em comparação com os agudos manipulações de privação alimentar que usamos antes, o procedimento atual é um modelo mais clinicamente relevante para o impacto da restrição calórica em busca de drogas. Além disso, pode ser mais estreita para a condição humana como os ratos não são obrigados a passar por uma fase de formação de extinção antes do teste de procura de droga, que é um componente integrante do processo de restabelecimento popular.

O peso corporal ao longo do tempo: Os resultados típicos demonstram que o peso corporal permanecer estável ao longo de heroína treinamento de auto-administração. Durante a abstinência, ratos com acesso irrestrito à comida para aumentar seu peso corporal, enquanto que aqueles que são alimento restrito diminuir seu peso corporal para cerca de 90% do seu próprio peso corporal original ou 75-80% do peso corporal dos ratos saciados (Figura 2) . Infusões respos...

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A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Um procedimento que permite uma demonstração de aumento robusto de droga que procura, em ratos com restrição de alimentos é descrito. Após o treinamento de auto-administração de heroína, os ratos passam por um período de abstinência, em um ambiente livre de drogas, durante a qual eles são levemente restrição alimentar. Procura de droga é então testada no ambiente associadas à droga.

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

11.0K visualizações.  Concordia University.  Um procedimento que permite uma demonstração de aumento robusto de droga que procura, em ratos com restrição de alimentos é descrito. Após o treinamento de auto-administração de heroína, os ratos passam por um período de abstinência, em um ambiente livre de drogas, durante a qual eles são levemente restrição alimentar. Procura de droga é então testada no ambiente associadas à droga. 

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A Novel Procedure for Evaluating the Reinforcing Properties of Tastants in Laboratory Rats: Operant Intraoral Self-administration

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste reactivity with the behavioral aspects of operant self-administration of drugs. Under very brief general anaesthesia, rats are implanted with an intraoral (IO) cannula that allows delivery of test solutions directly in the oral cavity. Animals are then tested in operant self-administration chambers whereby they can press a lever to receive IO infusions of test solutions. IO self-administration has several advantages over experimental procedures that involve drinking a solution from a spout&#160;or operant responding for solid pellets or solutions delivered in a receptacle. Here, we show that IO self-administration can be employed to study self-administration of high fructose corn syrup (HFCS). Rats were first tested for self-administration on a progressive ratio (PR) schedule, which assesses the maximum amount of operant behavior that will be emitted for different concentrations of HFCS (i.e.&#160;8%, 25%, and 50%). Following this test, rats self-administered these concentrations on a continuous schedule of reinforcement (i.e.&#160;one infusion for each lever press) for 10 consecutive days (1 session/day; each lasting 3 hr), and then they were retested on the PR schedule. On the continuous reinforcement schedule, rats took fewer infusions of higher concentrations, although the lowest concentration of HFCS (8%) maintained more variable self-administration. Furthermore, the PR tests revealed that 8% had lower reinforcing value than 25% and 50%. These results indicate that IO self-administration can be employed to study acquisition and maintenance of responding for sweet solutions. The sensitivity of the operant response to differences in concentration and schedule of reinforcement makes IO self-administration an ideal procedure to investigate the neurobiology of voluntary intake of sweets.

The current study evaluates a novel procedure for assessing the reinforcing effects of palatable solutions in laboratory rats: intraoral self-administration. To this end, operant responding (i.e.&#160;lever pressing) for intraoral infusions of sweet solutions at different concentrations was measured on continuous and progressive ratios schedules of reinforcement.

Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste ...

Comportamento

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate drug-seeking behavior and prompt relapse in abstinent drug users. We have developed a procedure to study the behavioral and neural processes that mediate the impact of context on alcohol-seeking behavior in rats. Following acclimation to the taste and pharmacological effects of 15% ethanol in the home cage, male Long-Evans rats receive Pavlovian discrimination training (PDT) in conditioning chambers. In each daily (Mon-Fri) PDT session, 16 trials each of two different 10 sec auditory conditioned stimuli occur. During one stimulus, the CS+, 0.2 ml of 15% ethanol is delivered into a fluid port for oral consumption. The second stimulus, the CS-, is not paired with ethanol. Across sessions, entries into the fluid port during the CS+ increase, whereas entries during the CS- stabilize at a lower level, indicating that a predictive association between the CS+ and ethanol is acquired. During PDT each chamber is equipped with a specific configuration of visual, olfactory and tactile contextual stimuli. Following PDT, extinction training is conducted in the same chamber that is now equipped with a different configuration of contextual stimuli. The CS+ and CS- are presented as before, but ethanol is withheld, which causes a gradual decline in port entries during the CS+. At test, rats are placed back into the PDT context and presented with the CS+ and CS- as before, but without ethanol. This manipulation triggers a robust and selective increase in the number of port entries made during the alcohol predictive CS+, with no change in responding during the CS-. This effect, referred to as context-induced renewal, illustrates the powerful capacity of contexts associated with alcohol consumption to stimulate alcohol-seeking behavior in response to Pavlovian alcohol cues.

A procedure to study the capacity of an alcohol associated environmental context to trigger the renewal of alcohol-seeking behavior in rats is described.

Um procedimento para Observar Renovação induzida por Contexto de pavloviano condicionado Comportamento Álcool-seeking em Ratos

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

A Treatment Package without Escape Extinction to Address Food Selectivity

Feeding difficulties and feeding disorders are a commonly occurring problem for young children, particularly children with developmental delays including autism. Behavior analytic interventions for the treatment of feeding difficulties oftentimes include escape extinction as a primary component of treatment. The use of escape extinction, while effective, may be problematic as it is also associated with the emergence of challenging behavior (e.g., extinction burst). Such challenging behavior may be an acceptable side effect in treatment cases where feeding problems are severe and chronic (e.g., failure to thrive). However, in more acute cases (e.g., selective eating), the negative side effect may be unwarranted and undesired. More recent research on the behavioral treatment of food selectivity has begun to evaluate treatments for feeding difficulties that do not include escape extinction (e.g., demand fading, behavioral momentum), with some success. However, research to date reveals individual differences in responsiveness to such treatments and no clear preferable treatment has emerged. This manuscript describes a multi-component treatment package that includes shaping, sequential presentation and simultaneous presentation, for the treatment of food selectivity in four young children with developmental delays. This treatment package extends the literature on the behavioral treatment for food selectivity and offers a multi-component treatment protocol that may be clinically applicable across a range of treatment scenarios and settings.

Feeding difficulties are a common problem for children with developmental disorders, including autism, and behavioral interventions often include escape extinction. Recent research has begun to evaluate treatments that do not include escape extinction. This manuscript describes a multicomponent treatment package that does not use escape extinction to treat feeding difficulties.

Um pacote de tratamento, sem escapar da extinção a Morada Food Seletividade

Feeding difficulties and feeding disorders are a commonly occurring problem for young children, particularly children with developmental delays including ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Feeding Experimentation Device (FED): Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in mice: the Feeding Experimentation Device (FED). FED is an open-source system that was designed to facilitate flexibility in food intake studies. Due to its compact and battery powered design, FED can be placed within standard home cages or other experimental equipment. Food intake measurements can also be synchronized with other equipment in real-time via FED's transistor-transistor logic (TTL) digital output, or in post-acquisition processing as FED timestamps every event with a real-time clock. When in use, a food pellet sits within FED's food well where it is monitored via an infrared beam. When the pellet is removed by the mouse, FED logs the timestamp onto its internal secure digital (SD) card and dispenses another pellet. FED can run for up to 5 days before it is necessary to charge the battery and refill the pellet hopper, minimizing human interference in data collection. Assembly of FED requires minimal engineering background, and off-the-shelf materials and electronics were prioritized in its construction. We also provide scripts for analysis of food intake and meal patterns. Finally, FED is open-source and all design and construction files are online, to facilitate modifications and improvements by other researchers.

Feeding Experimentation Device FED: Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Feeding Experimentation Device (FED) is an open-source device for measuring food intake in mice. FED can also synchronize food intake measurements with other techniques via a real-time digital output. Here, we provide a step-by-step tutorial for the construction, validation, and usage of FED.

Alimentando Dispositivo Experimentação (FED): construção e validação de um dispositivo de código aberto para medição Food Intake em roedores

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in ...

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors remains poorly understood. In Drosophila melanogaster, environmental cues, such as food availability, affect mating activity offering a tractable system to investigate the mechanisms modulating sexual behavior. In D. melanogaster, environmental cues are often sensed via the chemosensory gustatory and olfactory systems. Here, we present a method to test the effect of environmental chemical cues on mating behavior. The assay consists of a small mating arena containing food medium and a mating couple. The mating frequency for each couple is continuously monitored for 24 h. Here we present the applicability of this assay to test environmental compounds from an external source through a pressurized air system as well as manipulation of the environmental components directly in the mating arena. The use of a pressurized air system is especially useful to test the effect of very volatile compounds, while manipulating components directly in the mating arena can be of value to ascertain a compound's presence. This assay can be adapted to answer questions about the influence of genetic and environmental cues on mating behavior and fecundity as well as other male and female reproductive behaviors.

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

We demonstrate an assay to analyze the environmental and genetic cues that influence mating behavior in the fruit fly Drosophila melanogaster.

Um método para testar o efeito de sugestões ambientais no comportamento de acoplamento em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to acquire a conditioned place preference in a drug-paired compartment, and after the post-conditioning test, they perform several sessions to extinguish the established preference. The CPP permits the evaluation of the conditioned rewarding effects of drugs related to environmental cues. Then, the extinguished CPP can be robustly reinstated by the non-contingent administration of a priming dose of the drug, and by exposure to stressful stimuli. Both methods will be explained here. When the animal reinitiates the behavioral response, a reinstatement of the conditioned reward is considered to have taken place.
The main advantages of this protocol are that it is non-invasive, inexpensive, and simple with good validity criteria. In addition, it allows the study of different environmental manipulations, such as stress or diet, which can modulate relapse into drug seeking behaviors. However, one limitation is that if the researcher aims to explore the motivation and primary reinforcing effects of the drug, it should be complemented with self-administration procedures, as they involve operant responses of animals.

This protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse. This procedure permits the measurement of relapse in laboratory animals, considering the impact of drug-associated environmental cues as craving and relapse in abstaining addicts is currently the focus of drug-abuse treatment programs.

Reintegração de busca de drogas em ratos utilizando o paradigma de preferência lugar condicionado

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

Cócegas, uma técnica para induzir o efeito positivo ao manusear ratos

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

A Conflict Model of Reward-seeking Behavior in Male Rats

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual stimulus) that represents a high-value reward, and the aversive stimuli (pins), are concurrently presented. The male rats have to climb or jump over the obstacle full of pins to approach and investigate the sexual partner. If the animal persists in their approaching behavior regardless of the aversive stimuli, it is considered as a maladaptive or risky reward-seeking behavior. The conflict task permits the evaluation of deficit in inhibitory control resulting from exposure to abused drug, such as morphine, or a stressful event. 
The main advantage of this model is that it provides a simple and quick way to discover the deficit in inhibitory control after exposure to opiate drugs or other stressful events. In addition to opiates, this behavioral model would also be useful for quickly discovering the inhibitory control deficits induced by other addictive drugs. However, the limitation is that the male rats' performance may be subject to exercising effects with repeated testing under this conflict task. In the future, one can hope that the individuals with the compulsive phenotype of reward-seeking behavior after exposure to opiates will be identified based on modifying this conflict model.

This conflict model is used to measure the impairment of inhibitory control after exposure to addictive drugs, or other factors that may influence inhibitory control. A sexual stimulus and an aversive obstacle are concurrently presented, thus male rats have to conquer the obstacle to approach the sexual reward.

Um modelo de conflito de comportamento de busca de recompensa em ratos machos

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

Assessing the Coherence of Parents&#039; Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

Avaliando a coerência das narrativas curtas dos pais em relação ao seu filho usando o procedimento de amostra de fala de cinco minutos

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...