Os autores reconhecem o apoio financeiro de uma National Science Foundation (NSF) conceder CEE-0540832 intitulado &quot;Tecnologias Mid-Infrared da Saúde e do Meio Ambiente (Mirthé)&quot;

1. Preparação de Instrumentos <ol><li> Ligue a fonte de alimentação externa para a amônia plataforma sensor óptico, controlador de laser de diodo, um costume construído unidade eletrônica de controle (CEU), o amostrador ar, bomba de ar, e laptop. </li><li> Verifique se o escape e ventiladores do sensor de amônia estão operando. NOTA: Um está localizado na parte de trás do sensor, o segundo é encontrado dentro do sensor, que é facilmente acessível. </li><li> Assegurar o módulo de detecção acústica e a temperatura da válvula de agulha são a 38,0 ° C, verificando o visor digital localizada no lado da caixa de sensor de amónia. Aguarde cerca de 35 minutos a partir do momento do sensor é fornecido energia para que a temperatura se estabilize. </li><li> Definir tubulação de entrada e temperatura bocal a 55 ° C, clicando no nome de um ícone &quot;ChangeT&quot; encontrado na área de trabalho do amostrador respiração. A temperatura pode ser alterado clicando na seta para cima ou para baixo seguida, clicando em &quot;UPDcomeu Temp &quot;. Clique em &quot;Exit&quot; para retornar à área de trabalho. Permitir que o sistema de, pelo menos, 5 minutos para a estabilização da temperatura. Mantendo a temperatura do dispositivo de amostragem e tubo de 55 ° C minimiza a perda da superfície de amoníaco. </li><li> Abra o software no laptop que controla o sensor de amônia. O programa pode ser acessado dentro de uma pasta chamada &quot;NH3 Programa Sensor respiração&quot; no ambiente de trabalho. Dentro dessa pasta, o usuário deve selecionar o ícone &quot;software LabVIEW principal&quot;. Esta pasta contém várias aplicações, mas o usuário deve selecionar &quot;Mainsequence.vi&quot; para acessar a interface desejada. Selecione &quot;run&quot; no canto superior esquerdo da tela. NOTA: Isto começa a linha de bloqueio sequência de calibração. O laser de monitor QEPAS opera sobre uma corrente ideal, o qual é seleccionado, durante um procedimento de bloqueio de linha automatizada. Este processo demora cerca de 25 min. </li><li> Criar uma nova sessão no amostrador de tal forma que eAsessão assunto ch tem seu próprio arquivo que está salvo em um flash drive conectado. NOTA: Isto é realizado através da abertura do programa &quot;Respiração Sampler&quot; encontrado na área de trabalho do amostrador. Há espaço para identificar a sessão de forma adequada. Todos os dados gerados durante a sessão serão salvos na unidade flash sob este identificador. A data do experimento é normalmente usado como parte do nome do arquivo. A entrada e temperatura bocal deve ser ajustado antes de entrar no programa respiração amostragem. </li><li> Insira um novo bocal descartável para o tubo de entrada. Usar luvas descartáveis ​​para evitar a contaminação bocal com amônia a partir de dedos. </li></ol> 2. Coleta de Amostras Respiração NOTA: O Conselho de Revisão Institucional relevante (Conselho de Ética) deve aprovar qualquer estudo que envolva seres humanos. Há muitos fatores que podem influenciar drasticamente respiração amônia. Esses fatores podem alterar as medições de amônia respiração por diretamente umffecting níveis de amônia sistêmicas ou afectando a jornada de metabólitos de respiração dos pulmões para a instrumentação. <ol><li> Certifique-se de assuntos chegar ao laboratório em jejum, depois de ter consumido nenhum alimento por cerca de 12 horas após a chegada e que eles abstiveram-se de exercício de manhã antes do teste. </li><li> Certifique-se de nenhuma substância foi introduzida na boca durante, pelo menos, 1 hora antes da recolha de dados. Certifique-se de que os sujeitos escovar os dentes maior do que 1 hora antes do teste. </li><li> Assente o assunto na frente do sensor de amônia. Instrua o assunto para segurar o tubo de entrada e certifique-se que não toque no bocal para evitar a contaminação de amônia. </li><li> Clique em &quot;Iniciar&quot; na interface amostrador. Já o tema expirar no bocal durante o tempo que eles podem, ou até que o operador considera que a amostra seja suficiente. NOTA: Esta é uma única expiração completa, com duração mínima de 10 segundos. Boca pressão é medida em tempo real como um substitutopara a taxa de fluxo. Um medidor de pressão com código de cores ajuda a produzir assunto e manter a pressão de expiração desejado de 10 cm de água, o que representa uma taxa de fluxo de expiração de 50 ml / seg. Este fluxo foi selecionado, uma vez que tem sido adotado pela ATS / ERS para o protocolo para determinar Fe NO. Esta taxa de fluxo de expiração é realizável por crianças e adultos. Similarmente três exalações reprodutíveis devem ser obtido que diferem menos do que 10%. </li><li> Clique em &quot;Stop&quot; na interface do amostrador quando a amostra de ar é concluído. </li></ol> 3. Medição amostra de ar <ol><li> Uma vez que uma amostra de respiração foi analisado, o técnico de laboratório operando o monitor, tem a capacidade de analisar qualquer segmento de perfil que respiração. A parte da respiração que é de interesse é o segmento de fase III. Esta caracteriza-se por um &quot;patamar&quot; na concentração de dióxido de carbono e é encontrada no meio de fase tardia da breath. </li><li> Selecione a parte da fase III da amostra, arrastando as linhas verticais na interface amostrador começar quando planaltos de dióxido de carbono e parar logo antes da queda de pressão do ar. Veja a Figura 1 para o esclarecimento. </li><li> Salve os dados para o flash drive, clicando em &quot;Loja&quot; na interface de tela de toque amostrador. </li><li> Uma vez que os dados de respiração foram armazenados, o usuário pode selecionar &quot;Iniciar&quot; para iniciar uma nova amostra de ar. </li></ol> 4. Ilustrando os efeitos da Boca Rinse e pH na respiração de amônia <ol><li> Amostra 3 respirações para estabelecer o nível de amônia linha de base. Certifique-se de que a respiração são tomadas, pelo menos, 5 min afastados uns dos outros. </li><li> Lavar bem a boca com uma alíquota de 30 ml de água por 60 segundos. </li><li> Coletar uma amostra de ar dentro de 60 segundos da lavagem (Seção 2). Recolher amostras de respiração ao longo da hora seguinte, para observar a mudança de amoníaco ao longo do tempo. NOTA: Samples pode ser tomado tão freqüentemente quanto cada minuto, mas intervalos mais longos são normalmente utilizados. </li><li> Enxaguar a boca meticulosamente com uma alíquota de 30 ml de solução básica (bicarbonato de sódio em água) durante 60 segundos e repita 4.2.1. </li><li> Enxaguar a boca meticulosamente com uma alíquota de 30 ml de solução ácida por 60 segundos e repita 4.2.1. </li></ol> 5. Ilustrando os efeitos da entrada e Transporte tubulação Temperaturas em Respiração Amônia <ol><li> Exemplos de três ciclos ao longo de 15 min com a temperatura de entrada ajustada para abaixo da temperatura do corpo, cerca de 30 ° C. </li><li> Aumente as temperaturas de entrada e tubulação de transporte de 55 ° C, respectivamente, usando um ícone no desktop na interface da tela de toque do amostrador respiração. Permitir que o sistema de, pelo menos, 5 minutos para atingir o estado estacionário. </li><li> Amostra 3 respirações, 5 min à parte na entrada aquecida. </li></ol>

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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+ammonia+concentrations+in+cirrhosis+patients-still+confusing+after+all+these+years.">Determination of ammonia concentrations in cirrhosis patients-still confusing after all these years.</a> Annals of hepatology. 10 Suppl 2, (2011).</li><li>Mpabanzi, L., Ol de Damink, S. W. M., van de Poll, M. C. G., Soeters, P. B., Jalan, R., Dejong, C. H. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ammonia+in+breath+and+emitted+from+skin.">Ammonia in breath and emitted from skin.</a> Journal of breath research. 7 (1), (2013).</li><li>Span&#283;l, P., Dryahina, K., Smith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+study+of+the+influence+of+inhaled+compounds+on+their+concentrations+in+exhaled+breath.">A quantitative study of the influence of inhaled compounds on their concentrations in exhaled breath.</a> Journal of breath research. 7 (1), (2013).</li><li>Boots, A. W., van Berkel, J. J. B. N., Dallinga, J. W., Smolinska, A., Wouters, E. F., van Schooten, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+versatile+use+of+exhaled+volatile+organic+compounds+in+human+health+and+disease.">The versatile use of exhaled volatile organic compounds in human health and disease.</a> Journal of breath research. 6 (2), (2012).</li><li>Hibbard, T., Killard, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breath+ammonia+levels+in+a+normal+human+population+study+as+determined+by+photoacoustic+laser+spectroscopy.">Breath ammonia levels in a normal human population study as determined by photoacoustic laser spectroscopy.</a> Journal of breath research. 5 (3), (2011).</li><li>Wang, T., Pysanenko, A., Dryahina, K., Span&#283;l, P., Smith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+breath,+exhaled+via+the+mouth+and+nose,+and+the+air+in+the+oral+cavity.">Analysis of breath, exhaled via the mouth and nose, and the air in the oral cavity.</a> Journal of breath research. 2 (3), (2008).</li><li>Amann, A., Smith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Volatile Biomarkers. 1st Edition. , (2013).</li></ol>

Dr. Risby serves as a consultant for Loccioni Humancare the manufacturer of the breath sampler.

Os benefícios de um procedimento não-invasivo capaz de detectar metabólitos traço em tempo real são óbvias. No entanto, o campo da pesquisa respiração tem se esforçado para cumprir esse potencial. Medição da respiração é um processo dinâmico vulneráveis ​​a muitos fatores de confusão. Nossa abordagem tem pontos fortes importantes: especificamente, a sensibilidade ea velocidade do Arroz QEPAS monitor de amônia baseado acoplado ao amostrador fôlego nos permitiram avaliar e identificar os fatores de ...

A amônia é um subproduto onipresente do metabolismo de proteínas 1. Medição de amônia, portanto, pode ajudar os médicos a avaliar várias doenças e estados de bem-estar 2. No entanto, a amônia é difícil medir com precisão, através do sangue ou de respiração, porque é muito reativo. Embora comumente usado, ensaios de sangue têm inúmeras desvantagens, incluindo preocupações básicas sobre precisão 3. Mas o grande problema com os ensaios de sangue é a realidade que eles só já recolhidas episodicamente. Isto é importante porque a fisiologia de amoníaco, bem como a glicose no sangue e muitos outros processos metabólicos, são fluidos e sempre em mudança 4. Em contraste, os ensaios de respiração são totalmente não-invasiva e rápida, permitindo assim facilmente medidas repetidas. Assim, a medição de amônia respiração é atraente porque pode dirigir uma necessidade não atendida sério de uma forma única. Coleta de respiração, no entanto, apresenta preocupações específicas. Considerando flebotomia inerentemente leva o jeopardy de erro de várias maneiras imprevisíveis (por exemplo, tempo de torniquete, a contaminação suor, hemólise de glóbulos, atraso na medição de laboratório, etc 5), os pesquisadores de medição respiração devem lidar com um grupo diferente de novos desafios: variabilidade em respirar, a contaminação com mucosa bucal ou amoníaco bacteriana, a influência do ar e o aparelho de humidade e temperatura ambiente, etc 6. Na verdade, não é prudente subestimar a tarefa em conectar equipamentos experimentais para os seres humanos através de procedimentos experimentais para descobrir biologia desconhecida. Em parte devido a esses obstáculos, a respiração de amônia ainda não atingiu o seu potencial. Aqui, apresentamos o nosso protocolo de medição de amônia respiração por resultados rápidos e precisos. Nosso protocolo tem força em três áreas: o monitor, o amostrador interface, e atenção para as influências humanas. O monitor foi construído por colegas da Universidade Rice, como descrito anteriormente 7. A base do measurement é um quartzo reforçada espectroscopia fotoacústica (QEPAS), técnica que emprega um piezoelétrico afinação quartzo garfo como um transdutor acústico. Efeito fotoacústico ocorre quando as ondas acústicas são produzidos pela absorção da radiação de laser modulado pelo tipo de gás de rastreio alvo. O gás traço é detectada através de uma célula acústica que é acusticamente ressonante com a freqüência modulada. Comprimento de onda de absorção de amônia foi selecionado que é livre de interferências espectrais de espécies interferentes na respiração. Para efeitos de medição de ar exalado humano, as principais funções do monitor incluem uma ampla faixa de medição (de ~ 50 partes por bilhão, ppb, pelo menos, 5.000 ppb) e velocidade (1 medições seg). A velocidade do monitor permite a resolução de tempo ao longo do ciclo de respiração. O monitor está ligado a um amostrador respiração especialmente concebidos. O amostrador consiste de um sensor de pressão e capnógrafo. Ele exibe e arquivos em tempo realmedições de pressão na boca e dióxido de carbono, bem como as concentrações de amoníaco determinados pelo sensor. Este amostrador, por conseguinte, permite que o técnico para avaliar a qualidade de o esforço de respiração quando a respiração é recolhido. Isso nos permite ultrapassar as recomendações para analisar respiração óxido nítrico (NO Fe), proposto pela Força-Tarefa da American Thoracic Society / European Respiratory Society (ATS / ERS) 8. Para todos amostragem respiração, um one-way válvula descartável in-line foi usado na porta boca do amostrador respiração. Por causa da velocidade do monitor e os controles de qualidade fornecido pelo sampler, fomos capazes de avaliar cuidadosamente as influências humanas 9. A maioria dos indivíduos, por exemplo, inicialmente hiperventilar quando instruído a respirar. Outras influências importantes, como o pH oral e enxaguatórios bucais, as temperaturas do sampler, do monitor e toda a tubulação associada, e modo de respiração, foram então estudadas, e são a base for os experimentos ilustrativos abaixo. Finalmente, e talvez mais importante, deve-se enfatizar que vários grupos altamente experientes estão medindo respiração amônia usando completamente diferentes sensores e procedimentos de medição. Estes podem ter vantagens importantes e validade. A comparação completa está além do escopo do presente trabalho 10,11,12.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="666">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Rice Ammonia Monitor System</td>
			<td style="width:171px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:167px;">Not available for commercial purchase</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Loccioni Breath Sampler</td>
			<td style="width:171px;">Loccioni Humancare</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Single breath version</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Disposable Mouth Piece</td>
			<td style="width:171px;">WestPrime Healthcare</td>
			<td style="width:119px;">G011-200</td>
			<td>Manufacturer is AlcoQuant</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Laptop</td>
			<td style="width:171px;">Lenovo</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Old model no longer sold by manufacturer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Acid Rinse</td>
			<td style="width:171px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Household acidic drink (coffee, soft drink, citrus juices, etc)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Base Rinse</td>
			<td style="width:171px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Water mixed with a nonexact amount of sodium bicarbonate (Arm &#38; Hammer Baking Soda)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Neutral Rinse</td>
			<td style="width:171px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Water</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fast and accurate exhaled breath ammonia measurement

This exhaled breath ammonia method uses a fast and highly sensitive spectroscopic method known as quartz enhanced photoacoustic spectroscopy (QEPAS) that uses a quantum cascade based laser. The monitor is coupled to a sampler that measures mouth pressure and carbon dioxide. The system is temperature controlled and specifically designed to address the reactivity of this compound. The sampler provides immediate feedback to the subject and the technician on the quality of the breath effort. Together with the quick response time of the monitor, this system is capable of accurately measuring exhaled breath ammonia representative of deep lung systemic levels. 
Because the system is easy to use and produces real time results, it has enabled experiments to identify factors that influence measurements. For example, mouth rinse and oral pH reproducibly and significantly affect results and therefore must be controlled. Temperature and mode of breathing are other examples. As our understanding of these factors evolves, error is reduced, and clinical studies become more meaningful. This system is very reliable and individual measurements are inexpensive. 
The sampler is relatively inexpensive and quite portable, but the monitor is neither. This limits options for some clinical studies and provides rational for future innovations.

Assuntos pode ser esperado para produzir uma ampla gama de níveis de amónia respiração basais. Indivíduos saudáveis ​​podem começar o dia com uma medição de amônia de 100-1.000 ppb respiração. Lavar a boca com qualquer fluido imediatamente altera a quantidade de amônia detectável respiração. Fluidos neutros e ácidos normalmente reduzir a quantidade de amônia observáveis ​​por mais da metade. Estes níveis então retornar à linha de base, como os efeitos da lavagem desaparece. Os efeitos da á...

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Fast and Accurate Exhaled Breath Ammonia Measurement

Ammonia is an important physiologic metabolite relevant to various disease and wellness states. It is also a difficult molecule to measure in breath, which demands particular precautions be taken to obtain accurate results. Not all factors influencing ammonia are known, but progress can be difficult without accounting for these factors.

Medição Amônia ar exalado Rápido e Preciso

This exhaled breath ammonia method uses a fast and highly sensitive spectroscopic method known as quartz enhanced photoacoustic spectroscopy (QEPAS) that ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

13.1K visualizações.  St. Luke's University Hospital. Ammonia is an important physiologic metabolite relevant to various disease and wellness states. It is also a difficult molecule to measure in breath, which demands particular precautions be taken to obtain accurate results. Not all factors influencing ammonia are known, but progress can be difficult without accounting for these factors.