The authors would like to acknowledge the work of Annemarie Baars and Jos&#233; Lozeman-van &#8216;t Klooster in performing, assisting and teaching experiments using the mHB set-up.

NOTA: Os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Experimentação Animal do University Medical Center Utrecht e da Universidade de Utrecht, na Holanda. Além disso, as experiências com animais seguiu os princípios de cuidados com animais de laboratório e consulte as Diretrizes para o Cuidado e Uso de Mamíferos em Neurociências e Comportamento Research. 25 1. Experimental Set-up NOTA: O aparelho de MHB padrão é constituída por uma caixa cinzenta experimental PVC (100 x 50 x 50 cm) separado de um compartimento adicional (50 x 50 x 50 cm) em que os companheiros de grupo do animal experimental pode ser colocada durante o período de teste por um transparente, perfurado partição 1. Se a presença de companheiros de grupo é indesejado ou se os animais alojados individualmente são testados, substitua a partição transparente por uma divisória feita de PVC cinza (Figura 1;. Ver também Ohl et al (2001) 1). O MHB (with medidas diferentes) utilizados para testes cognitivos é descrito no ponto 5 do protocolo. <ol><li> Colocar a placa (60 x 20 x 0,5 cm, feito de PVC cinzento) no meio da caixa. NOTA: A placa pode conter 20 cilindros (ᴓ 1,5 cm) 14 cambaleou em duas linhas ou 23 cilindros (ᴓ três centímetros) 8 escalonados em três linhas. </li><li> Divida a área em torno da placa por linhas pretas em 10 retângulos (20 x 15 cm) e 2 quadrados (20 x 20 cm). </li><li> Posicione a luz do estágio acima da placa para criar um contraste maior na intensidade da luz entre a placa (o que representa uma área desprotegida comparável com o centro de um campo aberto ou o compartimento de luz de um teste de transição claro-escuro) e da caixa (área protegida) a fim de aumentar o carácter aversivo de 4,8 a placa. </li><li> Casa os animais sob uma hr 12 inverteu ciclo dia-noite (por exemplo, as luzes apagadas às 7:00 e luzes acesas às 07:00). NOTA: No entanto, o MHB também podeser usado sob o cronograma de luz convencional (veja a discussão sobre os potenciais deficiências) 1,6. </li><li> Realize o teste de comportamento na fase mais ativa dos animais (por exemplo, 10:00 - 14:00) 4,15. </li><li> Manter um período de habituação de 2 semanas após a chegada dos animais nas instalações. Durante este período têm a mesma pessoa que executa a experiência comportamental manipulação dos animais quatro vezes por semana, e incluem todos os procedimentos de manuseamento de ser realizadas durante o teste real. Manipulação dos animais exclusivamente durante o tempo do dia em que os animais serão expostos ao teste mais tarde. </li><li> Grave os experimentos para armazenamento de dados em vídeo e, a fim de otimizar os resultados e reduzir a variabilidade inter observador, praticar o placar comportamental por meio de uma gravação de vídeo de experiências anteriores 2. Certifique-se de padronizar todas as ações e procedimentos executados pelo observador. </li></ol> 2. Behavioral Testing - sem a presença de companheiros de grupo <ol><li> Realizar teste comportamental na sala os animais são alojados em regularmente (para evitar possíveis efeitos de transporte para um local de teste) e instalar todo o equipamento de teste antes da chegada dos animais nas instalações (para os animais habituar à presença do equipamento). </li><li> Escolher-se o animal pela base da cauda, ​​a partir da sua gaiola e colocá-lo directamente no MHB. </li><li> Colocar cada animal no aparelho no mesmo canto virado para a parede (como indicado na Figura 1). </li><li> Permitir que o animal para explorar livremente o MHB por um período de tempo (geralmente 5 min 1,6,16-18). </li><li> Já um observador experiente vivo marcar os parâmetros comportamentais, utilizando software de pontuação comportamental. Use os parâmetros listados na Tabela 1. Atenção: alguns parâmetros comportamentais (por exemplo, auto-estradas e comportamento exploratório) pode ser marcado automaticamente como por exemplo, </em&gt; Discutido por Henry et al. (2010) 19 após o ajuste necessário do MHB. </li><li> Limpe o equipamento com água da torneira e uma toalha de papel depois de cada julgamento, a fim de evitar um viés baseado em pistas olfactivas. Nota: Os efeitos de testes de ordem possíveis quando testando animais socialmente alojados deve ser mantido em mente 17,20. </li></ol> 3. Behavioral Testing - na presença do Grupo Mates <ol><li> No caso do grupo habitação, medir a interacção com o animal experimental e seus companheiros de gaiola, durante o teste. <ol><li> Coloque os companheiros de grupo no compartimento do grupo antes do teste do animal experimental para permitir a habituação (principalmente 10-30 min 1,12). Nota: Os testes sob condições de estresse social é possível através da colocação de uma gaiola-mate dominante no compartimento do grupo ao testar uma socialmente derrotado indivíduo 13. </li><li> Colocar o animal experimental no compartimento de teste e permitir libertarly explorar a MHB como descrito na seção 2. Nota: Os efeitos de testes de ordem possíveis quando testando animais socialmente alojados deve ser mantido em mente 17,20. </li><li> Já um observador experiente vivo marcar os parâmetros comportamentais, utilizando software de pontuação comportamental. Use os parâmetros listados na Tabela 1. </li><li> Limpe o equipamento com água da torneira e uma toalha de papel depois de cada julgamento, a fim de evitar um viés baseado em pistas olfactivas. </li></ol></li></ol> 4. Novel Objeto Recognition and Food Intake Inibição <ol><li> Familiarizar os animais com um objeto (por exemplo, um dado ou uma pelota de alimentos) em sua gaiola em casa dois dias antes do experimento. </li><li> Colocar o objecto familiarizados no aparelho 2 cm de distância a partir de um objecto novo (por exemplo, um parafuso ou comida não familiar) no canto transversalmente a partir do ponto de partida. </li><li> Medir o tempo que o animal leva a abordar o romance e familiar objeto / alimentos. Use os parâmetros em &lt;strong&gt; Tabela 1. </li><li> Limpe o equipamento com água da torneira e uma toalha de papel depois de cada julgamento, a fim de evitar um viés baseado em pistas olfactivas. </li></ol> 5. testes cognitivos <ol><li> Inserir uma placa menor (35 x 22 x 1 cm) com 10 cilindros no meio da caixa (Figura 1) para o ensaio de ratos 3,22. Reduzir o tamanho de caixa de 50 x 50 cm, para testar ratinhos 21 através da inserção de uma partição feita de PVC cinzento. </li><li> Perfumar todos os cilindros com um sabor animais são atraídos para (por exemplo, a baunilha) e isca todos com uma recompensa (por exemplo, um pedaço de amêndoa, uma recompensa altamente palatável para camundongos e ratos) debaixo de uma grade de modo que os animais não pode removê-lo. </li><li> Cilindros Cue (muitas vezes três), com um anel de cor (contrastando com o PVC cinza) e isca-los com uma recompensa removível (por exemplo, 0,05 g pedaço de amêndoa). </li><li> Familiarizar os animais com a recompensa diária nos dois dias antes do experimento emsua gaiola, oferecendo-o com uma pinça e certificando-se de que os animais comem. </li><li> Já um observador experiente vivo marcar os parâmetros comportamentais, utilizando software de pontuação comportamental. Medir os parâmetros listados na Tabela 2, para além dos parâmetros comportamentais mencionados na secção 2 (Tabela 1) com a excepção de os parâmetros relacionados com a inibição objeto reconhecimento ou ingestão de alimentos. </li><li> Fase 1: Com cada animal, executar quatro ensaios por dia com um intervalo inter-ensaio constante (por exemplo, 30-60 minutos) até que uma constante de tempo para concluir um ensaio for atingido (isto é, quando todos os três pedaços de amêndoas foram recolhidos). </li><li> Fase 2: Cue e isca três cilindros diferentes e colocar os animais na configuração para quatro ensaios para testar a capacidade de aprendizagem de reversão. </li><li> Limpe o equipamento com água da torneira e uma toalha de papel depois de cada julgamento, a fim de evitar um viés baseado em pistas olfactivas. </li></ol>

<ol>
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The authors have nothing to disclose.

O paradigma MHB pode ser usado para medir as dimensões múltiplas do comportamento não-condicionado. O protocolo pode ser ligeiramente alterada dependendo do objectivo da experiência. Neste protocolo, discutir as definições, os tempos e as medições normalmente usado em nosso laboratório. No entanto, pequenos desvios para as medições do aparelho têm sido utilizados no passado, e também a quantidade de cilindros sobre o bordo pode variar de 3. Muitas vezes, estudos empregar um tempo de teste de 5 min por julgamento, mas outras vezes teste pode também ser apropriada, ou seja, terminando o teste assim como um teste cognitivo foi concluída com sucesso ou em estender o tempo de teste se os animais são extremamente ansiosas ou deficiência física. O tempo do dia de testes foi escolhida para estar sob condição de luz vermelha desde roedores são animais noturnos e são mais ativos na fase escura cedo. Roedel et al. (2006) revela os efeitos de luz ou ensaios fase escura sobre o desempenho comportamental e cognitivoem ratos DBA no MHB 16. Outros estudos realizaram experiências MHB sob condições de luz branca 1,6, no entanto, deve notar-se que o ensaio sob condições de luz branca pode induzir a inibição do comportamento e perturbação cognitiva (como mostrado em ratinhos DBA) 16. As Tabelas 1 e 2 contêm uma grande quantidade de parâmetros comportamentais a ser medido. Durante a análise de dados isto pode levar a alguns parâmetros que indicam um aumento significativo de, por exemplo, &#39;a placa de latência primeira entrada », mas não em outros parâmetros do mesmo sistema de motivação (neste caso,&quot; Prevenção &quot;). Em alguns casos, isso pode levar a resultados inconclusivos. Guilloux et al. (2011) introduziu escores z comportamentais integrados à fenotipagem comportamental em ratos 24. Com o uso de escores z comportamentais integrados os vários parâmetros podem ser combinados para um single-score z descrevendo uma motivatio especialsistema nal. Os escores z subsequentes podem por sua vez ser mais facilmente comparados através de testes comportamentais e experimentos. Além das características descritas deste paradigma, uma utilização mais profunda tornou-se evidente no estudo de Salomons et al. (2012). A habituação à novidade de duas linhagens de camundongos (balc / cJ e 129P3 / J) na MHB foi comparado, apresentando uma diferença de flexibilidade comportamental indicando um perfil comportamental não-adaptativo dos ratos 129P3 / J 4, espelhando prejudicada capacidades de adaptação e, provavelmente, até mesmo ansiedade patológica. Concluindo, o MHB permite a medição de múltiplas dimensões comportamentais em um único experimento. Através da combinação de características de uma placa tradicional buraco e teste de campo aberto, comportamento incondicionada, a interação social, cognição e capacidades de adaptação, ou seja, o bem-estar pode ser investigado. Este teste pode por exemplo, ser utilizada para avaliar alterações comportamentais devidos ao pharmacological- e / oumanipulações genéticas, reprodução seletiva e capacidades adaptativas. Em comparação com a bateria de testes clássicos, o número de animais necessários é claramente reduzida e esforço experimentado pelos animais durante o teste é extremamente baixo.

A placa de orifício modificado (MHB) é utilizado para avaliar o comportamento de vários dimensões não condicionado, principalmente em ratos e ratazanas 1. Uma série de testes amplamente usados ​​medir um único parâmetro de comportamento que não cobre completamente todo o fenótipo de uma dimensão comportamental. A MHB foi desenvolvido com base no conceito de que os roedores podem mostrar seu rico repertório comportamental apenas em um ambiente de teste rica 2 e, assim, permite observações etológicas complexos. O conjunto compreende-se as características da placa de orifício tradicional e o teste de campo aberto, resultando num paradigma complexo que ultrapassa as desvantagens de uma bateria de teste (ou seja, na redução do número de animais utilizados 1,3,4, contornando o possíveis efeitos da ordem de teste 5, e reduzir o tempo-efeito e os custos 6). Em contraste com a maioria dos testes comportamentais (por exemplo, Hånell &amp; Marklund, 2014) 7 &lt;/ Sup&gt;, uma vantagem da MHb é que os animais não precisam de ser privados de alimentos a fim de aumentar a motivação para resolver a tarefa. Além disso, o isolamento social pode ser contornado durante o teste, colocando companheiros de grupo do animal experimental num (group-) compartimento separado do compartimento de teste por uma divisória perfurada transparente, permitindo a visual, auditiva e olfativa contato 8,9. A MHB foi (farmacologicamente) validado para ambos os camundongos e ratos 1,6. A ampla gama de comportamentos podem ser medidos, como o comportamento de evitação, avaliação de risco, excitação, exploração, atividade locomotora, habituação, afinidade social e cognição 2,8-10. Além disso, o MHB pode ser combinado com um teste de inibição da ingestão de alimentos, bem como teste de reconhecimento de objecto novo 10,11. Finalmente, o MHB também pode ser utilizado para efectuar experiências de stress sociais testando animais socialmente vencidos ao colocar um indivíduo dominante emo compartimento do grupo 12,13. Este protocolo para camundongos e ratos dará uma visão geral das múltiplas aplicações do MHB.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="843">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:133px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:380px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="254">
			<td height="254" style="height:255px;width:211px;">Standard mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:380px;">The standard mHB apparatus consists of a grey PVC experimental box (100x50x50 cm) separated from a group compartment (50x50x50 cm) by a transparent, perforated partition. If the presence of group mates is unwanted or if individually housed animals are tested, the transparent partition is replaced by a partition made of grey PVC. The board (60x20x0.5 cm; made of grey PVC) is placed in the middle of the box and can contain 20 cylinders (&#7443; 1.5 cm) staggered in two lines or 23 cylinders (&#7443; 3 cm) staggered in three lines positioned on the board. The area around the board is divided by black lines into 10 rectangles (20x15 cm) and 2 squares (20x20 cm).</td>
		</tr>
		<tr height="210">
			<td height="210" style="height:210px;width:211px;">Cognitive mHB apparatus</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>The box for cognitive testing is 50x50 cm by inserting a partition made of grey PVC in the standard mHB. A smaller board (35x22x1 cm) with 10 cylinders is placed in the middle of the box. All cylinders are scented with a flavor animals are attracted to (e.g. vanilla) and all are baited with a reward (e.g. a piece of almond) beneath a grid so the animals cannot remove it. Cylinders (often three) are cued with a colored ring (contrasting with the grey PVC) and are baited with a removable reward (e.g. 0.05 g piece of almond).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Vanilla flavor</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Vanilla flavor dissolved in water (0.02%)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Camera</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Camera that generates sufficient quality output to rescore the behavior from video.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Stage light</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>A theather light that allows to adjust the light intensity and the dimensions of the surface that is lit.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="88">
			<td height="88" style="height:88px;width:211px;">Behavioral scoring software</td>
			<td style="width:133px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Behavioral scoring software.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the modified hole board - measuring behavior, cognition and social interaction in mice and rats

Este protocolo descreve o conselho buraco modificado (MHB), que combina características de uma placa de orifício tradicional e campo aberto e é projetado para medir múltiplas dimensões do comportamento incondicionado em pequenos mamíferos de laboratório (por exemplo, camundongos, ratos, musaranhos e pequenos primatas). Este paradigma é uma alternativa viável para a utilização de uma bateria de testes de comportamento, uma vez que uma ampla gama de perfil comportamental comportamental de um animal pode ser feito com um único ensaio. O aparelho é constituído por uma caixa, que representa a área &quot;protegida&quot;, separado de um compartimento de grupo. A bordo, em que pequenos cilindros são escalonados em três linhas, é colocado no centro da caixa, o que representa a área &#39;desprotegida&#39; do set-up. As capacidades cognitivas dos animais pode ser medido por iscagem alguns cilindros na placa e medindo a memória de trabalho e de referência. Outro comportamento incondicionada, como activity-related-, ansiedade-related- e comportamento social, pode ser observado usando esse paradigma. Flexibilidade comportamental e a capacidade de se habituar a um ambiente novo, adicionalmente, pode ser observado sujeitando os animais para ensaios múltiplos no MHB, revelando uma visão sobre as capacidades adaptativas dos animais. Devido ao testar os efeitos de ordem em uma bateria de teste comportamental, os animais naive deve ser utilizada para cada experiência individual. Ao testar múltiplas dimensões comportamentais em um único paradigma e, assim, contornar esse problema, o número de animais experimentais utilizados é reduzido. Além disso, evitando o isolamento social durante o ensaio e sem a necessidade de alimentar privar os animais, o MHB representa um sistema de teste comportamental, induzindo qualquer caso, de muito baixa quantidade de stress.

A grande quantidade de parâmetros que podem ser medidos no MHB fazer esta configuração especialmente adequado para medir várias dimensões comportamentais. Um exemplo é a identificação de adaptação comportamental a um ambiente novo por exposição repetida ao teste. . Salomons et al (2010) estudaram a habituação de duas linhagens puras de camundongos (BALB / cJ e 129P3 / J) para a MHB sob duas condições diferentes de luz (luz vermelha: o contraste entre a caixa e alimentação: 45 lux vs. luz branca: contraste entre a caixa e alimentação: 115 lux (ver também seção de protocolo 1.3)) 4. Ratinhos balc / cJ mostram uma diminuição (habituating) a latência até à primeira entrada do bordo (ver Tabela 1) em condições de luz vermelha, como mostrado na Figura 2A. Em contraste, os ratos 129P3 / J não mostram sinais de habituação sobre ensaios. A figura 2B mostra o experimento em condições de luz branca. Camundongos BALB / cJ mostrar novamente uma latência decrescente para a primeira entrada placa sobre ensaios ainda que a umnimals mostram um padrão de habituação mais lenta em comparação com a condição de luz vermelha. Camundongos 129P3 / J não só mostrar novamente prejudicada habituação, mas também uma tendência de sensibilização sob a condição de luz branca. Da mesma forma, em um estudo realizado por Salomons (2012) 129P2 / OlaHsd ratos mostraram uma flexibilidade comportamental prejudicada em resposta a novidade em comparação com camundongos BALB / cOlaHsd 23. A diferença na capacidade de habituação torna-se assim aparente entre duas linhagens puras de ratos quando testado no MHB 4. A versão cognitiva do MHB pode por exemplo ser utilizado para medir alterações cognitivas em ratinhos. Van der Kooij et al. (2010) usou este set-up para medir o funcionamento cognitivo de camundongos C57BL / 6J com leve isquemia-hipoxia cerebral (45 min de hipóxia; HI-45), HI grave (75 min de hipóxia; HI-75) e sham- camundongos de controle 9. A capacidade para completar os ensaios (isto é, encontrar os furos iscados dentro de 5 min) é mostrado na Figura 3A. </strong&gt; O número de erros de memória de curto prazo (revisita a um buraco com isca), erros de memória de longo prazo (visitas a um buraco não iscas) e erros de omissão (nenhuma visita a um buraco com isca) são apresentados na Figura 3B-D respectivamente. A fim de confirmar que o grupo HI-45 não teve nenhum comprometimento cognitivo, este grupo foi testado contra os falsos-controles em uma tarefa de reversão. Os três orifícios iscados foram nomeados para três cilindros diferentes e os animais foram testados para 4 ensaios. O efeito de reversão se torna evidente quando se compara a última prova da primeira fase com o primeiro ensaio da fase de reversão. A duração para completar os quatro ensaios de inversão dá uma indicação sobre o desempenho global. A Figura 4 mostra o tempo de latência para concluir o ensaio para os dois grupos e um claro efeito global do tratamento é evidente. Isto significa que, na tarefa de reversão de fato há um prejuízo na flexibilidade cognitiva (re-learning) no grupo HI-45, que será<html> veio detectável utilizando a MHB 9. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig1.jpg" /> Figura 1. Visão esquemática do conselho buraco modificado. (A) O set-up consiste em um compartimento de teste (box) com no meio da (não protegido) bordo indicado com linhas em ziguezague e compartimento do grupo. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig5.jpg" /> = Novela objeto, <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig6.jpg" /> = Objeto familiar, <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig7.jpg" /> = Ponto de partida. (B) Visão esquemática da versão cognitiva do conselho buraco modificado para ratos. (C) Vista lateral de um cilindro, como utilizado na versão cognitiva do conselho buraco modificado. Um pedaço de amêndoa é colocada por baixo da grelha de todos os cilindros.target = &quot;_ blank&quot;&gt; Clique aqui para ver uma versão maior desta figura. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig2.jpg" /> Figura 2. A luz vermelha ou condições de luz branca. (A) de latência até a primeira entrada bordo (média + SEM) de BALB / cJ e camundongos 123P3 / J medida em condições de luz vermelha (caixa 0-5 lux e tábua de 45 lux). A ANOVA de medidas repetidas com ajuste Huyn-Feldt revelou uma cepa (P = 0,025), o julgamento (P &lt;0,001) e ensaio de interacção x tensão (P &lt;0,001) efeito a análise post hoc:. Entre as linhagens: * = P &lt;0,0026, entre dois ensaios consecutivos: $ = P &lt;0,0026 (BALB / cJ) (B) A latência da primeira entrada bordo (média + SEM) sob condições de luz branca (caixa 0-5 lux e tábua de 120 lux).. A ANOVA de medidas repetidas com ajuste Huyn-Feldt revelou uma cepa (P = 0,031), o julgamento (P &lt;0,001) e interação x tensão julgamento (P &lt;0,001) effe. ct análises post-hoc: entre as linhagens: * = P &lt;0,0026, entre dois ensaios consecutivos: $ = P &lt;0,0026 (BALB / cJ) e T = P &lt;0,0026 (123P3 / J). Esta figura foi modificada a partir de 2010 4 Salomons et al.. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig2highres.jpg" target="_blank">Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig3.jpg" /> Figura 3. teste cognitivo na MHB (fase 1). Todos os números mostram a média + SEM. (A) A latência para concluir o julgamento (SEC) dos ratos de controle sham, HI-45 e HI-75. (B) Número de erros de omissão, visitas furo (C) Não iscados e (D) revisita para furos de iscas. * = P &lt;0,05, ** = P &lt;0,01, *** = P &lt;0,001 vs sham HI-75, # = P &lt;0,05, ## = P &lt;0,01, ### = P &lt;0,001HI-45 vs. HI-75. Este valor foi modificado a partir do Van der Kooij et al., 2010 9. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52529/52529fig3highres.jpg" target="_blank">Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52529/52529fig4.jpg" /> Figura 4. Reversão tarefa de aprendizagem (fase 2). Latência para concluir um julgamento (sec) na tarefa de aprendizado reverso (média + SEM). Efeitos de julgamento: # = P &lt;0,05, ## = P &lt;0,01 (tarefa primeira reversão julgamento vs. julgamento anterior). O efeito do tratamento: * = P &lt;0,05, ** = P &lt;0,01 (HI-45 vs. sham). Este valor foi modificado a partir al. Van der Kooij et de 2010 9. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Sistema </td><td> Atividade </td><td> Parâmetro medido </td></tr><tr><td> Avoeu danço </td><td> Entrada Board </td><td> Frequência, latência (s), duração (%) e a duração média (s) sobre o bordo </td></tr><tr><td> Avaliação de risco </td><td> Atende esticada </td><td> Frequência e latência (s) de esticados posturas corporais (incluindo membros posteriores) </td></tr><tr><td> Excitação </td><td> Grooming </td><td> Frequência, a latência (s), duração (%) e duração média (s) auto-limpeza </td></tr><tr><td></td><td> Defecação </td><td> Frequência e latência (s) de boli produzido </td></tr><tr><td></td><td> Micção </td><td> Frequência e latência (s) de micções </td></tr><tr><td> Dirigido exploração </td><td> Visitas Buraco </td><td> Frequência e latência (s) de visitas do cilindro </td></tr><tr><td></td><td> Novel exploração objeto </td><td> Frequência, a latência (s), duração (%) e duração média (s) explorar a novela objeto </td></tr><tr><td> Exploração sem direção </td><td> Elevando o caixa &lt;/ Td&gt; <td> Frequência e latência (s) de levantamentos na caixa (patas dianteiras não tocar na parede) </td></tr><tr><td></td><td> Placa Empinar </td><td> Frequência e latência (s) de levantamentos no conselho </td></tr><tr><td></td><td> Exploração Buraco </td><td> Frequência e latência (s) de explorações de cilindro </td></tr><tr><td> Memória </td><td> Familiar exploração objeto </td><td> Frequência, a latência (s), duração (%) e duração média (s) explorar a objeto familiar </td></tr><tr><td> Afinidade social </td><td> A interação do grupo </td><td> Frequência, latência (s), duração (%) e a duração média (s) que interage com o compartimento do grupo </td></tr><tr><td> Atividade locomotora </td><td> Cruzamento de linha </td><td> Frequência e latência (s) de cruzamentos de linha </td></tr></tbody></table> Tabela 1: Lista de parâmetros comportamentais <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td> Sistema de memória </td><td> Parâmetro </td><td> Descrição </td></tr><tr><td> A memória de longo prazo </td><td> Escolha errada </td><td> Visita ao cilindro não-iscas; nariz abaixo da borda </td></tr><tr><td> Erro de omissão </td><td> Omissão de um cilindro com isca </td><td> Nenhuma visita a um cilindro com isca </td></tr><tr><td> A memória de curto prazo </td><td> Escolha repetida </td><td> Revisitar a cilindro de iscas; nariz abaixo da borda </td></tr><tr><td> O desempenho geral </td><td> O tempo total de ensaio </td><td> Tempo até que todos os cilindros iscas foram visitados </td></tr></tbody></table> Tabela 2: Lista de parâmetros cognitivos

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The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Board Modificado - Medir Comportamento, Cognição e Interação Social em camundongos e ratos

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

17.6K visualizações.  Utrecht University. This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities. 

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

O Becos Teste sucessiva de ansiedade em camundongos e ratos

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Comportamento

Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several independent laboratories have demonstrated robust alterations in the social behavior of rodents exposed to alcohol during brain development across a wide range of exposure durations, timing, doses, and ages at the time of behavioral quantification. Prior work from this laboratory has identified reliable alterations in specific forms of social interaction following moderate prenatal alcohol exposure (PAE) in the rat that persist well into adulthood, including increased wrestling and decreased investigation. These behavioral alterations have been useful in identifying neural circuits altered by moderate PAE1, and may hold importance for progressing toward a more complete understanding of the neural bases of PAE-related alterations in social behavior. This paper describes procedures for performing moderate PAE in which rat dams voluntarily consume ethanol or saccharin (control) throughout gestation, and measurement of social behaviors in adult offspring.

The goal of the protocol presented here is to describe procedures to expose rats to moderate levels of alcohol during prenatal brain development and to quantify resulting alterations in social behavior during adulthood.

Moderado pré-natal álcool Exposição e quantificação do comportamento social em ratos adultos

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several ...

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device (ALDM) Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys maintained in semi-free ranging conditions. Data accumulated during the last five years have consistently demonstrated the efficiency of this protocol to investigate individual/physical cognition in monkeys, and have further shown that this procedure reduces stress level during animal testing3. This paper demonstrates that networks of ALDM can also be used to investigate different facets of social cognition and in-group expressed behaviors in monkeys, and describes three illustrative protocols developed for that purpose. The first study demonstrates how ethological assessments of social behavior and computerized assessments of cognitive performance could be integrated to investigate the effects of socially exhibited moods on the cognitive performance of individuals. The second study shows that batteries of ALDM running in parallel can provide unique information on the influence of the presence of others on task performance. Finally, the last study shows that networks of ALDM test units can also be used to study issues related to social transmission and cultural evolution. Combined together, these three studies demonstrate clearly that ALDM testing is a highly promising experimental tool for bridging the gap in the animal literature between research on individual cognition and research on social cognition.

Assessment of Social Cognition in Non-human Primates Using a Network of Computerized Automated Learning Device ALDM Test Systems

Fagot &#38; Paleressompoulle1 have published an automated learning device (ALDM) aimed at testing individual cognitive abilities in semi-free ranging monkeys. The main goal of our protocol is to use a network of ALDM test units to study social cognition in non-human primates.

Avaliação da Cognição Social em primatas não-humanos usando uma rede de Computadorizado dispositivo automático de Aprendizagem Sistemas (ALDM) teste

Fagot &#38; Paleressompoulle1 and Fagot &#38; Bonte2 have published an automated learning device (ALDM) for the study of cognitive abilities of monkeys ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

A Dimensão Social do Stress: Manipulações experimentais de apoio social e de identidade social no Trier Social Stress Teste

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Examinando Chamada de Memória na infância e primeira infância Usando o provocou Imitação Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

O psicomotora Teste Rodent Vigilância (rPVT): um método para avaliar Neurobehavioral Desempenho em ratos e camundongos

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two behavioral components: a reluctance to avoid humans (passive tameness) and a motivation to approach humans (active tameness). To quantify these components in mice, we previously developed behavioral tests for active tameness, passive tameness, and the willingness to stay on a human hand, each designed to be completed within 3 min. The data obtained were used for selective breeding, with a large number of mice analyzed per generation. The active tameness test measures the movement of the mouse toward a human hand and the contact it engages in. The passive tameness test measures the duration of time that a mouse tolerates human touch. In the stay-on-hand test, a mouse is placed on a human hand and touched slowly using the thumb of that hand; the duration of time that the animal remains on the hand is measured. Here, we describe the test set-up and apparatus, explain the procedures, and discuss the appropriate data analysis. Finally, we explain how to interpret the results.

Tameness in animals includes a reduction of avoidance responses to humans (passive tameness) and an increase in active approaches to humans (active tameness). Here, we describe detailed protocols for three behavioral tests (active tameness, passive tameness, and stay-on-hand tests) to separately measure the active and passive tameness of mice.

Medição de ativa e passiva domesticidade separadamente em ratos

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two ...

A High-performance Liquid Chromatography Measurement of Kynurenine and Kynurenic Acid: Relating Biochemistry to Cognition and Sleep in Rats

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite kynurenic acid (KYNA), an antagonist at both N-methyl-d-aspartate (NMDA) and &#945;7 nicotinic acetylcholine (&#945;7nACh) receptors, has been implicated in cognitive processes in health and disease. As KYNA levels are elevated in the brains of patients with schizophrenia, a malfunction at the glutamatergic and cholinergic receptors is believed to be causally related to cognitive dysfunction, a core domain of the psychopathology of the illness. KYNA may play a pathophysiologically significant role in individuals with schizophrenia. It is possible to elevate endogenous KYNA in the rodent brain by treating animals with the direct bioprecursor kynurenine, and preclinical studies in rats have demonstrated that acute elevations in KYNA may impact their learning and memory processes. The current protocol describes this experimental approach in detail and combines a) a biochemical analysis of blood kynurenine levels and brain KYNA formation (using high-performance liquid chromatography), b) behavioral testing to probe the hippocampal-dependent contextual memory (passive avoidance paradigm), and c) an assessment of sleep-wake behavior [telemetric recordings combining electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) signals] in rats. Taken together, a relationship between elevated KYNA, sleep, and cognition is studied, and this protocol describes in detail an experimental approach to understanding function outcomes of kynurenine elevation and KYNA formation in vivo in rats. Results obtained through variations of this protocol will test the hypothesis that the KP and KYNA serve pivotal roles in modulating sleep and cognition in health and disease states.

Alterations in the kynurenine pathway (KP) neuroactive metabolites are implicated in psychiatric illnesses. Investigating the functional outcomes of an altered kynurenine pathway metabolism in vivo in rodents may help elucidate novel therapeutic approaches. The current protocol combines biochemical and behavioral approaches to investigate the impact of an acute kynurenine challenge in rats.

Uma medida de cromatografia líquida de alta performance da Quinurenina e ácido cinurênico: matéria bioquímica de cognição e sono em ratos

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Um protocolo de preferência condicionada lugar para medir a incubação do desejo em ratos

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...