Nosso protocolo oferece uma vantagem significativa ao criar a possibilidade de expor os animais a sucessivos níveis de descarga. No passado, os modelos terrestres usaram descarga de subida traseira ou rolamento parcial de peso separadamente. A principal vantagem dessa técnica é o uso de um único aparelho e ambiente para proporcionar inúmeras possibilidades, como imitar uma viagem e curta estadia em Marte.
Este modelo ajudará a entender o estado fisiológico ao pousar em Marte e os desafios fisiológicos para astronautas expostos a vários níveis de descarga durante sua missão. Esse modelo poderia ajudar os pesquisadores a explorar uma ampla gama de mudanças fisiológicas, incluindo, mas não se limitando ao comportamento, memória, desempenho ou estresse. Demonstrando o procedimento estará Daniela Riveros, pesquisadora do nosso laboratório.
Para realizar o descarregamento de cascalho, coloque o rato totalmente anestesiado no banco com gás anestésico proveniente de um cone de nariz com isoflurane de 2% e um fluxo de oxigênio de 1,5 litros por minuto. Coloque o rato em uma posição propensa e coloque o cinto pélvico em um movimento rostrocaudal. Dobre suavemente o cinto pélvico para fornecer um ajuste confortável, tomando cuidado para não apertar os membros traseiros para evitar escoriações e desconforto.
Conecte a corrente de aço inoxidável com o fecho giratório ao topo do cinto pélvico, onde um gancho é anexado na base da cauda. Retire o rato da anestesia e coloque o animal em uma gaiola personalizada com a corrente estendida ao máximo. Uma vez que o rato esteja totalmente acordado e móvel, encurte a corrente usando o fecho giratório superior até que os membros traseiros não possam mais alcançar o chão.
Converta o dispositivo de suspensão de descarga de subida traseira em um dispositivo de suspensão parcial de rolamento de peso adicionando a parte em forma de triângulo, composta de correntes de aço inoxidável e uma haste traseira. Coloque uma jaqueta de corda do tamanho apropriado nos membros do anteício do rato, e feche-a usando o extensor do sutiã traseiro. Conecte um fecho da parte em forma de triângulo do gancho localizado no extensor do sutiã traseiro, e o fecho oposto no gancho localizado no arreio pélvico na base da cauda.
Coloque o rato em cima da balança para registrar o peso corporal carregado, incluindo o peso de todo o aparelho sem encurtar a corrente. Encurte a corrente até que a balança exiba 40% do peso corporal carregado e regise o nível de gravidade alcançado. Com a haste, remova todo o aparelho da balança e coloque o rato de volta em sua gaiola.
Para avaliar a força de aderência de subida traseira, segure o rato com a contenção tradicional colocando uma mão debaixo dos membros da primeira. Segure suavemente a cauda com a segunda mão. Aproxime-se da barra de aderência com as patas traseiras e certifique-se de que ambas as patas estão totalmente descansando na barra.
Finalmente, puxe suavemente o rato para trás até que ele solte seu aperto. Repita três vezes e registe a força máxima exibida no transdutor. Calcule a média das três medidas para explicar a fadiga.
Uma semana de HLU seguida de uma semana de PWB40 resultou em uma perda significativa de peso corporal semelhante ao observado em ratos expostos apenas pwb40 para a mesma duração. No entanto, esses ratos continuaram perdendo peso ao longo do tempo, enquanto posteriormente foram expostos ao PWB40. Uma semana de descarga total levou a uma diminuição da força de aderência de subida traseira em comparação com os controles com correspondência etária.
No entanto, após uma semana subsequente do PWB40, não foi observada nenhuma mudança adicional em relação à força de aderência. Além disso, os ratos submetidos à descarga total, seguidos de rolamento parcial de peso, apresentaram uma perda significativamente maior de força de aderência em comparação com o grupo PWB40. PwB40 em grupos HLU-PWB40 apresentaram massa úmida significativamente menor de soleus, gastrocnemius e músculos anteriores tibialis do que os controles com correspondência etária.
No entanto, não foi observada diferença significativa entre a massa úmida dos grupos PWB40 e HLU-PWB40. O sucesso deste método baseia-se na precisão do nível parcial de rolamento de peso. O monitoramento frequente é crucial para avaliar o bem-estar e o descarregamento dos animais diariamente.
Este método não é invasivo e, portanto, não impede a utilização de procedimentos adicionais de teste em relação a todos os sistemas. Medidas longitudinais também são fáceis de implementar se o tempo de carregamento permanecer controlado. Este método foi inteiramente desenvolvido em laboratório e a utilização de equipamentos personalizados pode ser desafiadora para novas equipes.
Esta técnica abre caminho para estudos extensivos em que o peso parcial está em jogo. Isso pode incluir situações clínicas como o uso de equipamentos auxiliares, como muletas, bengalas ou moldes, bem como a aquaterapia.
