Nossa pesquisa visa identificar anormalidades no nível do circuito resultantes da exposição ao trauma durante vários estágios do desenvolvimento neurológico, desenvolvemos um modelo de trauma físico no início da adolescência para entender melhor o impacto do trauma infantil no funcionamento do cérebro adulto. Os profissionais de saúde comportamental estão vendo um aumento no número de pacientes que sofrem os impactos duradouros do abuso infantil. No entanto, a maioria das pesquisas atuais sobre roedores se concentra na exposição ao trauma na idade adulta ou no impacto da negligência infantil.
Nenhum deles aborda diretamente os desafios únicos observados em adultos com histórico de abuso infantil. Nosso protocolo produz um fenótipo evitativo consistente em mais de dois terços dos animais derrotados na idade adulta. Além disso, ao usar machos mais jovens sem experiência de reprodução alojados com fêmeas, nosso protocolo é capaz de produzir machos CFW robustamente agressivos sem o uso de camundongos B6 adultos adicionais para instigar a agressão, aumentando a facilidade e a aplicação completa do protocolo.
Nossa pesquisa ajudará a contribuir para a crescente compreensão de como a exposição ao trauma em diferentes estágios de desenvolvimento tem um impacto biológico, comportamental e anatômico único no cérebro e, esperançosamente, ajudará no novo desenvolvimento de tecnologias de tratamento para indivíduos que sofreram abuso infantil. Para começar, emparelhe machos CFW com fêmeas CFW OVX por uma semana para permitir a experiência sexual e aumentar a agressão territorial no macho. Após uma semana, remova a fêmea CFW OVX da gaiola e coloque-a em uma gaiola limpa e vazia.
Em seguida, introduza o estímulo C57 macho na gaiola com o macho CFW por um minuto e registre a latência do ataque. Depois, remova o estímulo C 57 macho e coloque a fêmea CFW OVX de volta na gaiola com o macho CFW antes de devolvê-los à sala de alojamento Machos CFW da casa do grupo que não atacam ou mostram uma latência de ataque de mais de 30 segundos em dois ou mais dias. Use esses machos CFW não agressivos como animais de estímulo durante o teste de interação social em campo aberto.
Quando os machos adolescentes C57 tiverem quatro semanas de idade, pesar cada animal e registrar o peso. Separe os animais em duas coortes iguais, controle e derrotado, garantindo que os pesos entre as duas coortes não sejam significativamente diferentes. Abriga um adolescente de controle C57 de um lado de uma divisória de plexiglass com outro adolescente de controle C57 do outro lado da divisória.
No 11º dia de casa, cada adolescente controle ao lado de um adolescente controle diferente com uma partição de plexiglass entre os dois pelo restante do experimento. Pese e registre o peso do adolescente C57 que deve ser derrotado. Feridas maiores que quatro milímetros de diâmetro, mostradas aqui em escala, requerem eutanásia imediata do animal de teste.
Em seguida, remova a fêmea CFW OVX da gaiola com o macho CFW residente e aloje-a com outras fêmeas OVX. Em seguida, introduza o adolescente C 57 na gaiola do macho CFW residente e inicie o cronômetro. Remova o adolescente da gaiola após 30 mordidas ou cinco minutos, o que ocorrer primeiro, e registre os dados do ataque.
Em seguida, coloque a divisória de acrílico no meio da gaiola do residente do CFW, garantindo que o residente do CFW esteja de um lado e o adolescente derrotado do outro. No 11º dia, abrigue os adolescentes derrotados ao lado de outros adolescentes derrotados com uma divisória de plexiglass entre eles durante o experimento. Habitue os animais de controle e derrotados à sala de testes por uma hora.
Grave todas as sessões com software de rastreamento de animais. Coloque o copo de arame contra a parede esquerda da arena de acrílico de 44 por 44 por 44 centímetros no ponto médio da parede. Desenhe uma zona de interação circular de dois centímetros ao redor do copo.
Agora coloque o C 57 no canto da arena com um copo de arame vazio por 150 segundos. Em seguida, remova o C 57 da arena e coloque-o em uma gaiola limpa e vazia. Coloque um macho adulto CFW não agressivo e desconhecido dentro do copo de arame e coloque o copo de arame dentro da arena.
Reintroduza o C 57 na arena com o copo de arame contendo CFW por 150 segundos. Depois de devolver os dois animais às suas respectivas gaiolas, limpe a arena com água e etanol 70% para limpar todas as áreas com urina ou fezes antes de testar o próximo C 57. Calcule o período de tempo que qualquer ponto do corpo está dentro da zona de interação para a sessão com o copo vazio e a sessão com o copo contendo CFW.
Divida o tempo gasto na zona de interação com o copo contendo CFW pelo tempo gasto na zona de interação com o copo vazio para produzir a proporção de interação social. Realize a interação social em campo aberto a qualquer momento após o período de derrota de 10 dias, dependendo da janela de desenvolvimento de interesse. Os animais derrotados mostraram uma redução significativa na taxa de interação social e no tempo bruto de interação social em comparação com os controles em todos os momentos testados.
A redução mais pronunciada na taxa de interação social e no tempo ocorreu duas semanas após a derrota, com os animais derrotados mostrando aumento do tempo gasto com o copo vazio. Os mapas de calor confirmaram que os ratos derrotados passaram mais tempo nos cantos e menos tempo na zona de interação em todos os pontos de tempo.
