O modelo de desespero crônico representa um modelo adequado para a indução de um estado crônico depressivo em camundongos, a fim de entender melhor o caminho da fisiologia dos transtornos de humor e avaliar possíveis intervenções de tratamento antidepressivo. O estresse repetitivo é usado para induzir um estado depressivo, seguindo a ideia de que a depressão humana é induzida por estresse crônico e não agudo. Como os efeitos da indução do MDL são estáveis por até quatro semanas, não só é possível investigar antidepressivos de ação rápida, mas também substâncias com um início atrasado como a maioria dos antidepressivos convencionais.
Antes de induzir o estado crônico depressivo, observe visualmente os camundongos para anormalidades, incluindo sinais de mordida ou barbeiro. Exclua toda a gaiola da série experimental se um animal mostrar sinais de ferimentos. Para realizar testes paramétricos emparelhados depois, certifique-se de que cada mouse está claramente marcado ou rotulado.
Além disso, pese cada rato antes de iniciar o experimento. Para realizar uma sessão de natação forçada, encha um béquer ou cilindro com água de temperatura ambiente a uma altura de pelo menos 20 centímetros do fundo, deixando um mínimo de 10 centímetros entre a superfície da água e a borda superior do navio. Em seguida, transfira suavemente o mouse para a água e reserve um temporizador por 10 minutos.
Para evitar que o rato se afogue, observe continuamente o mouse enquanto ele está na água de uma posição onde ele não pode ver o experimentador. Depois de 10 minutos, tire o rato da água simplesmente agarrando sua cauda. Seque suavemente o mouse com uma toalha de papel, e coloque-o sob uma luz de aquecimento ou em um tapete de aquecimento.
Realize a sessão de natação forçada em cada rato todos os dias por cinco dias consecutivos. Após cinco sessões de natação, transfira os animais de volta para suas gaiolas e deixe descansar por pelo menos dois dias. Para usar o tempo de imobilidade como método de leitura, grave cada sessão de natação usando uma câmera.
Em seguida, assista as gravações de vídeo offline e use um cronômetro para medir o tempo total gasto pelo mouse nas três condições comportamentais diferentes durante o teste de natação, lutando, nadando e imobilidade. O animal é considerado lutando quando tenta escapar ativamente da situação ameaçadora. Isso envolve pawing o lado do cilindro com a cabeça orientada para a parede e mover todos os membros.
A superfície da água é tipicamente ligeiramente turbulenta. O animal é considerado nado quando se move pelo menos as patas de couro e percorre uma distância através da água. Ele procura ativamente uma saída, mas não levanta suas patas acima da superfície da água ou tenta superar a parede de vidro do vaso.
Nesta condição, os animais frequentemente se viram ou se movem em círculos. Por fim, o animal é considerado em fase de imobilidade. Se ele se mantiver ainda em uma posição de congelamento e não se mover em tudo, ou apenas mover a cauda, ou as patas dianteiras para manter sua cabeça acima da superfície da água, nenhuma distância é ativamente percorrida, exceto para flutuação passiva, e nenhum movimento direcionado das patas dianteiras é observado.
Na fase de indução do modelo de desespero crônico, durante a primeira sessão de natação, os ratos geralmente mostram um tempo médio de imobilidade entre 190 e 230 segundos, que aumenta constantemente a cada sessão adicional de natação. O tempo de imobilidade medido no quinto dia permanece estável ao longo de quatro semanas, indicando desespero comportamental estável. Intervenções antidepressivas, como imipramina, privação do sono e cetamina, reduzem significativamente o tempo de imobilidade.
Embora a privação do sono combinada com um sono de recuperação não mostre uma mudança significativa do fenótipo depressivo. Uma vez que cada grupo de tratamento tem valores médios diferentes de tempo de imobilidade no quinto dia, tratamentos diferentes devem ser comparados usando valores médios normalizados em vez de valores absolutos. Se o tempo de imobilidade permanecer inalterado durante todos os cinco dias, o estresse aplicado não poderia mudar o comportamento de forma relevante e, portanto, esses camundongos não podem ser usados para avaliar os efeitos do tratamento.
Outros métodos de leitura, como o teste de suspensão da cauda, o teste de preferência de sacarose do nariz e a avaliação da potencialização a longo prazo durante a técnica de grampo de remendo podem ser usados para descrever uma visão mais ampla do desespero comportamental dos animais. A medição do tempo de imobilidade é uma parte importante do modelo de desespero crônico, mas nunca deve ser o único método de leitura. Várias outras avaliações, como o teste de suspensão da cauda ou o teste de preferência de sacarose devem ser usadas.
