A aórtica Debanding é um modelo experimental útil para estudar a remodelagem reversa do miocárdio em roedores e para uma nova revelação sobre os mecanismos de regressão de cardiomiócitos e recuperação funcional isômica. Estes metais facilitam a evolução da modelagem reversa crítica no VIVO e a coleta de amostras biológicas para estudos in vitro e moleculares em diferentes momentos durante a progressão da doença. Esta técnica imita a progressão da remodelagem do miocárdio e a remodelação reversa e permite explorar os mecanismos de recuperação incompleta do miocárdio.
Este protocolo fornece insights sobre os mecanismos e a linha completa e incompleta remodelação reversa do miocárdio em patologias relacionadas à sobrecarga crônica, como pretensão ocular ou estenose aórtica. Conecte o tubo orotraqueal ao ventilador para iniciar a ventilação mecânica e ajuste o ventilador a uma frequência de 160 respirações por minuto e um volume de maré de 10 mililitros por quilograma. Antes de iniciar o procedimento da banda, confirme a falta de resposta ao reflexo da dor em um rato preto C57 de seis semanas de idade, raspe e aplique creme depilatório da linha do pescoço até o nível médio do peito do rato e aplique pomada nos olhos do animal.
Coloque uma sonda retal e o oxímetro para monitorar a temperatura de oxigenação sanguínea e a frequência cardíaca. Coloque o mouse no decúbito lateral direito em uma almofada de aquecimento e tape os membros no sistema de retração do fixador magnético para manter o animal na posição correta durante o procedimento. Em seguida, desinfete o peito com 70% de álcool consecutivo e solução de povidona-iodo esfolia em seguida e abra o músculo da pele e costelas a fim de executar a banda até a aorta.
Ao final do procedimento aplicar solução povidone-iodo ao local da sutura da pele e administrar analgesia duas vezes por dia durante dois a três dias, em seguida, injete soro fisiológico intraperitoneal para evitar a desidratação em casos de sangramento significativo durante a cirurgia e coloque o animal em uma incubadora com monitoramento até a recuperação completa. Sete semanas após a cirurgia de banda, disseque suavemente nos tecidos, aderência e fibrose ao redor da aorta em metade dos animais bandados até que a constrição se torne visível. Dissecar cuidadosamente a aorta e separar a sutura do vaso, em seguida, use a tesoura para cortar a sutura.
Note que uma oclusão prolongada da água índigo do machado durante a ligação ou demoníaca pode levar a edema pulmonar, uma ativação excessiva de vias inflamatórias. Feche a parede torácica com uma simples suturas de polipropileno interrompidas ou contínuas com o número mínimo de pontos possíveis e feche a pele com uma sutura de polipropileno de seda de seis O em um padrão contínuo de sutura, em seguida, realize os cuidados pós-operatórios como demonstrado. A cada duas ou três semanas após a cirurgia, remova a pele da linha do pescoço para o nível médio do peito como demonstrado e coloque o animal em uma almofada de aquecimento na posição supina Coloque eletrodos ECG na pele exposta e confirme a presença de um bom traço de ECG e uma frequência cardíaca entre 300 e 350 batimentos por minuto.
Monitore a temperatura e aplique gel de eco na região do peito. Coloque os camundongos em recumbência dorsal ligeiramente virado para a direita e inicie o ecocardiograma usando as configurações apropriadas. Em seguida, posicione uma sonda de ultrassom sobre o tórax e avalie o gradiente de pressão através da aorta.
Registo bidimensional de imagens guiadas da aorta mostrando a presença ou ausência da constrição ascendente da aorta para visualizar anatomicamente a eficácia da banda e debandada. Para avaliar a hipertrofia, posicione a sonda em um eixo curto ventrículo esquerdo no nível muscular papilar e pressione o botão de rastreamento do modo para visualizar a parede anterior do ventrículo esquerdo, o diâmetro do ventrículo esquerdo e a parede posterior do ventrículo esquerdo no diacetil e systole. Em seguida, avalie a função sistólica e calcule a fração de ejeção e o encurtamento fracionado de acordo com os protocolos padrão.
Para avaliar a função diastólica, determine o pico da onda post Doppler da velocidade de fluxo mitral precoce e folha usando uma visão atípica de quatro câmaras logo acima dos folhetos mitral e registe o miocárdio anular lateral e pico de velocidades sistólicas usando imagens de doppler pós-tecido e a visão apical de quatro câmaras. O sucesso da constrição aórtica pode ser verificado por um ventrículo esquerdo aumentado e pressão sistólica. E por Doppler velocidades de fluxo aórtico maiores que 2,5 metros por segundo.
Em comparação com os animais operados por Sham, a hipertrofia do ventrículo esquerdo induzida é demonstrada por um aumento na massa ventrículo esquerda e uma função diastólica prejudicada, evidenciada por pressões mais altas de enchimento e pressão diastólica final ventricular esquerda. Histologicamente, sete semanas de banda aórtica induzm cardiomiófilos significativos hipertrofia e fibrose. No meu sujeito à debandada, como a remoção bem sucedida da estenose aórtica pode ser verificada por velocidades eco Doppler.
A debandada geral promove uma diminuição significativa na carga posterior e na hipertrofia ventrículo esquerda avaliada pela massa LV. Além disso, observa-se também uma normalização da função diastólica. Quando você joga com cuidado, evitando conluio ético prolongado, a fim de garantir que a oxigenação sanguínea permaneça acima de 90%Este modelo mínimo nos permite estudar minha remodelagem cardíaca e remodelar em diferentes pontos de tempo da progressão da doença e até mesmo acordar os caminhos mais desregulados em cada ponto de tempo.
Este procedimento permite avaliar o potencial terapêutico de medicamentos promissores, bem como estudar o impacto de várias co-morbidades no remolding reverso do miocárdio e recuperação.
