Este sistema pode ser usado para fabricar um sistema simples, econômico e implantável para registro a longo prazo de potenciais eletromiográficos evocados ou espontâneos. A principal vantagem deste sistema sobre os sistemas convencionais de gravação emg crônicos é que os fios de chumbo são enrolados e são resistentes à quebra ou interrupção no animal em movimento acordado. A principal aplicação desta técnica é investigar a especificidade da renovação dos músculos laríngeos na presença de terapia de condicionamento elétrico para evitar a sindise.
Essa tecnologia também pode ser aplicada a outro sistema neuromuscular para o qual é necessária a estimulação nervosa crônica e/ou o registro em EMG em animais em movimento acordado. A introdução do procedimento será Shan Huang, professora assistente de pesquisa de otorquirologia no meu laboratório. Antes de preparar um manguito de eletrodo de estímulo RLN, corte 170 centímetros de comprimento de fio de aço multicolon tipo 316 para cada manguito e use um dispositivo de enrolamento para enrolar os fios em molas de 12 centímetros de comprimento.
Se necessário, estique a mola para aumentar seu comprimento para cada local de implante. Deixe três milímetros de uma extremidade e 10 milímetros da outra extremidade de cada chumbo enrolado em linha reta e desalolar cada extremidade. Em seguida, solde um pino feminino de cobre banhado a ouro na extremidade de três milímetros de cada chumbo enrolado.
Para preparar o manguito nervoso, corte um segmento de cinco milímetros de tubo de silício de um rolo de tubulação. Sob o microscópio de operação, use uma agulha hipodérmica de calibre 25 para perfurar a parede de tubos a 1,5 milímetros da extremidade e fora do centro perto da parede interna. Ensche a extremidade de 10 milímetros de uma pista na ponta da agulha e retire a agulha para depositar a porção desalolada no tubo.
Dobre a extremidade do fio nu fora do tubo e gire o fio sobre o chumbo em seu ponto de entrada no tubo para ancorar a ponta do tubo. Para inserir o segundo chumbo a 1,5 milímetros da extremidade oposta do tubo, alinhe o ponto de entrada ao do primeiro chumbo. Use a agulha para perfurar a parede e deslize seu eixo perto da parede interna em frente ao primeiro chumbo.
Enchimento da agulha com a extremidade de 10 milímetros isolada e remova a agulha. Os dois eletrodos de estímulo devem formar uma forma de V de 45 graus que irá atravessar o nervo para garantir a entrega atual através do nervo do ânodo para o cátodo. Use um par de tesouras curvas para fazer uma fenda em forma de S na parede do tubo em frente aos pontos de entrada do eletrodo e use uma agulha microcirúrgica curva para inserir um comprimento de 6-0 monofilament sutura nãoabsorbável na parede do punho em cada extremidade.
Combine uma bolha de gel de silicone tipo A de grau médico com seu solvente em um tubo Eppendorf e misture em um misturador de vórtice. Aplique a preparação do gel usando uma seringa de insulina de 30 unidades para re-isolar todo o fio exposto nu fora da braçadeira. Para preparar um manguito de eletrodo de estímulo SLN, monte a braçadeira como apenas demonstrado usando um tubo de diâmetro menor.
Para preparar um eletrodo de gravação PCA EMG, monte um chumbo enrolado para o eletrodo muscular PCA e solde um pino feminino na extremidade de três milímetros do chumbo, como demonstrado. Use uma agulha de calibre 25 para inserir a extremidade de 10 milímetros do chumbo muscular PCA na ponta de um eletrodo de estimulação cerebral profunda e dobre a extremidade da pista para formar um gancho. Em seguida, corte o lead para fornecer um total de cinco milímetros de comprimento de gravação.
Para preparar um recipiente de pele para interligar as conexões entre os eletrodos e o equipamento externo, corte duas peças de 17,5 milímetros cada uma contendo oito pinholes de um conector de tira de pino feminino de uma única linha e use lixa para endurecer as superfícies externas de cada peça. Use fenol para colar as peças lixadas em um capô de fumaça e coloque o conector de duas fileiras resultante em um recipiente de água de 60-80 graus no capô da fumaça por 30 minutos. Enquanto a cola está endurecendo, corte uma placa facial de 25,6 milímetros da tira.
Faça um buraco no meio da placa facial. Amplie o orifício com uma prensa de perfuração e bisturi para fazer um orifício retangular de 5,4 por 17,4 milímetros centrado no meio da placa facial. Finalize e aquade os cantos do buraco com um arquivo.
Quando a cola secar, insira a borda do conector de linha dupla com os orifícios de diâmetro maior dentro do orifício retangular da placa facial até que seja lavada com a superfície da placa facial. Use fenol para aderir ao conector à placa facial e coloque o conjunto em água de 60-90 graus. Quando o fenol tiver endurecido, faça um buraco de 1,3 milímetros em cada canto da placa facial e em cada lado da placa facial no meio de cada extremidade.
Corte um tubo de 15 milímetros de comprimento de enxerto de poliéster de malha e use uma agulha hipodérmica para enfiar fios de aço inoxidável através da parede em três posições de 3,8 milímetros de distância ao longo do comprimento do enxerto para fixar o tubo ao conjunto. Coloque entalhes igualmente espaçados em cada canto do conector para ancorar os fios contra a superfície de montagem e use alicates para torcer as extremidades de cada fio para apertar o tubo para o conjunto. Em seguida, faça uma marca permanente no patch de poliéster em uma extremidade do recipiente.
Faça uma incisão do pescoço médio do entalhe da tireoide ao manúbrio. Depois de expor a borda inferior da cartilagem cricoide em um canino anestesiado, posicione o punho de estímulo sobre cada uma das SLNs e RLNs bilaterais e use as suturas fechadas para fechar os lábios de cada punho. Use um soco de biópsia para fazer uma janela de cartilagem de quatro milímetros em cada lado da superfície anterior da cartilagem da tireoide e expor os aspectos laterais dos complexos musculares cricoarytenoides laterais do tireorrentoide.
Insira a barb de cada eletrodo de gravação EMG no complexo TA LCA usando uma agulha de calibre 23 e sutura o patch de poliéster na cartilagem cricoide em cada um dos quatro cantos. Coloque o eletrodo de estimulação cerebral profunda com seu fio companheiro de gancho EMG gravando eletrodo sob o músculo PCA de cada lado e use um endoscópio para confirmar que a estimulação produz uma abdução de dobra vocal para cada canal. Use suturas nãoabsorbáveis 4-0 para ancorar os eletrodos de estimulação cerebral profunda na cartilagem cricoide usando uma âncora que trava no chumbo.
Insira todos os fios da estimulação nervosa EMG registrando eletrodos no recipiente através de seus pinos femininos usando uma ferramenta de inserção feita a partir de um hemostat. Use cimento ósseo para selar a superfície inferior do recipiente para isolar as junções dos pinos de chumbo. Quando o cimento tiver endurecido, coloque o recipiente na extremidade rostral da incisão da linha média e sutura o recipiente para tecidos subcutâneos através da saia de poliéster.
Em seguida, passe as suturas através dos orifícios da placa facial para anexar a borda da pele ao recipiente. Aqui, uma gravação EMG representativa de uma das sessões de linha de base com as RLNs intactas é mostrada. Em uma gravação do músculo PCA, a estimulação RLN produz um artefato de estímulo seguido de um grande potencial emg evocado.
Em uma gravação do complexo muscular cricoarytenóide lateral tireorrentoide, a estimulação de SLN produz um artefato de estímulo que é seguido por uma resposta muscular monossináptica de latência curta e uma resposta de fechamento glotático reflexo polissináptico de latência mais longa. Nesta gravação, rajadas de atividade espontânea de EMG podem ser registradas a partir do músculo PCA durante inspirações normais. Esta atividade inspiratória emG aumenta ao longo da entrega de dióxido de carbono a uma velocidade de varredura mais lenta.
Não há inervação inspiratória do complexo muscular cricoaryteno lateral tireorrentoide, então nenhum potencial inspirador deve ser detectado a partir desses músculos. Esta tecnologia foi adaptada para investigar os impactos do condicionamento elétrico na especificidade da re-inervação dos músculos faciais do coelho e também na atrofia dos músculos da língua de rato envelhecida.
