Nosso protocolo descreve uma técnica reprodutível para criar um modelo de aneurismas de coelho com hemodinâmica de coto e bifurcação e condição de parede degenerada em um único animal e durante uma única abordagem cirúrgica com baixas taxas de morbidade e mortalidade e altas taxas de perviedade. O modelo permite uma comparação direta do curso natural dos aneurismas saculares em relação ao papel da hemodinâmica, bem como o teste de dispositivos endovasculares em duas configurações distintas de aneurisma e condição de fluxo. A principal desvantagem deste método permanece a mesma que para a criação do modelo clássico de bifurcação e aneurismas de coto, a necessidade de equipamentos laboratoriais sofisticados e habilidades microcirúrgicas específicas.
Use um bisturi para fazer uma incisão mediana da pele do osso hioide até 1,5 centímetros caudal para o esterno manúbrio. Prepare o tecido subcutâneo e adiposo da incisão medial enquanto realiza hemostasia meticulosa. Liberte o músculo esternocefálico do tecido conjuntivo aderente e aplique a lidocaína topicamente para evitar a mioclonia.
Exponha a artéria carótida comum direita, ou CCA, medialmente do músculo esternocefálico e mantenha-a molhada com cotonetes molhados. Prepare as partes lateral e proximal do músculo esternocefálico e recrai-o medialmente com uma alça do vaso para expor o CCA. Identifique a veia jugular externa e proteja-a com um micro cotonete molhado.
Dissecar o tecido conjuntivo cuidadosamente ao longo do CCA até a bifurcação do tronco braquiocefálico para expor a artéria. Se pequenos ramos estão emergindo da artéria, coagule-os com o cauterizador. Aplique dois clipes temporários, com o primeiro na origem do CCA e o segundo dois centímetros distal dele.
Coloque uma almofada de borracha sob o recipiente e enxágue com cloridrato de papaverina para vasodilatação. Remova a adventícia cuidadosamente usando microtesouras. Realize uma arteriotomia abaixo do clipe distal com um cateter de quatro calibres 22 e insira o cateter caudalmente até o clipe proximal.
Lavar o segmento por via intraluminal com cloreto de sódio heparinizado até que não haja sangue visível. Em seguida, fixe o cateter com uma ligadura 4-0. Através do cateter, injete de 0,1 a 0,2 mililitros de elastase no segmento da artéria e incube por 20 minutos.
Após 20 minutos de tempo de incubação com elastase, limpe a solução de elastase e troque a seringa para enxaguar o segmento da artéria cerca de 10 vezes com solução salina a 0,9%. Aplicar duas ligaduras, sendo a primeira a cinco milímetros distal do clipe proximal e a segunda apenas proximalmente sob a arteriotomia. Corte o vaso a cerca de três milímetros acima da primeira ligadura e mais uma vez entre a segunda ligadura e o clipe distal.
Manter este enxerto autólogo em solução heparinizada até a criação do aneurisma de bifurcação. Abra cuidadosamente o primeiro clipe proximal e meça o aneurisma. Para criar um aneurisma de bifurcação, remova a adventícia com cuidado e faça cerca de uma incisão longitudinal de dois milímetros lateralmente no coto da CCA direita.
Aplique dois clipes temporários no CCA esquerdo para delimitar o segmento de cerca de um centímetro e remova a adventícia no meio. Realize uma arteriotomia com uma agulha de calibre 23. Em seguida, lave o segmento com cloreto de sódio heparinizado.
Aumente a arteriotomia usando microtesoura para cerca de quatro a cinco milímetros para permitir a sutura do CCA direito e da bolsa de aneurisma. Para a realização da anastomose, sutura da parede posterior proximal da carótida direita com cinco pontos, iniciando-se na borda proximal da arteriotomia na CCA esquerda. Em seguida, suture a parte de trás da bolsa de aneurisma com quatro a cinco pontos, começando na borda distal da arteriotomia na CCA esquerda.
Continue com a parte de trás distal ao nível da incisão da boca do peixe até a sutura com a parte traseira vertical do enxerto de aneurisma com três pontos. Suture a parte frontal da incisão da boca do peixe com três pontos, começando para cima e movendo-se para baixo. Finalize com a sutura frontal entre a CCA esquerda e frontal do enxerto de aneurisma e a CCA direita com cerca de seis pontos.
Antes de terminar a anastomose, enxaguar os vasos com solução salina heparinizada a 0,9% por via intraluminal. Remova o clipe no CCA direito enquanto pressiona a anastomose com os micro cotonetes para hemostasia. Em seguida, continue removendo o clipe distal do CCA esquerdo.
Se não houver sangramento maior, continue retirando o clipe proximal no CCA esquerdo para permitir o fluxo sanguíneo. No seguimento, a perviedade do aneurisma foi confirmada por angiografia por ressonância magnética. Uma sequência TOF tridimensional adquirida com uma ressonância magnética de três teslas focada nas artérias do pescoço é mostrada.
O aneurisma do coto é observado na artéria subclávia direita, e o aneurisma de bifurcação é observado na bifurcação criada pela anastomose da CCA direita na artéria subclávia esquerda. A perviedade do aneurisma também foi confirmada pela inspeção macroscópica após a extração tecidual. Os sulcos principais no clipe indicam um milímetro e os sulcos menores indicam 0,5 milímetros.
A análise microscópica dos aneurismas de coto e bifurcação foi realizada após coloração das amostras com hematoxilina-eosina. Duas etapas são críticas durante a cirurgia, primeiro, a exposição e dissecção da artéria carótida direita até o tronco braquiocefálico e, segundo, a proteção de estruturas vitais como traqueia, veia jugular e nervo laríngeo.
