O Dr. Darren Freed criou este dispositivo ESLP, e ele usa tecnologia patenteada de ventilação por pressão negativa e software, que não pode ser visto em nenhum outro lugar no campo da pesquisa ESLP. Nosso laboratório já demonstrou que a ventilação com pressão negativa causa menos lesão pulmonar durante a PSLV em comparação com a ventilação com pressão positiva. Isso provavelmente se deve ao mecanismo mais fisiológico da ventilação com pressão negativa.
Este dispositivo e protocolo são projetados para estender o tempo seguro de preservação dos pulmões doados e recondicionar os pulmões marginais para padrões aceitáveis de transplante. O dispositivo em si é muito simples de operar. O maior desafio é remover cirurgicamente os pulmões juvenis de porcos sem causar nenhuma lesão.
Eles são extremamente frágeis em comparação com os pulmões humanos adultos. Comece mantendo o volume corrente expiratório de 10 mililitros por quilograma, aumentando as pressões de pico para o recrutamento alveolar máximo. Realizar esternotomia na linha média.
Use eletrocautério para incisar a pele e o tecido subcutâneo. Dissecar os anexos de partes moles da tábua posterior do esterno inferior. Use uma serra esternal para dividir o esterno.
Insira um afastador esternal e abra amplamente. Após a realização da cardiectomia, abrir e remover a pleura mediastinal bilateralmente para expor os pulmões. Em seguida, divida os anexos pleurais do diafragma em direção ao lobo pulmonar inferior esquerdo, usando um afastador Deaver para manter o diafragma para cima.
Agora, divida o ligamento pulmonar inferior à esquerda e continue até o hilo. Em seguida, divida a veia cava inferior e os anexos pleurais do diafragma e, em seguida, retraia o diafragma para cima usando o afastador Deaver. Divida o ligamento pulmonar inferior do lado direito e continue até o hilo.
Em seguida, divida a veia inominada e os vasos do arco para expor a traqueia. Depois de dissecar bruscamente o tecido ao redor da traqueia, pince a traqueia usando uma pinça de tubulação na inspiração máxima, garantindo que o volume corrente expiratório seja de 10 mililitros por quilograma. Transeccionar a traqueia e levantar a porção da pinça para cima para fornecer tração cirúrgica.
Em seguida, dissecar a traqueia posterior do esôfago usando dissecção romba com tesoura pesada de Metzenbaum e mão livre. Divida os anexos pleurais restantes. Transeccionar a aorta acima e abaixo do brônquio esquerdo e remover os pulmões do tórax com um segmento de aorta descendente.
Depois de pesar os pulmões com a braçadeira, armazene-os rapidamente em um refrigerador cheio de gelo. Comece adicionando 500 mililitros de concentrado de hemácias ao circuito de perfusão para atingir um volume final de 1,5 litros de perfusato. Tire fotografias dos pulmões para registros de dados.
Para a biópsia pulmonar, circundar uma porção de um centímetro cúbico com fio de seda zero e amarrá-lo. Em seguida, excisar essa porção amarrada, usando tesoura para análise tecidual, conforme descrito no manuscrito do texto, e dividir o segmento de biópsia. Em seguida, para fixar o adaptador de tubo de meia polegada de 3/8 na artéria pulmonar principal, segure os lados opostos da artéria pulmonar principal usando pinças ou estalos.
Em seguida, insira o adaptador com a porção de meia polegada na artéria pulmonar principal e mantenha-o no lugar, ao mesmo tempo em que prende o adaptador na posição usando laços de seda zero ou Ethibond. Agora coloque os pulmões em decúbito dorsal na membrana de suporte de silicone e conecte-os ao dispositivo ESLP. Coloque uma segunda pinça de tubulação na traqueia perto da localização do brônquio traqueal.
Após a retirada da pinça mais distal, intubar a traqueia com o tubo endotraqueal e fixá-la em posição com duas zíperes. Em seguida, pinça a linha de ventilação usando uma pinça tubular antes de liberar a pinça proximal da traqueia. Conecte o adaptador de artéria pulmonar à linha de artéria pulmonar.
Uma vez que a artéria pulmonar principal é desarejada, iniciar o tempo para a perfusão. Na página de configurações, clique em iniciar aquecedor e defina a temperatura para 38 graus Celsius. Insira o peso do porco para calcular o fluxo de débito cardíaco.
Na página principal, defina a pressão positiva contínua nas vias aéreas para 20 centímetros de água e clique em iniciar pressão positiva contínua nas vias aéreas. Quando a ventilação começar, desaperte a linha de ventilação. Depois de zerar o sensor de pressão arterial, pinça a linha da artéria pulmonar acima do sensor de pressão com a pinça de tubulação.
Abra o sensor, clique em zero pressão da artéria pulmonar e fluxo sanguíneo zero na página de configurações e confirme se as leituras estão zeradas na página principal. Feche a torneira do sensor de pressão para ler a pressão da linha. Abra a linha para a cânula da artéria pulmonar.
Selecione 10% de débito cardíaco na página principal. Clique em retornar ao PA Manual e desaperte a linha pulmonar. Troque a solução de perfusato na tampa superior antes de prendê-la à máquina para evitar a formação de condensação durante a ESLP.
Extrair 10 mililitros de perfusato para análise centrífuga e colher uma gasometria arterial tempo zero. Colocar a amostra no gelo antes da centrifugação. Uma vez que os pulmões tenham sido perfundidos por 10 minutos, aumente o fluxo para 20% do débito cardíaco.
Quando a temperatura do perfusato atingir 32 graus Celsius, prenda a tampa da câmara no lugar com grampos para criar uma vedação hermética. Certifique-se de que os pulmões estão posicionados de forma ideal e que as fugas de ar são reparadas. Com a tampa segura, prenda a tubulação de ventilação antes de desligar a pressão positiva contínua nas vias aéreas.
Na página de configurações, selecione zero pressão intratorácica, pressão nas vias aéreas e fluxo de ar. Em seguida, confirme se as leituras estão zeradas na página principal. Clique em iniciar CPAP antes de desapertar a tubulação de ventilação.
Defina os parâmetros de ventilação mencionados no texto e clique em pressionar para iniciar a ventilação para ativar a ventilação com pressão negativa. Conecte a tubulação de ventilação lateral à câmara. Ao longo das próximas respirações, mantenha os parâmetros de ventilação mencionados no manuscrito do texto.
Após 10 minutos de perfusão, aumentar o fluxo para 20% e após 20 minutos de perfusão, aumentar o fluxo para 30% débito cardíaco. Adicione dextrose e insulina ao sistema. Avaliar a função pulmonar, utilizando débito cardíaco de 50% e gás de varredura misto desoxigenante durante cinco minutos, de acordo com as instruções do manuscrito.
A cada hora ímpar durante o modo de preservação, desenhe uma amostra de 10 mililitros de perfusato para análise futura. Colher um mililitro de gasometria arterial pré-desoxigenador a cada hora e dos portes pré e pós-desoxigenador após cinco minutos do modo de avaliação. As tendências da pressão média da artéria pulmonar, complacência dinâmica e resistência vascular pulmonar ao longo de 12 horas de perfusão e ventilação podem ser afetadas pelo protocolo experimental específico de PSL empregado.
Uma tendência típica para a relação entre pressão parcial de oxigênio arterial e fração inspirada de oxigênio nos momentos de avaliação de cinco e 11 horas ao longo da perfusão pulmonar ex-situ da ventilação com pressão negativa é demonstrada aqui. A formação de edema é outro importante índice inflamatório associado à permeabilidade endotelial, demonstrando um ganho de peso típico de 30% ao final de 12 horas de ventilação com pressão negativa ex-situ de perfusão pulmonar. O perfusato atua como um indicador substituto do estado pulmonar geral.
Portanto, a gasometria do perfusato fornece extensa informação sobre o estado metabólico dos pulmões. Durante o modelo de avaliação da PESS, que ocorre às três, cinco, sete, nove e 11 horas durante uma corrida de 12 horas, observa-se uma tendência de aumento da pressão parcial de oxigênio na artéria esquerda. É muito importante ser o mais suave possível ao remover cirurgicamente os pulmões e também se mover de forma rápida e eficiente.
O estabelecimento desse dispositivo, protocolo e laboratório levou a um ensaio clínico bem-sucedido e a várias descobertas que prolongam a preservação e o recondicionamento dos pulmões doados.
