Bioensaio de Hidratação Polínica In Vivo de Grão Único de Alta Resolução para Arabidopsis thaliana

O trabalho em nosso laboratório visa compreender as bases moleculares da compatibilidade do estigma polínico na família das angiospermas brassicaceae. Em particular, identificar o pólen e os fatores estigmatizantes que regulam a polinização bem-sucedida, especificamente aqueles que atuam nos estágios mais precoces da reprodução das plantas. Os maiores desafios experimentais são identificar genes e proteínas candidatas que possam estar envolvidos na sinalização do estigma polínico.

Uma vez identificado o candidato, estudos mutacionais são necessários para determinar sua função. Nossa pesquisa mostrou que uma família de pequenas proteínas do revestimento polínico denominadas PCP-Bs são importantes reguladores da hidratação polínica e compatibilidade do estigma polínico em Arabidopsis thaliana. Essas descobertas abriram caminho para novos avanços na compreensão da percepção dos sinais polínicos e como os estigmas os transmitem.

Até o momento, um protocolo padronizado para medir a hidratação do pólen em Arabidopsis tem faltado, dificultando comparações de conjuntos de dados. Fornecer um protocolo detalhado para um bioensaio de polinização pode facilitar a pesquisa em andamento e fornecer um kit de ferramentas de fácil acesso para cientistas interessados neste campo. Os protocolos publicados geralmente se baseiam na excisão de estigmas das flores antes de iniciar a polinização, o que pode ter consequências fisiológicas que afetam a hidratação do pólen.

O presente método tem a maior semelhança com a situação in vivo e é mais preciso na coleta de pontos de dados individuais. Nosso laboratório está focado em descobrir novos determinantes da hidratação nascidos do pólen e seus parceiros estigmatizados. Nosso trabalho publicado recentemente explorou a proteína do revestimento do pólen para Arabidopsis thaliana, revelando que a superfície do pólen contém muitas pequenas proteínas ligantes-símile, sugerindo fortemente que múltiplos fatores determinam a compatibilidade do estigma do pólen.