Nosso laboratório investiga o mecanismo celular envolvendo a agregação de proteínas no contexto da doença de Parkinson. Além disso, usamos modelos celulares e animais para testar potenciais tratamentos contra a doença de Parkinson. Neste artigo, propomos um protocolo para o estudo da morfologia mitocondrial in situ como indicador de sua saúde baseado em imunomarcação e análise de imagens em cortes de tecido embebidos em parafina.
A morfologia mitocondrial tem sido extensivamente estudada na doença de Parkinson e em outras doenças in vitro. No entanto, ainda faltam protocolos para o estudo da morfologia mitocondrial in vivo. Este protocolo fornece um método robusto para coloração de mitocôndrias no tecido cerebral, e explica em detalhes como realizar a análise morfológica.
Este estudo mostra que a imunomarcação combinada com análise de imagem é um método confiável para o entendimento da morfologia mitocondrial. De fato, permite quantificar o número de mitocôndrias, bem como outros parâmetros morfológicos, como a razão de aspecto em cultura celular e tecido. É importante ressaltar que, como esse método é baseado em imunofluorescência, é possível relacionar as morfologias com populações celulares específicas.
Aqui apresentamos um protocolo para estudar a morfologia mitocondrial na doença de Parkinson, mas este protocolo pode ser aplicado a qualquer modelo de doença in vivo. Além disso, pode ajudar na triagem de compostos de chumbo para o tratamento não só da doença de Parkinson, mas também de qualquer outra doença caracterizada por desregulação mitocondrial.