Diagnóstico baseado em CRISPR no local de atendimento com reagentes pré-misturados e liofilizados

Estamos desenvolvendo testes no local de atendimento para detectar esses materiais de doenças infecciosas. Este teste usa amplificação isotérmica de ácido nucleico e detecção baseada em CRISPR. Com precisão altamente osmótica semelhante à PCR, eles podem detectar pequenas diferenças de sequência, incluindo polimorfismo de nucleotídeo único e podem ser múltiplos.

CRISPR, as reações osmóticas contêm vários componentes e etapas e são difíceis de executar no ponto de atendimento. Como os osmóticos baseados em CRISPR são altamente sensíveis, existe o risco de contaminação por transferência que pode levar a resultados falsos. Felizmente, esse problema pode ser mitigado se simplificarmos os procedimentos das reações.

Oferecemos um método fácil de usar para detectar nossos patógenos de doenças e marcadores genéticos usando amplificação isotérmica recombinase e reagentes baseados em CRISPR. Esses reagentes são simples de armazenar e usar. Também oferecemos dicas para corrigir problemas comuns ao usar esses métodos e reagentes, facilitando o uso das pessoas.

O protocolo aqui usa reagentes CRISPR, que facilitam o transporte e o armazenamento. Os reagentes liofilizados podem ser facilmente reidratados nos pontos de uso e mantêm altas eficiências de amplificação e detecção. Esperamos aplicar tecnologias de diagnóstico CRISPR para detectar doenças infecciosas endêmicas e emergentes.

Se esse teste puder ser realizado de forma rotineira e correta no local de atendimento, isso poderá informar as opções de tratamento antiviral e antibiótico, potencialmente salvar vidas, reduzir o uso excessivo de medicamentos e o desenvolvimento de resistência.