Отбор проб морской воды и сбор

Резюме

Это видео документы методы сбора проб воды прибрежных морских и обработка их для различных приложений, включая вниз по течению концентрация биомассы, нуклеиновые кислоты очистки, сотовые изобилие, питательных веществ и следов анализ газа.

Аннотация

Это видео документы методы сбора проб воды прибрежных морских и обработка их для различных приложений, включая вниз по течению концентрация биомассы, нуклеиновые кислоты очистки, сотовые изобилие, питательных веществ и следов анализ газа. Для демонстрации сегодняшней образцы были собраны с палубы HMS Джон Стрикленд, работающих в Саанич входе. А-образные вышки, с многоцелевым лебедки и кабельная система, используется в сочетании с Niskin или Go-Flo бутылки отбора проб воды. Проводимости, температуры и глубины (CTD) датчики используются также для образца основной водной массы. Чтобы свести к минимуму дегазации, следов газа образцы собраны в первую очередь. Затем, питательные вещества, химический состав воды, а также клеток определяются. Наконец, воды собираются для биомассы фильтрации. Настройка и время сбора для одного приведение ~ 1,5 часа при максимальной глубине 215 метров. Таким образом, в общей сложности 6 часов, как правило, необходимых для завершения коллекции серии описаны здесь.

протокол

Часть 1: для сбора воды

1. Глубины присваиваются каждому актеров.
2. Глубины на отбор проб и общего объема должны быть собраны для текущего литых определяются.
3. Он заверил, что Go-Фло и Niskin бутылки открыты, и что их клапаны и краны закрыты.
4. CTD загружается на нижней линии и ниже в воду.
5. Бутылки для глубокой глубине, отобранных в литых первой загружается на линии после CTD, он заверил, что линия правильно установлены в скобы и винты затянуты.
6. Посланник прилагается к каждой бутылке (за исключением самых глубоких один) перед спуском.
7. Линия опускается расстояние между первым глубину и затем; еще одну бутылку, затем загружены. Следует отметить, что для глубин, где 20L собираются для фильтрации, в общей сложности 2 12L бутылки загружаются последовательно около 0,75 м друг от друга.
8. После того как все бутылки на линии, линии опускают на необходимую глубину и 2 минуты разрешается проход.
9. Гонец направляется вниз и через несколько минут разрешено пройти, чтобы все бутылки близко.
10. Линия наматывается внутри и бутылки выгружаются по мере их появления на стойках.
11. Для глубин, которые требуют 20L пробы для ДНК и РНК, две бутылки Niskin собираются. Одна бутылка используется для образцов химических параметров (см. ниже), в то время как другие сливают в бутыль. РНК собирается сразу со второго Niskin. Остальная часть первой также слить в бутыль, чтобы дать ~ 20L конечного объема. Для низкого разрешения образцов только 1л воды, предназначенные для фильтрации в стерильные бутылки Nalgene.

Часть 2: сбор пробы газа

1. Если кислорода образцы нужны, они собираются в первую очередь.
2. Кусок тонкой трубки крепится к Niskin / Go-Flo кран, а другой конец трубки находится место в стеклянные бутылки сыворотки.
3. Сыворотке бутылки промыть 3 раза пробы воды, и наполнил до краев, что нет воздушных пузырей присутствуют.
4. 50 мкл хлоридом ртути (HgCl ₂₎ будут добавлены в сыворотке бутылку так, чтобы не вводить воздушных пузырьков в пробе.
5. Бутылка запечатана с резиновой пробкой и обжимается с алюминиевой крышкой, а затем хранится на льду в кулере.

Часть 3: Питательный сбор образцов

1. 60 мл шприца промывают пробы воды, (0,2 мкм) прилагается в линию и немного воды выталкивается через Acrodisc.
2. Полиэтиленовые бутылки промыть ~ 10 мл фильтрованной воды 3 раза (взболтайте бутылку, когда промывка).
3. Фильтрованный пробы воды добавляется в бутылки, около ¾ полном объеме.
4. Образец хранится на лед в холодильнике.

Часть 4: коллекции образцов Аммиак

1. Пример трубы промываются пробы воды.
2. Пример трубы заполняются полностью с образцом воды.
3. 5 мл пробы воды берутся с помощью пипетки 10 мл, остальное вода в трубке отбрасывается и 5 мл в пипетки наконечник заменяются в пробирку.
4. 7.5ml аммония рабочий раствор добавляют в каждую пробирку раз образцы из всех глубинах были собраны.

Часть 5: сбор проб для сотовых перечисления

1. Предварительно меченных 50 мл Сокол пробирку, содержащую 5,4 мл 37% формальдегида доверху для конечной концентрации 4%. Уход берется не расплескать.

Часть 6: сбор проб для измерения водородного сульфида

1. Предварительно меченных 50 мл Сокол трубки, содержащей 20% ацетат цинка (Zn (O ₂ CCH _{3) 2)} заполняется до самого верха. Уход берется не расплескать.

Часть 7: Небольшая коллекция объем биомассы концентрация

1. 1-литровые бутылки доверху.

Часть 8: Большая коллекция объем биомассы концентрация

1. 20-литровых бутылях заполнены.

Часть 9: Представитель Результаты

Окончательные результаты отбора проб морской воды приводит к приблизительно 12 растворенные образцы кислорода, 32-48 образцов газа, 16 питательных проб, 32 пробы аммония, 16 образцов сероводорода, 16 образцов для клеток, 6 20-литровых бутылях 16, 1-литровых бутылок и 4 Sterivex 0.22μm фильтры, содержащие микробной биомассы сохранились с РНК позже.

Обсуждение

В целом, существует большая подготовка и планирование необходимых для этого типа выборки, поэтому бюджет за 2 дня до поездки, чтобы получить вещи в порядок и потом в один прекрасный день для очистки все вверх. В общем, не давайте соленой воде вступает в контакт с перистальтического насос...

Материалы

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Name	Company	Catalog Number	Comments
20L Carboys		Fisher	02-960-15
3/8" Tygon		Cole Parmer	06429-36
Sterivex filters		Fisher	SVG010RS
Prefilter Housing Unit		AMD	501200
Luer Fitting		Cole Parmer	31507-27
1/4" Tygon tubing		Cole Parmer	06429-24
1/4" Tygon tubing		Cole Parmer	06429-24
1/4" Tygon tubing		Cole Parmer	06429-24
50ml Plastic tubes
Glass Serum Bottles				Glass Sample Collection
Septa and aluminum caps for glass serum bottles
Hand Crimper
20-200ul Pipette and Tips
Glass Tubes				Ammonium Sample Collection
30ml Plastic Bottles				Nutrient Collection
Acrodisc Filters		Millipore
5 ml Tubes				Nitrite Sample Collection
37% Formaldehyde	Reagent			For cell count samples
20% Zinc Acetate	Reagent			For sulfide samples
Mercuric Chloride	Reagent			For gas samples
milliQ water	Reagent
Ammonium Working Reagent	Reagent			Borate buffer, sodium sulfite, orthophaladialdehyde
Sulfanilamide	Reagent			5g into 450ml water and 50ml HCl
N-(1-naphthy)-ethylenediamine dihydrochloride solution	Reagent			0.5g into 500ml water