JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Цель этого исследования заключается в отчет протокол для артроскопическое лечение поражений остеохондральные осыпи, используя microfractured и очищенный стволовых клеток жировой производные.

Аннотация

В последние годы восстановительных методов чаще изучал и используется для лечения остеохондральные повреждения осыпи. В частности некоторые исследования сосредоточили свое внимание на мезенхимальные стволовые клетки, полученные из жировой ткани. Жировой производные стволовые клетки (ADSCs) экспонат морфологические характеристики и свойства похожи на другие мезенхимальных клеток и способны дифференцироваться в несколько клеточных линий. Кроме того эти клетки также широко доступны в подкожной клетчатке, составляет 10-30% от нормального веса тела, с концентрацией 5000 клеток в грамм ткани.

В представленной методики на первом этапе заготовки ADSCs от живота и процесс микроперелому и очистки; Далее хирургическая процедура выполняется полностью arthroscopically, с менее рассечения мягких тканей, совместные наглядности и быстрого восстановления по сравнению с стандартными процедурами открытым. Артроскопия характеризуется первый этап, в котором поражения выявлены, изолированных и подготовлен с микроперфорация; Второй шаг, выполненные сухой, включает в себя инъекции жировой ткани на уровне поражения.

Января 2016 года и сентября 2016 четыре больных прошли артроскопическое лечение остеохондральные повреждения осыпи с microfractured и очищенного жировой ткани. Все пациенты сообщили клинического улучшения через шесть месяцев после операции с осложнений не сообщалось. Функциональные результаты по итогам последних являются обнадеживающими и подтвердить, что техника обеспечивает надежный боли и улучшения у пациентов с поражением остеохондральные осыпи.

Введение

Артроскопия является золотым стандартом для лечения поражений остеохондральные осыпи (OLTs) с целью облегчения боли, восстановление функциональности и улучшение качества жизни, особенно в молодых и активных пациентов.

В настоящее время артроскопической техники могут быть классифицированы по трем направлениям. Восстановительная техника стимулирует клетки, полученные из костного мозга через хирургическая и микроперфорация на уровне поражения. Реконструктивной техники заменяет поражения, с использованием лоскута аутологичной или гетерологичных ostechondral. Регенеративные техника использует способность клеток Multipotent с дифференцировать и репликации для восстановления поврежденной ткани1,2,3,4,5,6 .

В последние годы регенеративные методы были предметом многочисленных исследований in vitro и in vivo для лечения OLTs и особенно мезенхимальные стволовые клетки, полученные из жировой ткани (ADSCs)7,8 , 9. Эти мезенхимальные стволовые клетки проявляют Морфологические и функциональные характеристики, похож на другие Multipotent с клетки, изолированный от других тканей; Они также способны дифференцироваться в несколько различных сотовых линии в пробирке и в естественных условияхи10,11,12,13. Акцент на исследованиях, касающихся эти клетки в основном за счет их локализации, в действительности они представляют собой от 10% до 30% от нормального веса тела с концентрацией 5000 клеток на грамм ткани13,14. С другой стороны является фактором, который ограничивает использование этих клеток связана с их обработки при лабораторных процедур. Lipoaspirate, содержащие агрегаты адипоциты, коллагеновые волокна и нормальной сосудистой компонентов ферментативно обрабатывается с коллагеном A типа I и подвергается гемолиз до культуры. Здесь цель заключается в том, чтобы описать протокол для лечения поражений остеохондральные осыпи, используя microfractured и очищенного жировой ткани.

протокол

Все процедуры выполняются в исследованиях с участием людей участники были в соответствии с этических стандартов, институциональным и/или национального исследовательского комитета и с 1964 года Хельсинкская декларация и его более поздних поправок или сопоставимые этических стандарты.

1. медицинская история

  1. Начните клиническое обследование с подробной истории пациента.
    Примечание: OLT всегда должна быть подозреваемым в случае нестабильности голеностопного с повторяющиеся вывихи, связанные с отеком, жесткость, боль и совместное блокирование. Кроме того во многих случаях OLT могут быть связаны с историей системных заболеваний, таких как воспалительные или сосудистых заболеваний, нейропатии или неврологические заболевания и диабет. Использование наркотиков или медицинские проблемы, которые могут повлиять на исцеление необходимо оценены и учтены.

2. клиническое обследование

  1. Оцените пациента в ортостатической позиции для выделения лодыжки или задние ноги деформации. Оцените мышцы и сухожилия функция и лодыжки диапазон движения (ROM). Диффузный нежность присутствует часто, особенно во время максимальной сгибания и разгибания, и это не редкость встретить сенсорные области на уровне суставной сустава.
  2. Выполните тест передний и задний лоток для выявления сопутствующих боковых лодыжки нестабильности.
  3. Во время предоперационного консультации, запишите следующие клинические и функциональной оценки: американский ортопедические ног и лодыжки общества (ученые) голеностопного сустава и стопы Хинд оценки15, визуальные аналоговая шкала (VAS) боль Оценка16и короткая форма 12-элемент Медицинского обследования (SF-12)17.

3. радиологической оценки

  1. Выполнение двусторонних отягощения рентгенограмма стопы и голеностопного сустава. Это состоит из обычных врезной переднезаднем (AP)-несущие и боковым видом несущие лодыжки. Выполняйте AP врезные в нейтральном положении, а с 15 градусов внутренней ротации для лучшей визуализации осыпи.
    Примечание: Только 50% OLT может быть диагностирована с рентгенограмме; в случае крупных поражений площадь отдельные кости, окруженный radiolucency может быть отмечено18.
  2. Выполнение обычных компьютерная томография сканирование (КТ) лодыжки. КТ позволяет точное расположение и размер очага поражения, также определение костных фрагментов в случае отряд. Слабым местом CT является способность Показать статус хряща. Предыдущие исследования показали чувствительность и специфичность 0,81 и 0.99, соответственно, для обнаружения OLTs CT19,20.
  3. Выполните магнитно-резонансная томография (МРТ) лодыжки. МРТ является основополагающим в оценке хряща и субхондральной кости. Кроме того МРТ не связаны ионизирующего излучения и позволяет лучше визуализации мягких тканей. Литературе сообщает чувствительность и специфичность в выявлении OLTs21,2296%.

4. хирургическая техника

  1. Заготовка и переработка жировой ткани
    1. Приготовляют раствор Клейн: 1 Л раствора 9 г/Л, 50 мл 1% лидокаина, 1 мл эпинефрин 1: 1000, 10 мл бикарбоната натрия 8,4% и 0,1 мл 10 мг/мл Триамцинолона ацетонид.
    2. Создайте два пункт-пупочная надрезы около 0,5 см с лезвием скальпеля. Inject приблизительно 300 мл раствора Кляйн в подкожной жировой ткани живота через разрезы, с использованием шприцев 60 мл с иглой 18G (рис. 1).
    3. Урожай 40-45 мл ADSCs, используя 13G тупой канюлей придает 20 мл шприц и введен в пакете обработки (рис. 2). Как правило выполняют уборки в пери пупочной области.
    4. Вставьте 100-130 мл lipoaspirate в закрытой системе. Вставьте устройство lipoaspirate через большой фильтр для получения первого сокращения кластера; в то же время соответствующее количество физиологического раствора выходы к тратить мешок. Ключевую роль играет мраморы из нержавеющей стали для получения временной эмульсии между масло, кровь и физиологического раствора. Удалите остатки масла и зараженной крови, тяжести противотоком физраствора.
    5. После этого шага стиральные (пропуская раствор появляется ясно и lipoaspirate желтый) остановить физиологическим потока и обратить вспять устройства (серая кепка вверх), привело к сокращению второй жировой кластера. Получите сокращение, нажав плавающей жировой кластеры через второй фильтр гексагональной резки, толкая жидкости ниже с шприц 10 мл. Соберите конечного продукта в 10-мл шприц, подключенных к верхней открытия устройства.
      Примечание: Обработка комплект для жировой ткани улучшает стандартные липофилинг техника: в самом деле, система состоит из закрытого, полного погружения, низкого давления цилиндрических системы, для получения жидкости и единый продукт, содержащий большое количество pericytes. Эта процедура позволяет обработку жировых клеток исключительно через мягкий механических сил и сохранения целостности стромальные сосудистой нишу. Этот процесс является наименее травматичный возможным и делает конечный продукт доступен в течение короткого времени (15-20 мин.), без ферментативной обработки или расширения. Неповрежденные vasculostromal ниши помочь процессу заживления.
    6. После ADSCs было собрано, примените сжатия повязку на животе.
  2. Хирургическая процедура и инъекция жировой ткани
    1. Место пациента в лежачем положении под спинальной анестезией с жгут, при давлении 250 мм рт.ст., на уровне бедра уменьшить кровотечение и позволяют лучше артроскопической визуализации1.
    2. Марк анатомические ориентиры на кожу с dermographic ручкой. Достопримечательности необходимо избежать ятрогенных травм.
      Марк следующее (рис. 3):
      Оба malleoli (боковая (LM) и медиальной (мм))
      передней совместной линии (JL), определены с длиннейшей - и подошвенные сгибание голеностопного сустава
      tibialis передней сухожилия (ТАТ) и ахиллова сухожилия
      большой подкожной вены, который бежит впереди медиальной лодыжки
      поверхностного малоберцового нерва (SPN)
    3. Во-первых выполните переднемедиальной портал просто медиальнее tibialis передней сухожилия, совпадая с мягкое место. Этот портал представляет портал подход. В большинстве случаев депрессии с лодыжки в dorsiflexion видна и ощутима.
      1. Вырезать только кожу с лезвием и затем перфорации капсулы с тупым рассечение. Позаботьтесь, чтобы избежать подкожной нерва и большой подкожной вены. Подкожной вены находится расположен 9 мм боково на портале, а нерв-около 7,4 мм боковой портал. Это является одной из двух основных просмотра порталов.
    4. Проверьте совместной линии, место переднебоковой портал, медиально к латеральной и боковых сухожилия разгибателя пальцев.
      Примечание: При выполнении переднебоковой портал, предотвращения травм на промежуточных спинной кожный нерв (боковая ветвь поверхностного малоберцового нерва); по этой причине после резки, кожи должен следовать тупым рассечение.
    5. Осмотрите суставного хряща оценить размер и положение. Оцените состояние и качество хряща с palpator. Остеохондральные повреждения осыпи обычно расположены posteromedially или anterolaterally.
      1. Выполняйте артроскопическое лечение с помощью широкоугольной 2.7-мм arthroscopes с углом 30°, хотя некоторые хирурги будут использовать больше 4 мм артроскопа и держите инструмент в передней перерыва сустава. Неинвазивная совместных отвлечение методы и гипер подошвенного сгибания может использоваться для доступа к наиболее talar купола.
      2. В случае заднего поражением чрескожно место Хинтерман разбрасыватель отвлечь Объединенной и позволить воздействия поражения. Хинтерман разбрасыватель имеет открытие рычаг рукой наносят на два K-провода, ранее позиционируется в голени и talar кости медиально и латерально, согласно на стороне поражения. В случае боковых поражением Позаботьтесь, чтобы вставить проксимальной K-провод в большеберцовой кости, избегая малоберцовой кости, для достижения лучшего отвлечение сустава.
    6. Подготовить поражения с кюретка, удаление поврежденных и нестабильной хряща, кальцинированная слой и некротические и склеротических кости с целью создания регулярной образный содержала поражения с буртом границы. Для этого шага используйте стандартный артроскопической кюретки (рис. 4).
    7. Стимулирует стволовые клетки костного мозга от субхондральной кости, выполняя микроперфорация резко снаружи внутрь очага поражения.
      1. Осуществляют перфорации с интервалом между ними около 3 мм. Вызвать microfractures, с помощью хондральные Pick на здоровых субхондральной кости под дефекта (рис. 5).
        Примечание: Кровоизлияние приводит к образованию фибринового сгустка. Товары, через воспалительных каскад активации, свертывания крови релиз вазоактивных посредников, факторов роста и цитокинов. Эти факторы имеют право для стимулирования сосудистая инвазия и миграции мезенхимальных стволовых клеток в хондральные часть поражения. Эти плюрипотентных клеток, стимулируются дифференцироваться в фибробласты, хондроцитов и остеобластов, и играть важную роль в стимулировании ремонт поражения. Паракринными факторов роста в суставной окружающей среды поощрения формирования внеклеточного матрикса и производства Волокнистый хрящ. В то же время клетки костной части поражения производят незрелых костной ткани, которая постепенно заменяется на зрелых кости.
    8. Удаление внутрисуставных воды, используя бритву в аспирации и остальные жидкости, губкой хлопка до тех пор, пока сустав полностью сухой.
  3. Инъекции стволовых клеток жировой, полученных
    1. Придать 5-7 мл жировой производные стволовых клеток, ранее подготовленных в шаге 4.1.3, в голеностопного сустава с помощью одного из двух порталов (переднемедиальной или переднебоковой).
    2. Выпуск жгут.

5. послеоперационный уход

  1. Избегайте движения лодыжки на 15 дней, с приводом конечности в полной разрядкой.
  2. 15 дней после операции, позволяют активных и пассивных движений лодыжки, пока не будет достигнуто полного восстановления и диапазон движения.
  3. Позволяют бесплатно 30 дней после операции.

6. клинические и рентгенологические последующая деятельность

  1. Оценка пациентов клинически и радиоактивно на шесть и двенадцать месяцев и, впоследствии, ежегодно. Последующих протокол состоит из ученые лодыжки и задние ноги счеты, оценка боли VAS и SF-12 на каждой конечной точке по15,16,17. Рентгенографический контроль включает в себя МРТ и КТ оперированных лодыжки.

Результаты

Января 2016 года и сентября 2016 четыре больных прошли артроскопическое лечение остеохондральные повреждения осыпи с microfractured и очищенного жировой ткани. Все пациенты сообщили клинического улучшения через шесть месяцев после операции. Предварительные клинические резул?...

Обсуждение

В последние годы доклинических и клинических испытаний сосредоточили свое внимание на эффект ADSCs для лечения различных патологий опорно-двигательного аппарата. Цель этой статьи заключается в том, чтобы описать протокол для лечения поражений остеохондральные осыпи, используя microfractured ...

Раскрытие информации

Федерико Giuseppe Узуэлли, MD, сообщает личные сборов от Integra и Geistlich и субсидии и личные сборов от Циммер, вне представленной работы.

Благодарности

Процедуры выполняются с использованием системы Lipogems.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
PROCESS KIT - PROCESSING KIT FOR FAT TISSUELIPOGEMSLG PK 60Lipogems Kit to obtain microfractured and purified ADSCs
HINTERMANN SPREADERINTEGRA119654The spreader allow to access most of the talar dome, in particular in case of posterior lesion
CUP CURETTEARTHREXAR-8655-02To remove the damaged cartilage and necrotic and sclerotic bone
CHONDRAL PICK 30° TIP / 60° TIPARTHREXAR-8655-05
AR-8655-06		To perfrom microperforation at the level of the lesion, stimulating bleeding from the subchondral bone
SHAVERARTHREXAR-7300SRTo clean the joint and aspirate water

Ссылки

  1. D'Ambrosi, R., Maccario, C., Serra, N., Liuni, F., Usuelli, F. G. Osteochondral Lesions of the Talus and Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis: Is Age a Negative Predictor Outcome?. Arthroscopy. 33 (2), 428-435 (2017).
  2. Becher, C., et al. T2-mapping at 3 T after microfracture in the treatment of osteochondral defects of the talus at an average follow-up of 8 years. Knee Surg. SportsTraumatol. Arthrosc. 23 (8), 2406-2412 (2015).
  3. Polat, G., et al. Long-term results of microfracture in the treatment of talus osteochondral lesions. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 24 (4), 1299-1303 (2016).
  4. van Bergen, C. J., et al. Arthroscopic treatment of osteochondral defects of the talus: outcomes at eight to twenty years of follow-up. J. Bone Joint Surg. Am. 95 (6), 519-525 (2013).
  5. van Eekeren, I. C., et al. Return to sports after arthroscopic debridement and bone marrow stimulation of osteochondral talar defects: a 5- to 24-year follow-up study. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc. 24 (4), 1311-1315 (2016).
  6. D'Ambrosi, R., Maccario, C., Ursino, C., Serra, N., Usuelli, F. G. Combining Microfractures, Autologous Bone Graft, and Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis for the Treatment of Juvenile Osteochondral Talar Lesions. Foot Ankle Int. 38 (5), 485-495 (2017).
  7. Usuelli, F. G., D'Ambrosi, R., Maccario, C., Indino, C., Manzi, L., Maffulli, N. Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies. British Medical Bulletin. , (2017).
  8. Kim, Y. S., et al. Assessment of clinical and MRI outcomes after mesenchymal stem cell implantation in patients with knee osteoarthritis: a prospective study. Osteoarthr Cartilage. 24 (2), 237-245 (2016).
  9. Koh, Y. G., Choi, Y. J., Kwon, S. K., Kim, Y. S., Yeo, J. E. Clinical results and second-look arthroscopic findings after treatment with adipose-derived stem cells for knee osteoarthritis. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 23 (5), 1308-1316 (2015).
  10. Zuk, P. A., et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol. Biol. Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).
  11. Taléns-Visconti, R., et al. Human mesenchymal stem cells from adipose tissue: Differentiation into hepatic lineage. Toxicol. In Vitro. 21 (2), 324-329 (2007).
  12. Timper, K., et al. Human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells differentiate into insulin, somatostatin, and glucagon expressing cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 341 (4), 1135-1140 (2006).
  13. Tremolada, C., Palmieri, G., Ricordi, C. Adipocyte transplantation and stem cells: plastic surgery meets regenerative medicine. Cell. Transplant. 19 (10), 1217-1223 (2010).
  14. Keramaris, N. C., et al. Endothelial progenitor cells (EPCs) and mesenchymal stem cells (MSCs) in bone healing. Curr. Stem Cell. Res. Ther. 7 (4), 293-301 (2012).
  15. Leigheb, M., et al. Italian translation, cultural adaptation and validation of the American Orthopaedic Foot and Ankle Society's (AOFAS) ankle-hindfoot scale. Acta Biomed. 87 (1), 38-45 (2016).
  16. Ware, J., Kosinski, M., Keller, S. D. A 12-Item Short-Form Health Survey: construction of scales and preliminary tests of reliability and validity. Med. Care. 34 (3), 220-233 (1996).
  17. Hawker, G. A., Mian, S., Kendzerska, T., French, M. Measures of adult pain: Visual Analog Scale for Pain (VAS Pain), Numeric Rating Scale for Pain (NRS Pain), McGill Pain Questionnaire (MPQ), Short-Form McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ), Chronic Pain Grade Scale (CPGS), Short Form-36 Bodily Pain Scale (SF-36 BPS), and Measure of Intermittent and Constant Osteoarthritis Pain (ICOAP). Arthritis Care (Hoboken). 63, S240-S252 (2011).
  18. Bergen, C. J., Gerards, R. M., Opdam, K. T., Terra, M. P., Kerkhoffs, G. M. Diagnosing, planning and evaluating osteochondral ankle defects with imaging modalities. World. J. Orthop. 6 (11), 944-953 (2015).
  19. van Dijk, C. N., Reilingh, M. L., Zengerink, M., van Bergen, C. J. Osteochondral defects in the ankle: why painful?. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18 (5), 570-580 (2010).
  20. Madry, H., van Dijk, C. N., Mueller-Gerbl, M. The basic science of the subchondral bone. Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18 (4), 419-433 (2010).
  21. Mintz, D. N., Tashjian, G. S., Connell, D. A., Deland, J. T., O'Malley, M., Potter, H. G. Osteochondral lesions of the talus: a new magnetic resonance grading system with arthroscopic correlation. Arthroscopy. 19 (4), 353-359 (2003).
  22. Leumann, A., et al. A novel imaging method for osteochondral lesions of the talus--comparison of SPECT-CT with MRI. Am. J. Sports Med. 39 (5), 1095-1101 (2011).
  23. Kim, Y. S., Park, E. H., Kim, Y. C., Koh, Y. G. Clinical outcomes of mesenchymal stem cell injection with arthroscopic treatment in older patients with osteochondral lesions of the talus. Am. J. Sports Med. 41 (5), 1090-1099 (2013).
  24. Kim, Y. S., Lee, H. J., Choi, Y. J., Kim, Y. I., Koh, Y. G. Does an injection of a stromal vascular fraction containing adipose-derived mesenchymal stem cells influence the outcomes of marrow stimulation in osteochondral lesions of the talus? A clinical and magnetic resonance imaging study. Am. J. Sports Med. 42 (10), 2424-2434 (2014).
  25. Kim, Y. S., Koh, Y. G. Injection of Mesenchymal Stem Cells as a Supplementary Strategy of Marrow Stimulation Improves Cartilage Regeneration After Lateral Sliding Calcaneal Osteotomy for Varus Ankle Osteoarthritis: Clinical and Second-Look Arthroscopic Results. Arthroscopy. 32 (5), 878-889 (2016).
  26. Kim, Y. S., Lee, M., Koh, Y. G. Additional mesenchymal stem cell injection improves the outcomes of marrow stimulation combined with supramalleolar osteotomy in varus ankle osteoarthritis: short-term clinical results with second-look arthroscopic evaluation. J. Exp. Orthop. 3 (1), 12 (2016).
  27. Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results. Dermatol Surg. 21 (5), 459-462 (1995).
  28. Illouz, Y. G. Complications of liposuction. Clin Plast Surg. 33 (1), 129-163 (2006).
  29. Dixit, V. V., Wagh, M. S. Unfavourable outcomes of liposuction and their management. Indian J Plast Surg. 46 (2), 377-392 (2013).
  30. Lehnhardt, M., Homann, H. H., Daigeler, A., Hauser, J., Palka, P., Steinau, H. U. Major and lethal complications of liposuction: review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002. Plast Reconstr Surg. 121 (6), 396e-403e (2008).
  31. Usuelli, F. G., de Girolamo, L., Grassi, M., D'Ambrosi, R., Montrasio, U. A., Boga, M. All-Arthroscopic Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis for the Treatment of Osteochondral Lesions of the Talus. Arthrosc Tech. 4 (3), e255-e259 (2015).
  32. Simonson, D. C., Roukis, T. S. Safety of ankle arthroscopy for the treatment of anterolateral soft-tissue impingement. Arthroscopy. 30 (2), 256-259 (2014).
  33. Suzangar, M., Rosenfeld, P. Ankle arthroscopy: is preoperative marking of the superficial peroneal nerve important?. J. Foot. Ankle Surg. 51 (2), 179-181 (2012).
  34. Kraeutler, M. J., et al. Current Concepts Review Update: Osteochondral Lesions of the Talus. Foot Ankle Int. 38 (3), 331-342 (2017).
  35. Looze, C. A., et al. Evaluation and Management of Osteochondral Lesions of the Talus. Cartilage. 8 (1), 19-30 (2017).
  36. Dragoo, J. L., et al. Healing full-thickness cartilage defects using adipose-derived stem cells. Tissue Eng. 13 (7), 1615-1621 (2007).
  37. Lee, S. Y., Kim, W., Lim, C., Chung, S. G. Treatment of Lateral Epicondylosis by Using Allogeneic Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells: A Pilot Study. Stem Cells. 33 (10), 2995-3005 (2015).
  38. Feisst, V., Meidinger, S., Locke, M. B. From bench to bedside: use of human adipose-derived stem cells. Stem Cells Cloning. 8, 149-162 (2015).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

131

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены