헌 Microfractured 고 순화 된 지방 조직에서 탈 러 스의 Osteochondral 장애의 절경 관리에 대 한

요약

이 연구의 목적은 microfractured 고 순화 된 지방 유래 줄기 세포를 사용 하 여 탈 러 스의 osteochondral 장애의 절경 치료에 대 한 프로토콜을 보고입니다.

초록

최근 몇 년 동안, 재생 기술 되어 점점 더 공부 하 고는 탈 러 스의 osteochondral 병 변을 치료 하는 데 사용. 특히, 여러 연구 결과 중간 엽 줄기 세포는 지방 조직에서 파생 된에 그들의 주의 집중 했다. 지방 유래 줄기 세포 (줄기) 형태학 상 특성 및 속성 다른 중간 엽 세포와 비슷한 고 여러 세포 선으로 분화 할 수 있다. 또한, 이러한 세포 조직의 그램 당 5000 세포의 농도와 정상적인 몸 무게의 10-30%를 대표 하는 피하 조직에서 널리 사용할 수 있습니다.

제시 기술, 첫 번째 단계는 줄기를 수확 하는 복 부와 미세 및 정화;의 과정에서 포함 한다 다음, 수술 완전히 arthroscopically 적은 부드러운 조직 절 개, 더 나은 공동 시각화와 표준 오픈 절차와 비교 된 더 빠른 복구 수행 됩니다. 관절에 병 변 식별, 절연, 및 microperforations; 준비 첫 단계 특징 이다 두 번째 단계, 수행된 건조, 지방 조직 병 변의 수준에서의 주입을 포함 한다.

1 월 2016 9 월 2016 년 사이 4 명의 환자 microfractured와 순화 된 지방 조직 탈 러 스의 osteochondral 병 변의 절경 치료를 받았다. 모든 환자 보고 된 합병증으로 수술 후 6 개월 임상 개선 보고. 최신 후속에 기능 점수 장려 하 고 신뢰할 수 있는 통증과 탈 러 스의 osteochondral 병 변 환자에서 개선을 제공 하는 기술을 확인 합니다.

서문

관절의 통증, 기능, 복원 하 고 삶의 질 향상, 특히 젊고 활동적인 환자에서에서 목표와 탈 러 스 (OLTs)의 osteochondral 장애의 치료에 대 한 황금 표준입니다.

현재, 절경 기법 세 가지 방법으로 나눌 수 있다. 와 기술 debridement 그리고 병 변의 수준에서 microperforations를 통해 골 수에서 파생 된 세포를 자극. 재건 기술 병 변 헌 또는 분리 ostechondral 이식을 사용 하 여 대체 합니다. 재생 기술 이용 손상 된 조직을^{1,2,3,,45,6 재구성 multipotent 세포 분화와 복제를 수} .

최근 몇 년 동안, 재생 기술 OLTs, 및 지방 조직 (줄기)^7,8 에서 파생 된 특히 중간 엽 줄기 세포의 치료에 대 한 수많은 생체 외에서 그리고 vivo에서 연구의 대상이 되고있다 ^{, 9}. 이러한 중간 엽 줄기 세포 전시 다른 조직;에서 고립 된 다른 multipotent 셀에 유사한 형태학 적 및 기능적 특성 그들은 또한 여러 가지로 분화 하는 능력 있고 다른 셀룰러 라인 생체 외에서 그리고 vivo에서모두^10,,1112,13. 이러한 세포에 관한 연구에 대 한 포커스는 주로 그들의 지역화, 사실 그들은 조직^13,14의 그램 당 5000 세포의 농도와 정상 체중의 30%로 10%에서 대표. 다른 한편으로, 이러한 셀의 사용을 제한 하는 요소는 실험실 절차 동안 처리 관련. 집계의 adipocytes, 콜라겐 섬유, 정상 혈관을 포함 하는 lipoaspirate A 타입, 그리고 문화 전에 혈 대상이 콜라겐 효소 처리 됩니다. 목표는 여기 microfractured 및 순화 된 지방 조직을 사용 하 여 탈 러 스의 osteochondral 장애의 치료에 대 한 프로토콜을 설명 하는 것입니다.

프로토콜

연구 기관 또는 국가 연구 위원회 그리고 1964 헬싱키 선언 및 최신 개정 또는 유사한 윤리 윤리 기준에 따라 관련 된 인간의 참가자 들은 모든 절차 수행 표준입니다.

1. 병력

1. 자세한 환자의 역사와 임상 시험을 시작 합니다.
   참고:는 OLT 해야 합니다 항상 될 의심 발목의 불안정성의 경우 붓기, 뻣 뻣 함, 통증과 공동 방해와 관련 된 반복적인된 염 좌와 함께. 또한, 많은 경우에 OLT 염증 또는 혈관 질환, 신경 병 또는 신경학 적 질환, 당뇨병 등 전신 질환의 역사와 관련 있을 수 있습니다. 약물 이나 치료에 영향을 미칠 수 있는 의료 문제를 사용 하 여 평가 하 고 고려 해야 합니다.

2. 임상 시험

1. 발목 또는 뒷 발 기형 orthostatic 위치에 환자를 평가 합니다. 운동 (ROM)의 근육 및 힘 줄 기능 및 발목 범위를 평가 합니다. 확산 부드러움 자주, 특히 최대 굴곡 및 확장, 중 이며 관절 관절의 수준에서 터치 영역을 발생 하는 것은 드물지 않다.
2. 부수적인 측면 발목 불안정성을 식별 하는 앞쪽 및 후부 서랍 시험을 수행 합니다.
3. 수술 전 상담 하는 동안 다음 임상 및 기능 점수 기록: 미국 정형 외과 발 & 발목 사회 (AOFAS) 발목과 뒷 다리-발 점수¹⁵, 시각적 아날로그 규모 (VAS) 통증 점수¹⁶및 12 항목 약식 건강 조사 (SF-12)¹⁷.

3. 방사능 평가

1. 발과 발목의 방사선 사진 베어링 양측 무게를 수행 합니다. 기존의 체중 베어링 anteroposterior (AP), 구멍과 발목의 측면 체중 베어링 조회 이것에 의하여 이루어져 있다. 중립 위치에 AP 장 붓 구멍을 수행 하는 탈 러 스의 더 나은 시각화에 대 한 내부 회전의 15도 함께 합니다.
   참고: OLT의 50%만 방사선 사진; 진단 될 수 있다 큰 병 변 일 경우 radiolucency로 둘러싸인 분리 된 뼈의 지역 지적된¹⁸수 있습니다.
2. 기존의 계산 된 단층 촬영-검사 (ct) 발목의 수행 합니다. CT 검사는 식별 또한 뼈 조각을 분리 시 정확한 위치와 크기의 병 변, 수 있습니다. CT의 약점은 연골의 상태를 표시 하는 기능. 이전 학문은 보여주었다 민감도 특이성 0.81와 0.99, 각각, 코네티컷^19,20OLTs를 감지.
3. 발목의 자기 공명 영상 (MRI)을 수행 합니다. MRI는 연골과 마찰의 뼈 평가에 기본적 이다. 또한, MRI 이온화 방사선을 포함 하지 않는 그리고 부드러운 조직의 더 나은 시각화 수 있습니다. 문학은 민감도 특이성 OLTs^21,22검출에서 96%의 보고 합니다.

4. 수술 방법

1. 수확 및 지방이 많은 직물의 처리
   1. 클라인 솔루션 준비: 9 g/L의 염 분의 1 L, 1 %lidocaine 50 mL, 1:1000 피 네 프 린의 1 mL, 10 mL의 8.4% 나트륨 중 탄산염, 그리고 triamcinolone 아 세토 니드의 10 mg/mL의 0.1 mL.
   2. 메스 칼 날 약 0.5 c m의 두 파라-배꼽 절 개를 만듭니다. 클라인 솔루션의 약 300 mL 18 G 바늘 (그림 1) 60 mL 주사기를 사용 하 여 절 개 통해 복 부의 피하 지방 조직에 주사.
   3. 40-45 mL 20 mL 주사기에 부착 하 고 처리 키트 (그림 2)에 13 G 무딘 정을 사용 하 여 줄기의 수확. 일반적으로, peri-배꼽 영역에서 수확 수행 합니다.
   4. 닫힌된 시스템에서 lipoaspirate의 100-130 mL를 삽입 합니다. 이 겨 내는 lipoaspirate 장치에 큰 필터를 첫 번째 클러스터 감소; 동시에 식 염 수 솔루션의 해당 수량 낭비 가방으로 종료합니다. 중요 한 역할은 기름, 혈액, 그리고 염 분 사이 임시 유제를 스테인리스 구슬에 의해 재생 됩니다. 염 분 해결책의 중력 카운터 흐름에 의해 기름 잔류물과 오염 된 혈액을 제거 합니다.
   5. (흐르는 솔루션 나타납니다 명확 하 고 lipoaspirate 노랑)이 세척 단계 후 염 분 유량을 멈추고 반전 장치 (최대 회색 모자), 두 번째 지방 클러스터 감소에 지도. 필터를 통해 두 번째 절단 6 각형, 아래에서 10 mL 주사기로 액체를 밀어 부동 지방 클러스터를 추진 하 여 감소를 얻을. 소자의 위 개통에 연결 10 mL 주사기로 최종 제품을 수집 합니다.
      참고: 지방 조직에 대 한 처리 키트 향상 표준 lipofilling 기술: 사실, 시스템은 폐쇄, 전체-침수, 저압 원통형 시스템 구성, pericytes의 큰 숫자를 포함 하는 유연 하 고 균일 한 제품을 얻기 위하여. 이 절차에는 온화한 기계적인 힘, 독점적으로 통해 지방 세포의 처리와 stromal 혈관 틈새의 무결성을 보존 수 있습니다. 과정 이상 외상 가능 이며 효소 처리 또는 확장 하지 않고 짧은 시간 (15-20 분)에서 사용할 수 있는 최종 제품을 만드는. 손상 되지 않은 vasculostromal 틈새 치유 과정을 도움이 됩니다.
   6. 일단은 줄기는 수확 하 고, 복 부에 압축 붕대를 적용 합니다.
2. 수술 및 지방 조직 분사
   1. 지 혈 대, 출혈 감소 및 더 나은 절경 시각화¹허용 허벅지의 수준에서 250 mmHg의 압력으로 척추 마 취 부정사 위치에 환자를 배치 합니다.
   2. Dermographic 펜으로 피부에 해부학 적 랜드마크를 표시 합니다. 랜드마크는 의원 성 상해를 피하기 위해 필수적입니다.
      다음 표 (그림 3).
      두 malleoli (측면 (LM)과 중간 (MM))
      이전 공동 선 (JL)과 dorsi-와 발바닥-굴곡 발목 관절의 식별
      tibialis 앞쪽 힘 줄 (문신)과 아 킬 레 스 힘 줄
      위대한 saphenous 정 맥, 중간 malleolus 앞두고 실행
      표면 비 골 신경 (SPN)
   3. 첫째, anteromedial 포털 그냥 중간 tibialis 앞쪽 힘 줄, 부드러운 자리와 동시에 수행 합니다. 이 포털을 접근 포털을 나타냅니다. 대부분의 경우, dorsiflexion에서 발목으로 우울증은 표시 하 고 만져 서.
      1. 블레이드, 단지 피부를 잘라내어 다음 무딘 절 개 하 여 캡슐을 구멍. Saphenous 신경 및 큰 saphenous 정 맥을 피하기 위해 주의. 신경은 약 7.4 m m 포털 측면 saphenous 정 맥 옆으로 포털에 위치 9 mm 이다. 이 두 개의 기본 보기 포털 중 하나를 구성합니다.
   4. 공동 라인 확인 anterolateral 포털, 중간 측면 발목을 놓고 신 근 digitorum 힘 측면.
      참고: anterolateral 포털을 수행할 때 중간 등 쪽 피부 신경 (표면 비 골 신경의 측면 지점);에 어떤 부상을 방지합니다 이러한 이유로, 절단 후, 피부 해야 합니다 뒤에 무딘 해 부.
   5. 크기와 위치를 평가 하기 위해 관절 연골을 검사 합니다. palpator와 연골의 품질과 상태를 평가 합니다. 탈 러 스의 Osteochondral 병 변은 일반적으로 posteromedially 또는 anterolaterally.
      1. 비록 일부 외과 더 큰 4mm arthroscope 사용 되며 관절의 앞쪽 쉬는 시간에 악기를 계속 30 ° 보기 각을 가진 광각 2.7 m m arthroscopes를 사용 하 여 절경 치료를 수행 합니다. 비-침략 적 공동 주의 기술과 하이퍼 발바닥의 굴곡에서 돔의 대부분을 사용할 수 있습니다.
      2. 사후 병 변 시 시경 공동을 산만 하 게 병 변 노출 하는 Hintermann 분산기 장소. Hintermann 분산기는 오프닝 레버 팔 이전에 위치 하 고 경골에서 뼈 medially 또는 옆으로, 병 변 측에 따르면 2 개의 K-철사에 적용. 측면 병 변의 경우 알아서 tibial 뼈, 비 골, 관절의 더 주의 달성 하기 위해 피하에 인접 K-와이어를 삽입.
   6. 병 변은 퀴 렛을 준비, 불안정 하 고 손상 된 연골을 제거, 석 회 질된 층 및 일반 모양 만들려면 괴 고 경화 뼈 포함 어깨 테두리가 있는 병 변. 이 단계에 대 한 표준 절경 퀴 렛 (그림 4)를 사용 합니다.
   7. 병 변의 안쪽에 외부에서 둥글게 microperforations를 수행 하는 마찰의 뼈에서 골 수 줄기 세포를 자극.
      1. 그들 사이 약 3 m m의 간격으로 구멍을 실시 합니다. Microfractures Chondral 선택을 사용 하 여 결함 (그림 5) 아래 건강 한 마찰의 뼈 유도.
         참고: 섬유 소 혈전의 형성에는 출혈 발생합니다. 혈액 응고 염증 캐스케이드 활성화를 통해 제품 출시 vasoactive 중재자, 성장 인자, cytokines. 이러한 요소는 병 변의 chondral 부분으로 중간 엽 줄기 세포의 마이그레이션 및 혈관 내 습을 자극 하 능력을가지고. 이 만능 세포는 섬유 아 세포, chondrocytes, 및 osteoblasts로 분화 하 고 병 변의 수리의 자극에 중요 한 역할을 자극 된다. Paracrine 관절 환경에서 성장 인자 세포 외 기질 형성 및 fibrocartilage의 생산을 촉진합니다. 같은 시간에 뼈 부분의 병 변 세포는 성숙한 뼈에 의해 점차적으로 대체 되는 미 성숙한 뼈 조직 생성.
   8. 포부와 공동 완전히 건조 될 때까지 면 스폰지를 사용 하 여 나머지 액체에 면도기를 사용 하 여 내부 관절 물 제거.
3. 지방 유래 줄기 세포 주입
   1. 이전 준비 단계 4.1.3에서 두 개의 포털 (anteromedial 또는 anterolateral) 중 하나를 사용 하 여 발목 관절에 지방 유래 줄기 세포의 5-7 mL를 주사.
   2. 지 혈 대를 놓습니다.

5. 수술 후 관리

1. 전체 방전에서 운영된 사지와 함께 15 일 동안 발목의 움직임을 피하십시오.
2. 수술 후, 15 일 전체 복구 및 모션의 범위에 도달할 때까지 발목의 능동 및 수동 움직임을 허용 합니다.
3. 30 일 수술 후 충전을 허용.

6. 임상 및 방사선 후속

1. 임상 방사선학 6의 그리고 12 달에, 그 후, 매년 환자를 평가 합니다. 후속 프로토콜 AOFAS 발목과 뒷 다리-발 점수, VAS 통증 점수, 및 SF-12 각 끝점^15,,1617에 구성 되어 있습니다. 방사선 검사는 MRI 및 CT 스캔 운영된 발목의 포함 되어 있습니다.

결과

1 월 2016 9 월 2016 년 사이 4 명의 환자 microfractured와 순화 된 지방 조직 탈 러 스의 osteochondral 병 변의 절경 치료를 받았다. 모든 환자에서 수술 후 6 개월 임상 개선을 보고. 예비 임상 결과 표 1에 보고 됩니다. 아니 합병증 보고 했다.

최근 몇 년 동안, 발 및 발목 pathologies의 치료를 위한 줄기의 사용 증가 했다. 2013 년...

토론

최근 몇 년 동안, 임상 및 전 임상 시험은 다른 근 골격 계 병 리를 치료 하는 줄기의 효과에 그들의 주의 집중 했다. 이 문서의 목표 연관 절경 microperforations microfractured 및 순화 된 지방 조직을 사용 하 여 탈 러 스의 osteochondral 장애의 치료에 대 한 프로토콜을 설명 하는. 프로토콜은 합병증의 고 위험으로 몇 가지 중요 한 단계를 포함 한다. 지방 채취 하는 동안 합병증 로컬 또는 전신 합병증으로 ?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
PROCESS KIT - PROCESSING KIT FOR FAT TISSUE	LIPOGEMS	LG PK 60	Lipogems Kit to obtain microfractured and purified ADSCs
HINTERMANN SPREADER	INTEGRA	119654	The spreader allow to access most of the talar dome, in particular in case of posterior lesion
CUP CURETTE	ARTHREX	AR-8655-02	To remove the damaged cartilage and necrotic and sclerotic bone
CHONDRAL PICK 30° TIP / 60° TIP	ARTHREX	AR-8655-05 AR-8655-06	To perfrom microperforation at the level of the lesion, stimulating bleeding from the subchondral bone
SHAVER	ARTHREX	AR-7300SR	To clean the joint and aspirate water