Ацинетобактер Визуализация биопленки с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM)

Начните с добавления 200 микролитров бактериального инокулюма в каждую лунку стерильного 96-луночного планшета, подготовленного для микроскопического анализа. Инкубируйте планшет при температуре 25 градусов Цельсия в течение 24 часов, прежде чем удалить надосадочную жидкость с помощью пипетки. Далее аккуратно добавьте в каждую лунку по 300 микролитров стерилизованной фильтром деионизированной воды.

Еще раз удалите надосадочную жидкость с помощью пипетки. В другой пробирке приготовьте разбавленную смесь SYTO 9 и йодида пропидия и стерилизованную фильтром деионизированную воду до соответствующих желаемых конечных концентраций. Затем добавьте по 200 микролитров смеси в каждую лунку и выдержите тарелку от 20 до 30 минут при комнатной температуре в темных условиях.

Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия показала, что образование биопленки значительно варьирует в зависимости от штаммов. Значительное количество биопленки было обнаружено у Acinetobacter junii, Acinetobacter baumannii и Acinetobacter ursingii с различной морфологией биопленки.