Приготовление фотоперестраиваемого гидрогеля Bioink

Начните приготовление гидрогелевых биочернил асептически внутри биобезопасного шкафа, предварительно приготовив 0,25 мг на миллилитр стокового раствора ПЭГ альфа-метакрилата в стерильных питательных средах для клеточных культур без FBS. Кроме того, с помощью 20-миллимолярного стерильного TCEP готовят 250-миллимолярные стоковые растворы DTT, деградируемого сшивающего агента MMP2 и пептида RGD. Наконец, приготовьте 15 весовых процентов исходного раствора ПЭО, используя дистиллированную воду.

Соедините необходимые количества приготовленных реагентных исходных растворов и низкосывороточных питательных сред клеточных культур с фибробластами в конической пробирке объемом 15 миллилитров. Тщательно перемешайте полученные биочернила с помощью пипетки прямого вытеснения, чтобы убедиться, что клетки едины. Убедитесь, что конечный раствор прекурсора имеет pH 6,2.

Извлеките печатающую головку из биопринтера, чтобы получить доступ к стеклянному шприцу. Чтобы загрузить биочернила в стеклянный шприц, снимите поршень шприца. Затем соберите биочернила из центрифужной пробирки с помощью отдельного шприца, установленного на игле длиной 1,5 дюйма 15 калибра с тупым концом.

Замените иглу 15-го калибра иглой 30-го калибра длиной 0,5 дюйма с тупым концом и переложите ее на стеклянный шприц, избегая образования пузырьков воздуха. Наконец, поместите стеклянный шприц внутрь печатающей головки и прикрепите компоненты печатающей головки, обеспечив надежную сборку для печати.