Иммуногистохимия личинок дрозофилы для визуализации микротрубочек

Удалите PBST и погрузите фиксированные параформальдегидом тушки личинок дрозофилы в блокатор на 40 минут при комнатной температуре. Замените блокатор 200 микролитрами первичного антитела, разведенного 0,2% PBST. Оставьте личинок инкубироваться при температуре четыре градуса Цельсия на ночь.

На следующий день промойте личинок 0,2%-ным PBST в течение 10 минут. Далее извлеките PBST из пробирки и добавьте 200 микролитров разведенного вторичного антитела. Инкубируйте его при температуре окружающей среды в течение 1,5 часов в темноте.

Введите ядерный краситель, такой как йодид TO-PRO R 3, в инкубационную пробирку на 30 минут, окрашивая микротрубочки в темноте. Наконец, смойте вторичное антитело и ядерный краситель 0,2% PBST в течение 10 минут.