Хирургическая процедура подготовки ортотопической мышиной модели глиобластомы

Для начала подготовьте мышь к операции и поместите ее на стереотаксическую рамку. Затем приподнимите кожу на черепе и зажмите ножницы между правым глазом и ухом, чтобы сделать разрез. Разрежьте по направлению к левой стороне черепа, следуя следам разреза, и удалите получившийся круглый кожный лоскут.

Лезвием скальпеля или микрокюреткой аккуратно поцарапайте поверхность черепа, чтобы удалить надкостницу. Используйте физиологический раствор и пылесос, чтобы очистить операционную область от мусора. Поцарапайте надкостницу, чтобы обеспечить лучшее сцепление с цианоакрилатным клеем и стоматологическим цементом.

Затем автоклавным карандашом отметьте положение краниального окна. Держите сверло в доминирующей руке, а шприц или щипцы — в недоминирующей руке. Нанесите на кальварию холодный физиологический раствор, чтобы предотвратить перегрев и сохранить операционный вид в чистоте.

Во время сверления расположите стеклянную крышку поверх черепа, чтобы убедиться, что она точно входит в окно черепа. После того, как удастся надавить на лоскут черепа, с помощью щипцов осторожно удалите фрагмент из операционного поля. При незначительном кровотечении используйте гемостатическую губку для местного применения ледяного физиологического раствора с легким нажимом, чтобы уменьшить кровопотерю.

Возьмите культивированные клетки глиомы С6 для имплантации. Аспирировать один микролитр клеточной суспензии в газонепроницаемый микролитровый шприц. Затем поместите шприц внутрь стереотаксической рамки.

Чтобы имплантировать клетки для двухфотонной визуализации, введите 0,5 микролитра клеточной суспензии на глубину 0,8 миллиметра в поверхностную область мозга. После инъекции втянуть иглу и выйти из мозговой ткани. Теперь переместите стержень головы и стеклянную крышку из спирта в физиологический раствор и используйте вакуумный наконечник или щипцы, чтобы переместить эти компоненты к месту операции.

Поместите стеклянную крышку внутрь краниального окна и нанесите небольшое количество цианоакрилатного клея. Удалите остатки клея на стеклянной крышке с помощью аппликатора с ватным наконечником или аккуратно соскребите их скальпелем. Закрепите стеклянную крышку в краниальном окне и приложите перекладину к голове.

Смешайте стоматологический цемент, расположите головной стержень и нанесите цемент на окружающую область. Очистите излишки цемента наконечником шприца, скальпелем или сверлом. После закрытия краниального окна проверьте, нет ли открытых участков черепа.