Диссекция мозга мыши для выделения микроглии

Начните с помещения изолированной ткани мозга мыши в 1 миллилитр буфера для пищеварения на мозг в отдельных чашках Петри на льду. Тщательно измельчите ткани мозга на мелкие кусочки с помощью чистого лезвия скальпеля. Используя пластиковую переводную пипетку с отрезанным кончиком, осторожно перенесите измельченные мозги в отдельные лунки внутри 24-луночной пластины на льду.

Накройте тарелку большим куском прозрачной гибкой пленки, закройте крышкой и выдерживайте на льду в течение 30 минут. Затем перелейте переваренный раствор мозга в отдельные 7-миллилитровые гомогенизаторы из ледяного стекла на льду, содержащие 5 миллилитров холодного буфера FACS. Аккуратно обработайте каждый мозг рассыпчатым пестиком до получения одноклеточной суспензии.

Мягко похлопайте тугим пестиком три-четыре раза, чтобы обеспечить одноклеточную суспензию, прежде чем переложить в 15-миллилитровые полипропиленовые пробирки.