1 Для начала перенесите опухолевую ткань2, погруженную в 25 миллилитров гиберната А 3 в стерилизованную стеклянную чашку Петри 4 под ламинарный шкаф. 5 С помощью микроскопа тщательно удалите 6 все некротизированные ткани. 7 Затем с помощью скальпеля 8 и тканевых щипцов рассеките кровеносные сосуды наружу.
9 Разрежьте опухолевую ткань на 10 кусочков объемом от одного до двух кубических сантиметров. 11 Переложите их в пластиковую чашку Петри 12, содержащую три миллилитра среды H-GPSA, 13 и поставьте чашку на лед. 14 Чтобы вручную обработать опухоль, перенесите кусочек опухоли 15 в свежую стеклянную чашку Петри.
16 С помощью двух скальпелей рассекают отрезок 17 на срезы по 0,5 миллилитра под микроскопом. 18 Чтобы механически обработать опухоль, сначала 19 расположите лезвие правильно. 20 Затем отрегулируйте толщину среза от 0,45 до 0,50 миллиметра, 21 и зафиксируйте ручку отпускания стола в положении пускового режима.
22 Разрежьте агаро-блок на двухсантиметровый цилиндр 23 и приклейте его к круглой пластиковой тарелке измельчителя. 24 С помощью скальпеля создайте ямку в цилиндре агаро 25 и поместите в нее опухолевую ткань. 26 Затем поместите пластиковый диск на монтажный диск 27 режущего стола и нажмите кнопку сброса 28, чтобы начать процесс измельчения.
29 После первого раунда поверните монтажный диск на 30 на 90 градусов, и повторите еще раз 31, чтобы разрезать ткань на прямоугольные кусочки. 32 Удалите пластиковый диск. 33 А затем с помощью тканевого шпателя 34 поверните только опухолевую ткань на 90 градусов.
35 Верните пластиковый диск на режущий стол 36 и нажмите кнопку сброса, чтобы продолжить резку. 37 Затем с помощью пятимиллилитровой пипетки 38 перенесите обработанный материал, 39 вместе со средой, в чашку Петри. 40 Поставьте блюдо сразу на лед.
