This work was supported by Interdisciplinary Centre for Clinical Research IZKF Aachen (junior research group to E.A.L.) within the faculty of Medicine at RWTH Aachen University. We are grateful Dr. Rusu and Ashley Christina Vourakis for critical review of the manuscript and Mrs. Roya Soltan for the professional help with immunohistochemistry staining.

ПРИМЕЧАНИЕ: Эксперименты, представленные в этой статье, выполняются соответственно Немецкий низким и руководящих принципов европейских уходу за животными. Животные разводятся в животных объекта Института лабораторных животных науки, Universiy больницы Аахен, Германия, под руководством профессора д-ра Р. Толбе и д-р А. Teubner (благосостояния офицерского животных). 1. Уход за животными <ol><li> Держите мышей в блоке специализированной помощи, уверяя надлежащий доступ к пище и специализированных ветеринарного контроля и лечения. Если животные будут перемещены или приобрести извне, пожалуйста, заверить одну неделю проживания перед прохождением процедуры. </li></ol> 2. Интубация <ol><li> Обезболить 8-10 недель самцов C57BL / 6 мышей дикого типа, 25-27 г с помощью внутрибрюшинного введения 100 мг / кг кетамина и 10 мг / кг ксилазина. Контроль за уровнем анестезии ног прижимных рефлексов. Поместите ветеринар мазь на глаз, чтобы предотвратить сухость во время процедуры. </li><lя&gt; Управление боли терапии бупренорфина 0,1 мг / кг веса тела подкожно перед началом хирургической процедуры, следуя указаниям по уходу за животными в вашей организации. </li><li> Убедитесь, поддержание стерильных условиях, чтобы избежать инфекции во время операции с помощью стерильных материалов и инструментов. </li><li> Поместите под наркозом мыши в лежачем положении на столе с подогревом хирургии. Удалить волосы с обеих вентральной области шеи и левой половине грудной клетки с помощью небольшого бритвы и дезинфицировать 70% спиртом до разреза. <ol><li> Выполнение небольшой средний разрез 0,5 см с использованием хирургических ножниц в центре шеи. Под кожу, пройти 2 жирных тел с стерильных щипцов изогнутых и визуализировать трахею под стереомикроскопа через прозрачность покрывающего мышцы. </li></ol></li><li> Представьте устно интубации канюли в трахее под видом с помощью стереомикроскопа (рис 1А). Различают металлический катетер беспересадочныйтьфу прозрачную ткань. И проверить, положение и расположение во время операции в любой момент (Фиг.1В). </li><li> Подключите канюли небольшого животного вентилятора и регулировать настройки вентиляции в соответствии производит руководящие принципы (дыхательный объем между 100-150 мкл и скорости дыхания между 100-150 в минуту). </li></ol> 3. Инфаркт миокарда Индукционная <ol><li> Выполните разрез кожи менее 0,5 см в середине линии между xyphoid и левой axila. Используйте пинцет, чтобы отделить мышечный слой из нижележащих ребер. </li><li> Выполнение небольшой разрез между ребрами с помощью небольшого ножницами до грудной полости не будет открыта 17. Для хронического миокарда, выполните разрез в 5 м межреберье (рис 1С) и / или для модели ишемии / реперфузии, в 4-м межреберье (рис 1D): для облегчения ряда подход снизу-го 2 и 3-й </suр&gt; межреберье, соответственно). </li><li> Поместите втягивающие в разрез, чтобы открыть грудной полости и визуализировать сердце. </li><li> Осторожно снимите перикарда, чтобы предотвратить чрезмерное фиброзные процессы. </li><li> Представьте левой нисходящей коронарной артерии (LAD) в качестве глубоко расположенным светло-красный судна. Если ЛАД не могут быть визуализированы, рассмотрим некоторые ориентиры для повышения воспроизводимости. <ol><li> Для модели хронического инфаркта, место лигатуры в середине вентральной стороне сердца (между ушной раковины и верхушки), имеющие в качестве ссылки вены, как показано на рисунке 1С. Привязать обе ветви артерии с использованием 0/7 шелковой нити, чтобы получить трансмурального переднего и заднего миокарда. Серый цвет указывает положение лигатуры и может быть повторена, если необходимо (рис 1С). </li><li> Для ишемии / реперфузии модели, поместите лигатуру под ушной раковины, на основной части LAD (Рис 1D). Лигратура находится за силиконовой трубки для защиты целостности судна. Серый цвет указывает на зоны инфаркта и должны появиться по всей сердца (рис 1D). Поместите временные швы на бок в период ишемии и увлажнить с помощью компресс, чтобы избежать ткани сушку. После ишемии, удалить силиконовую трубку и сократить шов с маленькими ножницами для визуализации реперфузии. </li></ol></li><li> Кроме анестетики и анальгетики, используемые в начале процедуры (шаги 2.1 и 2.2), использовать 0,5% изофлуран во время операции, чтобы обеспечить надлежащий комфорт животного, или следовать рекомендациям по уходу животное вашего учреждения. </li></ol> 4. Шов и восстановление <ol><li> Устранение остаточного воздуха из грудной клетки, заполнив теплой изотонического солевого раствора. </li><li> Закройте грудную клетку с 3 швами 0/6 (как показано на фиг.2А и 2В). Расположите медиальной швов под углом 90 °, чтобы обеспечить, какealed закрытие ребер, как показано на рисунке 2 (2А, В). </li><li> Закрыть мышечного слоя с 2 швами (рис 2С) и кожи с 3-4 швами 0/6 (рис 2D). Выполните эти швы отдельно, чтобы получить надлежащее окно для дальнейшего эхокардиографического измерения. </li><li> Отключите интубации канюли с вентилятором и позволяют спонтанное дыхание. Для последующей идентификации, отметьте мышкой, используя локальную систему (спросить благосостояния офицера животных от вашего учреждения). </li><li> Лягте мыши на левой стороне под красной лампой, пока он не проснется. Не оставляйте животное без присмотра, пока он не пришел в сознание достаточно. Не позволяйте животное, которое претерпела операцию, чтобы быть в компании других животных до полного восстановления. </li><li> Управление боли терапии бупренорфина 0,1 мг / кг массы тела, подкожно в течение следующих 3 дней, следуя указаниям по уходу за животными в вашей организации. </li&gt; </ol> 5. Анализ инфаркта миокарда <ol><li> Регулярно контролировать функцию сердца с помощью эхокардиографии (рис 3а): фракция выброса, фракции укорочения, сердечного выброса и размеров сердца. </li><li> Обезболить животных с помощью внутрибрюшинной инъекции 100 мг / кг кетамина и 10 мг / кг ксилазина. Подтвердите правильное обезболивания до операции из-за отсутствия рефлексов. </li><li> Откройте грудной полости и вырезать сердце, помещая его в стерильного раствора PBS, мойки широкой оставшейся крови. </li><li> При необходимости, собирают кровь непосредственно из сердца, избегая травм из infracted регионах, или после удаления сердца, из грудной полости. </li><li> После промывки, остановки сердца в diastola в насыщенном растворе KCl (стерильные фильтруется 3M KCl в PBS). Для гистологического анализа исправить сердце в 10% формалине и перейдите к шагу 5.7. </li><li> При необходимости, определения жизнеспособности автомобиляDiac клетки по Эванс-синий / трифенилолово тетразолий хлорида окрашивания (TTC). После восстановления лигатуры на начальном месте, заливать сердце с 200 мкл 1% -ный раствор синего Эванса с использованием аорты канюли и заморозить сердце в небольшой пластиковый пакет при -20 ° С, без промывки. <ol><li> Через 2 ч, выполнить 5 трансверсально слайдов с использованием острым скальпелем и инкубируют их в течение 10-15 мин в растворе ТТС при 37 ° С, как описано изготовлены. Fix слайды в течение 10 мин в 10% формалине и положить их между микроскопическими слайдами для дальнейшего анализа. </li><li> Встроить ткани сердца в парафин, путем размещения сердце на кончике, чтобы выполнить поперечное секционирование. Выполнение последовательного раздел 5 мкм. Соберите первые 20 разделов и отказаться от очередной 300 мкм. Продолжить протокол раздел до митрального клапана уровень не достигнут (3А, Б). Серийные срезы, 400 мкм друг от друга вдоль всей сердце собраны и могут быть окрашены Fили качественный и количественный анализ. </li></ol></li><li> Измерьте размер инфаркта с помощью один шаг Гомори в окрашивания 6-8. </li><li> Анализ ангиогенеза, содержание коллагена или воспалительных клеток набор в серийное разделе помощи обычной иммуногистологического окрашивание. </li></ol>

<ol>
	<li>Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+after+myocardial+infarction,+between+fantasy+and+reality:+the+role+of+chemokines.">Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).</li><li>Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+contribution+in+stem+cell+engraftment+into+the+infarcted+myocardium.">Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium.</a> Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).</li><li>Alexander, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repetitive+transplantation+of+different+cell+types+sequentially+improves+heart+function+after+infarction.">Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction.</a> J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+protective+and+detrimental+effects+of+endogenous+macrophage+migration-inhibitory+factor+mediated+by+CXCR2+in+a+mouse+model+of+myocardial+ischemia/reperfusion.">Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ccr1+deficiency+reduces+inflammatory+remodelling+and+preserves+left+ventricular+function+after+myocardial+infarction.">Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+monocyte+chemotactic+protein-1/chemokine+CC+motif+ligand-2+competitor+limiting+neointima+formation+and+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+in+mice.">A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double-edged+role+of+the+CXCL12/CXCR4+axis+in+experimental+myocardial+infarction.">Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).</li><li>Oral, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXC+chemokine+KC+fails+to+induce+neutrophil+infiltration+and+neoangiogenesis+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction.</a> J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).</li><li>Projahn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+intramyocardial+release+of+engineered+chemokines+by+biodegradable+hydrogels+as+a+treatment+approach+of+myocardial+infarction.">Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+into+the+mechanism+of+cell-based+therapy+after+chronic+myocardial+infarction.">Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction.</a> Discoveries. 1 (2), e9 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+SDF-1+alpha+on+Endogenous+Mobilized+and+Transplanted+Stem+Cells+in+Regeneration+after+Myocardial+Infarction.">Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction.</a> Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).</li><li>Zaragoza, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiovascular+diseases.">Animal models of cardiovascular diseases.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 497841 (2011).</li><li>Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+therapeutic+approaches+to+reduce+acute+atherosclerotic+complications.">Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications.</a> Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).</li><li>Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines:+inflammatory+mediators+of+atherosclerosis.">Chemokines: inflammatory mediators of atherosclerosis.</a> Arch Physiol Biochem. 112 (4-5), 229-238 (2006).</li><li>Kolk, M. V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-Ligation:+A+Murine+Model+of+Myocardial+Infarction.">LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction.</a> J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).</li><li>Ryu, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+bone+marrow+mononuclear+cells+using+injectable+fibrin+matrix+enhances+neovascularization+in+infarcted+myocardium.">Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium.</a> Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).</li><li>Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-based+Therapy+for+Heart+Failure+in+Rat:+Double+Thoracotomy+for+Myocardial+Infarction+and+Epicardial+Implantation+of+Cells+and+Biomatrix.">Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix.</a> J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Model+of+Myocardial+Ischemia-reperfusion+Injury+through+Ligation+of+the+Left+Anterior+Descending+Artery.">A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery.</a> J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Во время процедуры, есть некоторые критические точки, чтобы отметить: интубации, открывая грудной полости и ЛАД лигатуры. Первый критический шаг интубации животного перед experiements. Многие группы используют вертикальную поддержку фиксации мыши и источник света, чтобы вставить канюли непосредственно в трахею. Этот метод имеет неопределенность в отношении правильной вставки канюли в трахею и наиболее склонны к отказу от начинающих. Создание небольшой разрез, положение канюли может контролироваться в течение всего маневра, таким образом уменьшая скорость по умолчанию. Кроме того, трахеотомия превзойден, тем самым уменьшая осложнений и сократить время операции. Следующим важнейшим шагом является открытие грудной полости. Средний стернотомия представляет собой маневр с высоким риском задерживает восстановление животных. Боковая левая Разрез подразумевая резку 2-3 ребер 15 </SUP&gt;, приводит к недостаточной восстановления и увеличения смертности. Мы использовали в модели небольшой, дискретный разрез между ребрами, которые предлагают минимальную нагрузку. Животные восстановить очень быстро после операции и не представляют дефекты или нарушается заживление. Ниже между реберной пространство берется в качестве точки отсчета. Учитывая это, собственно, и дифференцированный доступ к лигатуры место для хронических и ишемии / реперфузии модели, не вызывает серьезных проблем. Сама лигатура представляет собой наиболее важный шаг. Левой нисходящей артерии трудно быть визуализированы, и часто требуется, чтобы быть связанным без вида. Таким образом, некоторые анатомические ориентиры указаны, чтобы помочь хирургу выполнять правильный перевязка. Для хронической модели инфаркта, лигатуру помещают в середине вентральной стороне сердца, между ушной раковиной и вершины, над окончанием основной передней вены (фиг.2В). Эффективность может быть Controзаполненной визуализируя появление серого цвета в пострадавших районах. Если зоны инфаркта появляется передний и не включает в себя заднюю стенку, новый шов может быть помещен слева от первого шва. Основной корень ЛАД всегда видна под ушной раковины 18, и, следовательно, не представляет серьезные проблемы в обнаружении этой части. Тем не менее, ушная раковина представляет серьезную опасность кровотечения и должен быть осторожно. Процедура ограничивается наличием соответствующего оборудования. Вентилятор и соответствующая система анестезии для мелких животных являются дорогостоящими и требуют подключения к газовой и вентиляции помещения. Кроме того, тщательное наблюдение за животными необходимо в первую неделю после процедуры для выявления возможное клиническое. Чтобы исследовать функцию сердца во время эксперимента с высоким разрешением УЗИ, комплекс Langendorf перфузии-системы или небольшие интравентрикулярные измерения катетер требуется, инвolving высокие затраты и дополнительные знания. Учитывая инфаркта миокарда, нет альтернативных методов, доступных для воспроизведения сложность событий в пробирке. В зависимости от точки интереса, экс естественных условиях перфузии изолированного сердца в системе Лангендорфа предоставляет информацию о сократительной функции сердца, и жизнеспособности миокарда в ответ на различные раздражители или наркотиков. Тем не менее, это исключает все помехи компонентов крови и иммунной системы, и это не указывается для длинных исследований ремоделирования и исцеления после инфаркта миокарда. После выполнения процедуры инфаркт миокарда, все остальные функциональный анализ может быть осуществлен, например, измерений внутрижелудочкового давления, ультразвука (ультразвуковой небольшое животное систем) или изолированного сердца Лангендорфа-перфузии. Кроме того, все биологические и молекулярно-анализ может быть проведен для выявления клеток, белки, мРНК микроРНК, GENES или других биомаркеров, которые могут быть использованы в качестве терапевтических мишеней для разработки новых стратегий лечения инфаркта миокарда.

Инфаркт миокарда является одним из основных причин смерти в промышленно развитых странах. Несмотря на очевидный прогресс диагностических и терапевтических подходов, сердечно-сосудистые заболевания по-прежнему основной причиной смертности. Учитывая улучшение продолжительности жизни и жизни рисков, связанных с, постоянный рост заболеваемости сердечно-сосудистых заболеваний, как ожидается, в будущем. Таким образом, существует настоятельная необходимость в создании и проверить новые подходы для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. Информация о клинических исследованиях страдают от ее ограничений, эти исследования, как правило, недостаточно, чтобы объяснить и понять механизмы на молекулярном уровне, будучи не в состоянии обеспечить решение этих основных проблем со здоровьем. Кроме того, базовые исследования было ограничено из-за сложности и трудности, чтобы воспроизвести механизмы сердечно-сосудистых заболеваний в лаборатории. Поэтому, чтобы увеличить наши знания о патофизиологии сердечнососудистые заболевания, важно, чтобы проверить животных моделей 1,2. Тем не менее, чтобы идентифицировать все каскады молекулярных событий, участвующих в заживлении после инфаркта миокарда, анализа в различные моменты времени необходимо, в результате чего большое количество животных экспериментов. Инфаркт миокарда эксперименты часто выполняются с помощью животных моделей. Стимулирование инфаркт миокарда у мелких животных 3-11 является наиболее подходящим и эффективным модель, используемая для расследования клеточные и молекулярные события, чем больших моделей животных. Кроме того, никакие другие виды не представляет наличие трансгенных или нокаутных мышей штаммов, как 12. Эти мышиные модели весьма полезны в других заболеваний, в том числе сердечно-сосудистых патологий (например, атеросклероза, рестеноза стента в) 13,14. Кроме того, низкий период беременности и большое количество потомков право мышиных моделей как наиболее привлекательную систему для изучения молекулярных механизмов инфаркта инфаrction 12. Тем не менее, размер сердца у мышей ожидает высокую точность манипуляций при микрохирургии. Обучение таких квалифицированных и опытных кадров хирургия времени и трудоемкий процесс. Таким образом, мы здесь, представить подробную процедуру микрохирургии, в том числе советы и уловки, чтобы направлять коллаборационистов даже со средним квалификации, такие как студентов и техников для выполнения сложной миокарда модель миокарда у мышей. Первоначально интубации выполняется посредством короткого канюли без использования трахеотомии. Грудной разрез расположен в межреберной области, избежать травм ребер или / и окружающие ткани. Этот подпункт шаг имеет большое значение для обеспечения быстрого восстановления и исцеления 15. Лигатуры сделал дифференциал для хронической ишемии и ишемии / реперфузии моделей, для высокой выживаемости при сохранении значительных размеров инфаркта. Наш опыт показывает, THAт с помощью шелковой нити обеспечивает более высокий воспроизводимость по сравнению с крио-травмы 16. В заключение, способ, описанный здесь, применима как в хронической ишемии и моделей ишемии / реперфузии в мелких животных. Советы и приемы, представленные в этой процедуре, предназначены для того, чтобы персонал с низкой или даже средней квалификации, чтобы применять его в небольших моделях животных.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:71px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:71px;">Olympus</td>
			<td style="width:119px;">SZ/X9</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Mouse ventilator</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">730043</td>
			<td style="width:167px;">Model Minient 845</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:216px;">Dual Anesthesia System (Tabletop Version)</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8&#34; x 11&#34; footprint.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Intubation cannula</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">732737</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Forceps</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9119700</td>
			<td style="width:167px;">standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9146011</td>
			<td style="width:167px;">straight</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Vannas scissor</td>
			<td style="width:71px;">Aesculap, Germany</td>
			<td style="width:119px;">OC 498 R</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Retractors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820010</td>
			<td>2.5mm wide</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Retractors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820011</td>
			<td>5mm wide</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wire handles</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820005</td>
			<td>&#160;10cm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wire handles</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820006</td>
			<td>&#160;14cm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketamine 10%</td>
			<td style="width:71px;">CEVA, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Xylazine 2%</td>
			<td style="width:71px;">Medistar, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bepanthene eye and nose cream</td>
			<td style="width:71px;">Bayer, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="105" rowspan="3" style="height:105px;width:216px;">Silicon tube</td>
			<td rowspan="3" style="width:71px;">IFK Isofluor, Germany</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">custommade&#160; product</td>
			<td style="width:167px;">diameter 500&#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;">section thickness 100 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;">polytetrafluorethylene catheter</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">PROLENE Suture 6/0&#160;</td>
			<td style="width:71px;">ETHICON</td>
			<td style="width:119px;">8707H</td>
			<td style="width:167px;">polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13mm, 3/8 Circle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">7/0 Silk</td>
			<td style="width:71px;">Seraflex</td>
			<td style="width:119px;">IC 1005171Z</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ultrasound&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Vevo, Canada</td>
			<td style="width:119px;">770 Vevo</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice

Инфаркт миокарда остается основной причиной смерти в западных странах, несмотря на значительный прогресс в области развития стента в последние десятилетия. Для выяснения основных механизмов и разработке новых терапевтических стратегий, наличие действительных животных моделях являются обязательными. Так как нам нужно новое понимание pathomechanisms сердечно-сосудистых заболеваний в естественных условиях в условиях борьбы с инфарктом миокарда, действия животной модели является важным аспектом. Тем не менее, защита животных весьма актуальны в этом контексте. Таким образом, мы устанавливаем минимально инвазивной и простую модель инфаркта миокарда у мышей, которая гарантирует высокую воспроизводимость и выживаемость животных. Таким образом, это модели соответствует требованиям принципа 3R (Замена, изысканности и сокращения) для экспериментов на животных и обеспечить научную информацию, необходимую для дальнейшей разработки терапевтических стратегий для cardiovascular заболевания.

Процедура инфаркт миокарда происходит в течение 25-30 мин и показывает смертность на 10%. После операции у мышей отойти от анестезии в течение следующих 15 мин. Нет физического обесценения не наблюдалось эксплуатируемых мыши. Тем не менее, есть высокий риск разрыва сердца через неделю после пост-хронической инфаркта миокарда, если ремонт процессы нарушаются во время воспалительной фазы. Так сердце способно существенно изменить свои размеры во время накачки, важно, чтобы все собранные сердца должен быть остановлен в таком же положении, например, в diastola. Это может быть достигнуто путем перфузии сердца насыщенным раствором KCl. Увеличение внеклеточной концентрации блоки K + ионных насосов, снижает мембранный потенциал покоя сердечных клеток, в результате чего диастолического ареста сердечной деятельности. Область миокарда можно увидеть в ультразвукового исследования (Фиг.3А, нижняя панель). По сравнению снормальный миокард, ишемическая регионы появляются тонкие и гипокинетический (рис 3а, верхняя панель). В зависимости от используемой модели, размер миокарда будет отличаться. Модель хронического миокарда вызывает круговую, трансмурального инфаркта апекса (фиг.3В), в то время как при ишемии / реперфузии вызывает тонкий, среднего стенку и по всей сердца (рис 3C). Есть много методов, чтобы определить размер инфаркта. Если цель заключается в анализе прямое влияние на сердечную жизнеспособности, Эванс-синий / ТТК окрашивания 18 указывается быть выполнены, по крайней мере 2 часа после реперфузии, чтобы быть в состоянии видеть любые изменения в миокарде. Разделы могут быть проанализированы немедленно (рисунок 3B, средняя панель) после окрашивания или могут быть между стеклами в формалине в течение 2-3 дней (рис 3C, средняя панель). Синяя область представляет собой здорового миокарда, не влияет ишемии. Красная зона представляет собой жизнеспособного миокарда внутри йе ишемическая площадь (миокард риск), и белая область представляет собой мертвую ткань. Как правило, размер инфаркта выражают в виде процентов от зоны риска. Зрелая шрам в результате после реконструкции процессов может быть легко измерить с помощью immunohistolgy один шаг окрашивание Гомори в. Синие окрашенных инфаркта и красные пятнами здоровые участки желудочка (3В и С, правая панели) определяются в первом разделе из каждого уровня до митрального клапана. Чтобы избежать изменения за счет связывания LAD на разных уровнях, от всего миокарда разделе рассматривается и выражали в процентах от общего объема левого желудочка. Объем инфаркта 15-20% в хронической модели инфаркта и 10-15% после ишемии / реперфузии модели может быть достигнуто. Кроме того, модель хронического миокарда будет индуцировать акцентировал дилатацию, не наблюдается в ишемической реперфузии / модели (3В и С Рогт панель). Обычные методики окрашивания могут быть использованы, например: CD31 окрашивание, используемого для выявления ангиогенеза (красный, рис 4а) или гладкой мышцы окрашивания актина, чтобы определить, миофибробласты (зеленые, 4Б). Двойное окрашивание флуоресценции можно также применять для идентификации различных молекул-мишеней в зоне инфаркта, так как отсутствие кардиомиоцитов не дает автоматического иммунофлюоресценции (фиг.4С). <img alt="Фигура 1" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig1.jpg" /> Фигура 1: Медиальной разрез и введение канюли интубации (A). Stereomicroscopic визуализация металлической канюли через прозрачность ткани (B). В кольца трахеи (синие стрелки) и канюли (черная стрелка), указаны. Межреберная разрез для хронического инфаркта месдель и вязь ЛАД (С). Лигатура находится в середине сердца (между предсердием и вершиной, черный в нижней панели), используя в качестве ссылки конец вены (схема синим, нижняя панель). Обе ветви артерии должны быть связаны (красный нижней панели). Серый цвет указывает области инфаркта и, кажется, в нижней половине части сердца (правый нижний панели). Вязь для модели ишемии / реперфузии производится по ушной раковине, связывание основного тела ЛАД (красный в нижней панели) в течение силиконовой трубки (правая сторона) (D). Серый цвет указывает на infracted область, которая присутствует на всей сердце (справа внизу). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> <img alt="Рисунок 2" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig2.jpg" /> Рисунок 2: </strOng&gt; ребрами шовные уплотнения грудной разрез, если медиальной швы расположены под углом 90 ° в обоих хронической (А) и при ишемии / реперфузии модели (B, слева). В естественных изображений ребер шва (С, левая панель ), мышечная шов (С, средняя панель) и шов кожи (С, правая панель). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> <img alt="Рисунок 3" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig3.jpg" /> Рисунок 3: Эхокардиографические изображения. Изображения нормальной (А, верхняя панель) и инфарктом областях (A, нижняя панель), которые приобретены в длинной оси (продольные, оставленные панели) или в короткой оси (поперечной, правая панели) .. миокарда индуцированных хроническим лигатуры(Б) и от одного часа ишемии с последующей реперфузией (C). Evans Blue / Окрашивание ТТК позволяет идентифицировать перфузии (синий) / Non-перфузии зоны, а также жизнеспособным (красный) / мертвых (белый) миокарда (B, C, средний панелей). Один шаг окрашивание Гомори позволяет выявить инфарктом областях (синий), и отличает их от обычных регионах (красный) (B, C, правая панели). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> <img alt="Рисунок 4" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig4.jpg" /> Рисунок 4: Различные окрашивание может быть выполнена в infracted области, таких как CD31, описанного в нео-ангиогенеза (А, красный, простые стрелки), или гладкой актин для миофибробластами (B, GReen, простые стрелки), а также двойного окрашивания (С, CD31-красный / актин гладких мышц-зеленый), контрастно DAPI для ядер (синий). Миофибробласты можно легко отличить от гладких мышечных клеток из малых или больших артерий, которые всегда сопровождаются эндотелиальной слоя (С, стрелки). Двойные стрелки указывают аутофлюоресценция эритроцитов. Масштаб бары 50 мкм.

Watch this Scientific Journal Video about Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice at JoVE.com

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Минимально инвазивная хирургическая процедура индукции инфаркта миокарда у мышей

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

minimal-invasive-surgical-procedure-inducing-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

27.2K Views.  RWTH Aachen University, Germany. A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Video: Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Острого инфаркта миокарда у крыс

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Индукции инфаркта миокарда у взрослых данио рерио использование Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

МРТ и ПЭТ в мыши модели инфаркта миокарда

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Инфаркт миокарда и функциональная оценка результат в Свиней

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Первичная оценка Результат в Pig модели острого инфаркта миокарда

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Инфаркт миокарда у новорожденных мышей, Модель регенерации сердца

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Анализ реального времени давления объем острого инфаркта миокарда у мышей

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Криотравма модель для изучения инфаркта миокарда в мыши

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Полумапримальная инвазивная методика для индуцирования инфаркта миокарда у крыс и оценка сердечной функции изолированной рабочей системой сердца

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...

A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI remodeling and evaluation of novel therapeutics. Different methods (e.g., isoproterenol treatment, cryoinjury, coronary artery ligation, etc.) have been used to induce MI. Compared with isoproterenol treatment and cryoinjury, coronary artery ligation may better reflect the ischemic response and chronic remodeling after MI. However, traditional methods for coronary ligation in mice are technically challenging. The current study describes a simple and efficient process for induction of MI in mice with readily available materials. The mouse chest skin was cut open under stable anesthesia. The heart was immediately externalized through the intercostal space after blunt separation of the pectoralis major and pectoralis minor. The left anterior descending branch (LAD) was ligated with a 6-0 suture 3 mm from its origin. Following LAD ligation, staining with 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) indicated successful induction of MI and temporal changes of post-MI scar size. Meanwhile, survival analysis results showed overt mortality within 7 days after MI, mainly due to cardiac rupture. Moreover, post-MI echocardiographic assessment demonstrated successful induction of contractile dysfunction and ventricular remodeling. Once mastered, an MI model can be established in mice within 2-3 min with readily available materials.

Under adequate anesthesia, the mouse heart was externalized through the intercostal space, and myocardial infarction was successfully induced by ligating the left anterior descending artery (LAD) using materials readily available in most laboratories.

Модифицированный простой метод индукции инфаркта миокарда у мышей

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI ...