Ультразвуковое измерение высокого разрешения широко используется для измерения размеров аорты у мышей. Этот протокол содержит практическое руководство по применению этого механизма. Этот протокол облегчает приобретение воспроизводимых и точных двухмерных измерений диаметра грудных и брюшных аорт у мышей.
Демонстрация процедуры будет д-р Hasashi Савада, докторант, и Джессика Моррлеген ученый-исследователь, как в Университете Кентукки. Перед началом процедуры используйте ватный тампон для применения расширитеонного крема в области визуализации обезболивающей мыши. Через минуту аккуратно удалите все сливки и волосы и промойте обименую кожу теплой водой.
После вытирания кожи сухой, чтобы полностью удалить крем, поместите точку ультразвукового геля на каждый из четырех медных приводит на платформе. Лента каждой лапы площадку на каждый свинец для получения показаний электрокардиограммы. И убедитесь, что пульс составляет от 450 до 450 ударов в минуту.
Нанесите предварительно разогретый ультразвуковой гель на место изображения и прикрепите зонд к держателю. Затем поверните платформу для оптимального сканирования и опустите зонд до тех пор, пока он не соеясируется с ультразвуковым гелем. Чтобы изображение грудной аорты, наклоните платформу вниз к левой стороне мыши и поместите зонд на правый край грудины мыши.
Ориентация эталонного маркера на зонде caudally. Переключитесь на цветовой доплер на грудной аорте, чтобы подтвердить кровоток. И отрегулируйте угол сцены и зонда, чтобы четко визуализировать аорту.
Используя ручки для глубины и ширины изображения, обрезать ультразвуковое изображение, чтобы увеличить частоту кадров и изменить фокусную глубину на спинной стороне восходящей аорты, используя ручку для фокусной глубины. Пройдите проверку параметров ультразвука, указанных в таблице, и используйте ручку стадии X и Y axis, чтобы аккуратно переместить зонд, чтобы захватить продольное изображение аорты с самым большим возможным диаметром. Чтобы изображение брюшной аорты, поместите зонд поперечно чуть ниже грудины и ксифоид процесса со эталонным маркером на зонде перед правой стороны мыши.
Брюшная аорта должна быть расположена рядом с нижней полой вены, и или портальной вены. Визуализировать брюшную аорту с цветовой допер, чтобы подтвердить пульсирующий поток и обрезать ультразвуковое изображение, чтобы увеличить частоту кадров. Измените фокусную глубину на заднюю стенку брюшной аорты и переместите зонд caudally, чтобы визуализировать точки ветви целиакии и превосходных мезентерических артерий.
Затем используйте правую почечную артерию в качестве ориентира и захватить синусовую петлю области интереса, показывая максимальную расширение брюшной аорты. После того, как все изображения были захвачены, удалены ультразвуковой гель, промыть область изображения теплой водой, и аккуратно протрите мышь сухой. Верните мышь в клетку на грелке и очистите ультразвуковой аппарат, зонд и платформу мягкой тканью и дезинфицирующими салфетками.
Затем загрузите все файлы, собранные во время сканирования, и выключите ультразвуковой аппарат. На этом репрезентативном ультразвуковом снимке неаневризмальной проксимальной грудной аорты можно наблюдать восходящую аорту, расположенную рядом с легочной артерией, и образует изогнутую трубку с тремя ветвями в области арки. Иннотумная артерия, левая общая сонная артерия и левая подклавианская артерия.
В этом репрезентативном ультразвуковом изображении неаневризмальной брюшной аорты, брюшная аорта обнаруживается спинно нижней полой вены. Здесь показаны репрезентативные изображения аневризм грудной и брюшной аорты. Для измерения аорты пазухи и восходящих диаметров аорты, зеленая линия используется для стандартизации аорты пазухи и восходящего диаметра аорты, соответственно.
Линии могут быть нарисованы перпендикулярно зеленой линии между двумя внутренними краями люмена в аортальной пазухе и максимальным восходящим диаметром аорты. Для измерения брюшной аорты нарисуйте линию через самый большой светящийся диаметр, от внутреннего края до внутреннего края люмена сосуда, и проследите внутренний край аортального люмена для светимой области. Светящиеся диаметры грудной и брюшной аорты отличаются между систорией и диастолом.
Сердечный цикл также следует учитывать для точных измерений. В этом репрезентативном экспериментальном исследовании не было никакой серьезной разницы в измеренных диаметрах восходящей аорты между ультразвуком и изображениями ex vivo. Этот ультразвуковой метод позволяет получить воспроизводимые и точные результаты, так как в этом эксперименте не наблюдалось вариативности между аортическими измерениями, сделанными двумя независимыми наблюдателями, и сеансами измерения.
Корректировка параметров зонда и сцены являются важными шагами для надежной и воспроизводимой аорты. Шаги анализа данных также важны для точного измерения аорты.