Le misurazioni ecografiche ad alta risoluzione sono state ampiamente utilizzate per misurare le dimensioni aortiche nei topi. Questo protocollo fornisce una guida pratica all'applicazione di questa modalità. Questo protocollo facilita l'acquisizione di misurazioni bidimensionali riproducibili e accurate del diametro delle aorta toraciche e addominali nei topi.
A dimostrare la procedura saranno il Dr.Hasashi Sawada, uno studioso post-dottorato, e Jessica Morrleghen una ricercatrice, entrambe presso l'Università del Kentucky. Prima di iniziare la procedura, utilizzare un batuffolo di cotone per applicare la crema dilatoria all'area di imaging del topo anestetizzato. Dopo un minuto, rimuovere delicatamente tutta la crema e i capelli e sciacquare la pelle esposta con acqua tiepida.
Dopo aver asciugato la pelle per rimuovere completamente la crema, posizionare un punto di gel ad ultrasuoni su ciascuno dei quattro cavi di rame sulla piattaforma. Nastro ogni paw pad su ogni piombo per ottenere letture di elettrocardiogramma. E verificare che la frequenza cardiaca sia compresa tra 450 e 450 battiti al minuto.
Applicare il gel ad ultrasuoni preri riscaldato sul sito di imaging e attaccare la sonda al supporto. Quindi ruotare la piattaforma per una scansione ottimale e abbassare la sonda fino a quando non è a contatto con il gel ultrasonico. Per immagine dell'aorta toracica, inclinare la piattaforma verso il lato sinistro del mouse e posizionare la sonda sul bordo destro dello sterno del mouse.
Orientare il marcatore di riferimento sulla sonda caudally. Passare al doppler di colore sull'aorta toracica per confermare il flusso sanguigno. E regolare lo stadio e l'angolo della sonda per visualizzare chiaramente l'aorta.
Utilizzando le manopole per la profondità e la larghezza dell'immagine, ritagliare l'immagine ad ultrasuoni per aumentare la frequenza dei fotogrammi e modificare la profondità focale sul lato dorsale dell'aorta ascendente, utilizzando la manopola per la profondità focale. Verificare i parametri ad ultrasuoni come indicato nella tabella e utilizzare la manopola dello stadio dell'asse X e Y per spostare delicatamente la sonda, per catturare l'immagine aortica longitudinale con il diametro più grande possibile. Per immagine dell'aorta addominale, posizionare la sonda trasversalmente appena sotto lo sterno e il processo xifoide con il marcatore di riferimento sulla sonda rivolta verso il lato destro del mouse.
L'aorta addominale dovrebbe essere posizionata accanto alla vena cava inferiore e o alla vena porta. Visualizza l'aorta addominale con il doper a colori per confermare il flusso pulsatile e ritagliare l'immagine ad ultrasuoni per aumentare la frequenza fotogrammi. Cambiare la profondità focale sulla parete posteriore dell'aorta addominale e spostare la sonda caudally per visualizzare i punti di diramazione delle arterie mesenteriche celiache e superiori.
Quindi usa l'arteria renale destra come punto di riferimento e cattura un anello seno della regione di interesse, mostrando la massima dilatazione nell'aorta addominale. Dopo che tutte le immagini sono state catturate, rimosso il gel ultrasonico, risciacquare l'area di imaging con acqua tiepida e asciugare delicatamente il mouse. Riportare il mouse nella gabbia sul tappetino riscaldante e pulire la macchina ad ultrasuoni, la sonda e la piattaforma con un panno morbido e salviette disinfettanti.
Quindi scaricare tutti i file raccolti durante la scansione e spegnere la macchina ad ultrasuoni. In questa immagine ecografica rappresentativa di un'aorta toracica prossimale non aneurismatica, l'aorta ascendente può essere osservata situata vicino all'arteria polmonare e forma un tubo curvo con tre rami nella regione dell'arco. L'arteria innominata, l'arteria carotide comune sinistra e l'arteria succlavia sinistra.
In questa immagine ecografica rappresentativa dell'aorta addominale non aneurismaca, l'aorta addominale viene rilevata dorsalmente alla vena cava inferiore. Qui vengono mostrate immagini rappresentative di aneurismi aortici toracici e addominali. Per la misurazione del seno aortico e dei diametri aortici ascendenti, la linea verde viene utilizzata per standardizzare rispettivamente il seno aortico e il diametro aortico ascendente.
Le linee possono quindi essere disegnate perpendicolarmente alla linea verde tra i due bordi interni del lume nel seno aortico e il diametro aortico ascendente massimo. Per la misurazione dell'aorta addominale, tracciare una linea attraverso il diametro luminale più grande, dal bordo interno al bordo interno del lume del vaso, e tracciare il bordo interno del lume aortico per l'area luminare. I diametri luminali dell'aorta toracico e addominale sono diversi tra sistole e diastole.
Il ciclo cardiaco deve anche essere considerato per misurazioni accurate. In questo studio pilota rappresentativo, non c'era alcuna differenza importante nei diametri misurati dell'aorta ascendente tra l'ecografia e le immagini ex vivo. Questa tecnica ad ultrasuoni consente l'acquisizione di risultati riproducibili e accurati in quanto in questo esperimento non sono state osservate variabilità inter o intra-osservatori tra le misurazioni aortiche effettuate da due osservatori indipendenti e sessioni di misurazione.
La regolazione delle impostazioni della sonda e dello stadio sono passaggi importanti per un imaging aortico affidabile e riproducibile. Le fasi di analisi dei dati sono importanti anche per una misurazione aortica accurata.
