Эта выживаемая процедура биопсии печени у мышей с безалкогольным стеатогепатитом, или NASH, позволяет как исключение животных, которые не имеют NASH и точное измерение реакции на вмешательства. Эта процедура тесно имитирует дизайн клинических испытаний для исследований NASH, которые сравнивают пост-против предварительной патологии печени и позволяет более точную оценку эффективности препарата. Разоблачение доли печени может быть сложной задачей на первый взгляд.
Практика подвергая ткани пальцем или хлопка наконечником аппликатора сначала, чтобы найти наиболее подходящий для вас. После подтверждения отсутствия реакции на щепотку ноша, сделать один-два сантиметра, продольный разрез брюшной кожи немедленно caudal к процессу xiphoid и слегка в левую сторону обезболивающей мыши. Используйте тибры и ножницы, чтобы притупить вскрыть кожу до тех пор, пока брюшная стенка не будет выставлена и печень не будет визуализирована под мышечной тканью.
Используя стерильный скальпель лезвие, сделать один-два сантиметра разрез в брюшной стенке, чтобы разоблачить левую лобную долей печени, и место стерильный ватный тампон под левой боковой доли, чтобы аккуратно извлечь часть подвергаться через разрез. Поместите стерильный солевой пропитанный кусок марли под открытые доли, и использовать стерильные ножницы, чтобы вырезать от 30 до 50 миллиграмм, клиновидный кусок ткани из извлеченной печени. Вырезать кусок абсорбируемой желатин сжатой губкой похож по размеру на клин кусок печени, и использовать стерильные типсы, чтобы вставить губку в разрезную часть печени.
Держите губку на месте с типсами, пока желатин не прилипет к поверхности печени и гемостаз достигается до размещения биопсии печени в соответствующий контейнер для его вниз по течению анализа. Аккуратно верните печень в брюшную полость, заботясь о том, чтобы не беспокоить губку, и, начиная и заканчивая полным квадратным узлом, шов брюшной стенки с 5-0 покрытыми абсорбируемыми швами. Затем закройте кожу семимиллиметровыми зажимами для ран, подтвердив полное замыкание после размещения, и верните мышь в чистую клетку на нагретой поверхности с наблюдением до полного выздоровления.
В этом репрезентативном эксперименте, 118 мышей были биопсии после 29 недель на обычай диеты с высоким содержанием жира, фруктозы и холестерина, чтобы вызвать NASH. Уровень фиброза и стеатоза затем забил для каждой биопсии. Мыши были исключены из исследования, основанного на низком или высоком фиброзе и ненормальной потере веса или заживлении ран, а остальные мыши лечились с помощью транспортного средства или глюкагон-как агонист рецептора пептид-1 лираглутид в течение шести недель.
В обработанных транспортным средством группах одна мышь продемонстрировала увеличение фиброза, а четыре мыши продемонстрировали увеличение оценки активности NASH. Лираглутид лечение было связано с общим улучшением фиброза, с 17% из группы лечения улучшения и 83% остаются неизменными. Аналогичным образом, лечение лираглутидом улучшило общий балл NASH, с 66% группы, демонстрировали улучшенный балл активности NASH, и 33% остались неизменными.
Кроме того, лираглутид лечение улучшилось воспаление, с 75% группы, имеющих более низкий балл воспаления после лечения, в то время как автомобиль обработанных животных испытали увеличение воспаления. Стеатоз не пострадал от агонистного лечения, оставаясь неизменным в обеих группах до и после вмешательства. Будьте осторожны, чтобы не повредить выкосятый кусок печени, чтобы убедиться, что он может быть надлежащим образом проанализированы для ваших нужд.
Эта процедура может быть использована для имитации клинических испытаний конструкций путем сравнения до и после лечения эффекты новых терапевтических средств на NASH печени.
