Гнездование поведение является полезным способом оценки деятельности повседневной жизни в диком типе и трансгенных мышей. Это особенно полезно в документировании когнитивных снижение нейродегенерации на протяжении всей жизни. Эта техника является экономичной простой и элегантной оценкой повседневной жизни у мышей.
Она также может быть выполнена в течение короткого периода времени с минимальной подготовки. В нашей лаборатории мы рекомендуем измельченную бумагу, так как бумага дает более последовательные результаты. Тем не менее, экспериментальные исследования могут быть проведены, чтобы определить, какой материал лучше люкс ваши цели и ваш бюджет.
В отдельном испытательном зале установите условия окружающей среды таким образом, чтобы они соответствовали всем испытаниям и были идентичны жилой комнате, а также обеспечивают питание и воду в клетки addlibitum. Назначьте каждой мыши случайный идентификационный номер или букву. И записать оригинал удостоверения личности животного и другие необходимые идентификации в колонии записи для обеспечения того, чтобы помощники и животноводства сотрудников остаются слепыми к условиям.
Случайно заказать размещение клетки в испытательном зале, так что дикий тип и трансгенных мышей не ненадлежащим образом разделены. И покрыть дно каждой клетки с 100 граммов сухого веса кукурузных бобов постельных принадлежностей для квадрата, твист, и измельченные испытания бумаги. И 100 граммов мягких постельных принадлежностей по cob для мягких испытаний побок.
Затем, как раз перед введением мыши в клетку, поместите один прессованный хлопчатобумажный квадрат, один бумажный поворот, никакой дополнительный материал, добавленный в мягкие постельные принадлежности початка, или 2,5 грамма чистой измельченной белой бумаги принтера, разрезанной на пять-семь сантиметров полосок. В то же время суток, в начале светового цикла, принести домой клетку, содержащую мышей в испытательном зале. И передать каждую мышь в назначенную клетку гнездования с материалом уже в клетке.
Когда все мыши были помещены, вернуть домой клетки в жилищную комнату и позволить мышам завершить испытание в течение 24 часов, спокойно. В конце испытания аккуратно снимите крышку каждой клетки. И когда каждая мышь отошла от гнезда, фотографировать каждое гнездо захвата назначенного id на фотографии, и свести к минимуму появление любых материалов за пределами клетки.
Когда каждое гнездо было сфотографировано, аккуратно перенесите каждую мышь в отдельные временные клетки. И сопровождать постельные принадлежности и любые вложенные материалы из каждой клетки. Затем замените постельные принадлежности, предоставьте следующий вложенный материал в последовательности.
И верните мышь в гнездовую клетку. Когда все испытания будут завершены, верните мышей в свои домашние клетки и наблюдайте за мышами за любым потенциальным агрессивным поведением. Для поддержания надежности взаимосвязанных обеспечивают базовые изображения для каждого вложенного материала, по крайней мере двух лиц, слепых к исследованию.
И предоставить серию образцов гнезда для ознакомления бомбардиров с каждым типом материала. При забил гнезда, оценка одного должны быть назначены, когда измельченная бумага или небольшие квадраты остаются разбросаны по всей клетке, или хлопка площади или твист остается нетронутым. Оценка два назначается, когда часть материала построены в гнездо, но более 50% материала не были использованы для строительства гнезда.
Оценка три назначается, когда заметное гнездо построено, но несколько частей по-прежнему разбросаны. Оценка из четырех присваивается, когда почти весь материал используется для гнезда, но несколько кусков материала остается разбросанным или находятся рядом с гнездом. Оценка пять назначается, когда почти весь материал используется, чтобы сделать неопределимое гнездо.
У бомбардира сделать перерыв и вернуться к базовым фотографиям, чтобы избежать усталости и предвзятости во время процедуры скоринга по мере необходимости. Когда все клетки были забиты, вести баллы и формат файла данных, чтобы быть в длинном формате, так что животные оценки находятся в отдельных столбцах. В этом репрезентативном анализе по всем четырем предоставленным материалам мышей дикого типа набрали больше очков по качеству гнезда по сравнению с мышами APOE e4.
С измельченной бумаги оценили значительно выше по качеству, то квадрат, постельные принадлежности, или твист материалов. Без различий между квадратом, постельными принадлежностями и твист-материалами. Кроме того, в этом эксперименте с мышами-хтау 5,5-месячные животные-мутанты строят гнезда из измельченной бумаги, которые были значительно хуже, чем те, которые были построены по возрасту, соответствовали аналогам дикоготипа.
Результаты должны оставаться слепыми к экспериментальным условиям и пересматривать критерии оценки. С выводами, которые должны быть обоснованными и действительными, меж- и внутрикамерные достоверности также должны быть оценены. Burrowing и Circadian колесо работает два других распространенных способов оценки деятельности повседневной жизни.
И они могут служить комплимент гнездования поведения. Гнездование может быть использовано в качестве вспомогательной оценки для прогнозирования возможного снижения познания, расширяя дыхание поведенческих оценок в сочетании с Моррисом лабиринт воды и циркадных колес работает.