Использование упрощенной плетизмографии всего тела может помочь пролить свет на взаимосвязь между функцией легких и прогрессированием заболевания у исследуемых животных. Основным преимуществом данной методики является возможность сбора дыхательных данных у несдерживаемых животных. Начните с настройки системы, подключив камеру выборки к мостовому усилителю с помощью восьмиконтактного разъема DIN, а мостовой усилитель — к устройству сбора данных.
Подключите устройство сбора данных к источнику питания и компьютеру с помощью программного обеспечения для анализа физиологических данных. При подключении инициируйте программное обеспечение для взаимодействия с системой сбора данных. Загрузите дополнительный модуль спирометрии в программном обеспечении и перейдите на вкладку спирометрии, чтобы изменить настройки устройства по умолчанию с литра в секунду до микролитра в секунду в окне настроек.
Для калибровки системы создайте четырехканальное окно в программном обеспечении. В первом канале установите исходные данные с частотой дискретизации 4 000 точек данных в секунду и диапазоном в один милливольт. Второй канал будет цифровым фильтром первого канала с использованием фильтра высоких частот, один герц, с автоматической регулировкой.
Создайте третий канал на вкладке сглаживания данных второго канала путем усреднения 100 выборок. И создать четвертый канал в потоке спирометрии данных третьего канала. Затем настройте анализ панели данных четвертого канала с тремя столбцами.
Для первого столбца перейдите к данным и комментариям четвертого канала, чтобы получить доступ к полному тексту комментария. Затем настройте данные второго столбца и четвертого канала и циклические измерения для выбора средней циклической частоты Для данных третьего столбца и четвертого канала выберите циклические измерения и среднюю циклическую высоту. Установите частоту кадров 100 к 1 в правом нижнем углу графика и сохраните конфигурацию окна в качестве шаблона для будущих исследований.
По завершении закройте крышку камеры для отбора проб и прикрепите 25-микролитровой газонепроницаемый шприц к соедините соединитель переборки приманки. Затем установите шприц с адаптером Chaney, чтобы использовать углунный упор адаптера Chaney для втягивания 20 микролитров воздуха в шприц. Затем, чтобы обнулить pleth в программном обеспечении, перейдите на вкладку настройки и выберите ноль всех входных данных перед началом записи.
Во время записи дождитесь стабилизации исходного уровня, а затем быстро нажмите и выньте поршень шприца на 10 повторений, чтобы воспроизвести дыхание субъекта с измеренным 20-микролитрным дыханием. После этого остановите запись, щелкнув правой кнопкой мыши начало пронумерованной записи pleth и обозначьте идентичность измеряемого образца, щелкнув добавить комментарий. Сбросьте шприц и обнулите вход, а также дважды повторите запись измерений 20-микролитровых импульсов.
После завершения всех измерений в трех сеансах записи с помощью компьютерной мыши выберите часть дыхательного плета, которая точно представляет собой искусственное 20-микролитровое дыхание. Затем просмотрите данные третьего столбца для средней циклической высоты и рассчитайте средний измеренный объем дыхания из трех записей. Откройте главный шаблон, описанный выше.
Затем поместите сознательную 4-12-недельную самку черной мыши-альбиноса C57 C57 6J в камеру для отбора проб и закройте крышку. Ненадолго ослабьте крышку переборки приманки, чтобы выровнять атмосферное давление в камере, и снова затяните крышку. Обратите внимание, что субъект не активно перемещается в камере выборки, прежде чем обнулить все входы и начать запись.
Обозначьте личность субъекта, щелкнув правой кнопкой мыши начало пронумерованной записи pleth и щелкнув добавить комментарий. Затем верните мышь в клетку. Выберите часть дыхательного плета, которая точно представляет дыхание субъекта.
В модуле панели данных данные появятся в заголовке предварительного просмотра, обеспечивая временное считывание частоты дыхания и объема дыхания. Предварительный просмотр данных можно записать на панель данных с помощью значка добавить в панель данных. Продолжайте измерять параметры для испытуемой мыши по одному и записывать репрезентативные участки дыхательного плета на панель данных.
После записи данных экспортируйте данные панели данных в Excel и рассчитайте минутный объем. При клиническом применении плетизмографии всего тела на сложные расчеты дыхания влияют собственная температура тела субъекта и температура окружающей среды, а также влажность. В исследовании упрощенная плетизмография всего тела или подход SWBP контролирует изменение температуры и влажности окружающей среды, и было замечено, что вклад в температуру и влажность самого хозяина существенно не влияет на точность измерений дыхания 20-микролитрового калибровочного объема.
Исследовано влияние ингаляционных анестетиков на дыхание мышей. Базовое дыхание перед анестезией и дыхание, пока мышь восстанавливается после анестезии, показаны здесь. Лечение предпочтительным анестетиком заставляло мышей демонстрировать медленную частоту дыхания с большим приливным объемом воздуха.
По мере того, как мыши восстанавливались после седации, частота дыхания увеличивалась, а объем дыхания постепенно уменьшался. Аналогичным образом, частота дыхания неуклонно увеличивалась до тех пор, пока исходное дыхание не будет восстановлено до 2-2,5 минут после снятия с анестезии. Минутный объем внимательно следил за эффектами частоты дыхания, достигающей исходного минутного объема через 2,5 минуты после снятия с анестезии.
Изменения дыхания во время респираторных мелиоидозных инфекций контролировались у мышей-хозяев. Частота дыхания и общий вдыхаемый воздух мышей быстро уменьшались в течение первого дня инфекции и оставались низкими в течение остальной части течения болезни. Напротив, объем дыхания не резко падает в течение первых 24 часов, а вместо этого неуклонно уменьшается до трехдневного течения болезни.
Эти данные свидетельствуют о том, что объем дыхания может обеспечить биометрическое считывание тяжести респираторных заболеваний у мышей. Самое главное, что нужно помнить при выполнении этой процедуры, это подождать, пока мышь не будет двигаться, прежде чем начать запись. Иногда вам нужно набраться терпения, пока любопытная мышь исследует камеру для отбора проб.
Этот метод проложит путь к изучению того, как бактериальные мутанты проявляют различное влияние на функцию легких хозяина во время их измененного процесса заболевания, и как терапевтическое вмешательство может ускорить восстановление нормальной функции легких у инфицированных мышей.
