Это первый случай, когда вызванный стрессом рецидив героина проявляется после воздержания, назначенного наказанием. Эти методы могут помочь нам понять нейронный механизм, лежащий в основе вызванного стрессом рецидива у людей после добровольного воздержания. Используя лишение пищи и наказание за воздержание, мы более точно имитируем состояние человека и привносим экологическую обоснованность в животные модели рецидива.
Начните с установки камер оперантного обусловливания, как описано в рукописи. После восстановления после операции приучите крысу в камере обучения оперантов в течение 24 часов, прежде чем инициировать протокол, не прикрепляя крысу к металлической пружине. Поместите крысу в оперантные камеры на протяжении всего эксперимента.
Затем прикрепите разъем 5up к трубке Tygon и металлической пружине. Начните тренировку с наступлением темной фазы обратного светового цикла. Для самостоятельного введения героина рычаг приема должен быть доступен при фиксированном соотношении один, или FR один.
Программируйте каждое испытание, чтобы начать с вставки рычага захвата и включения домашнего света. Как только крыса нажмет на рычаг дубля один раз, втяните рычаг дубля, включите индикатор подсказки над рычагом и подайте тон в течение 20-секундного периода тайм-аута. Выключите в доме свет, и разрешите доставку 0,13 миллилитров настоя героина в дозе 0,1 миллиграмма на килограмм.
Затем запрограммируйте 30-секундный промежуточный интервал, в котором не представлены сигналы, свет дома выключается, а рычаг убирается. Для следующего испытания вставьте рычаг захвата и включите свет дома. Для самоуправления с цепочкой поиска взятия под FR запрограммируйте систему обучения оперантов на вставку только рычаг поиска и включите свет дома, чтобы сигнализировать о начале сеанса с рычагом захвата в убранном состоянии.
Как только крыса нажимает один раз на рычаг поиска, программа втягивает рычаг поиска и вставляет рычаг захвата. Одно нажатие на рычаг дубля убирает рычаг дубля и инициирует процедуру включения сигнального света, а также 30-секундный промежуточный интервал, как показано ранее. После промежуточного интервала запрограммируйте систему обучения оперантов, чтобы вставить рычаг поиска и включить свет дома, чтобы сигнализировать о начале следующего испытания.
Далее запрограммируйте все этапы для самоуправления с помощью цепочки приемов при фиксированном соотношении один, как было продемонстрировано ранее с введением переменного интервала в пять в течение трех дней в качестве нового графика усиления на рычаге поиска. Настройте программное обеспечение так, чтобы при первом нажатии на рычаг поиска активировать переменный интервал пяти расписаний. Позвольте программному обеспечению случайным образом выбирать интервал времени из списка 0,1, пяти и 10 секунд, что приводит к интервалу в среднем пять секунд.
По истечении выбранного интервала первое нажатие рычага поиска втягивает рычаг поиска и удлиняет рычаг захвата. После выполнения шагов для рычага захвата и по окончании испытания обучайте крысу в течение пяти дней в соответствии с графиком переменного интервала 30 для ссылки поиска. Для этого позвольте программному обеспечению случайным образом выбирать время из списка 15, 30 и 45 секунд в среднем на 30 секунд.
Затем тренируйте крыс в течение трех дней по расписанию с переменным интервалом 60, что позволяет программному обеспечению случайным образом выбирать время из списка из 45, 60 и 75 секунд. Для воздержания, назначенного наказанием, проводите сеансы наказания в течение восьми дней с регулярным наблюдением, чтобы гарантировать, что крысы не проявляют признаков аномальной боли или каких-либо проблем со здоровьем. Начинайте сеансы наказания с вставки рычага поиска и включения домашнего света.
Запрограммируйте систему обучения оперантов таким образом, чтобы после завершения поиска звена при переменном интервале 60 рычаг поиска втягивался, свет дома выключался, а крысе на 30% завершенных звеньев поиска вместо вставки рычага захвата вводился мягкий удар ногой. Рычаг взятия распространяется на остальные 70% завершенных ссылок поиска, как в обычном испытании самоуправления. После программирования промежуточного интервала в семь минут установите интенсивность удара стопы на уровне 0,2 миллиампер и увеличьте на 0,1 миллиампера за день наказания до 1,0 миллиампер.
Как только крыса нажмет на рычаг захвата, повторите фиксированное соотношение на один шаг для втягивания рычага, доставки инфузии героина и представления сигналов с последующим семиминутным промежуточным интервалом. После последнего дня воздержания, назначенного наказанием, удалите пищевые бункеры из камер для крыс, которые проходят тест на рецидив, вызванный лишением пищи, и сохраните пищевые бункеры для группы сытых. Обеспечьте неограниченный доступ к воде в обеих группах и контролируйте здоровье животных.
После 24 часов лишения пищи приступайте к трехчасовому тесту на поиск героина, вызванного лишением пищи, с переменным интервалом 60 с межсудебным интервалом в семь минут без шока или вливаний героина. После сеанса верните пищевые бункеры крысам, лишенным пищи. На следующий день удалите пищевые бункеры из камер крыс, которые были насыты первым тестом на рецидив.
Предоставьте крысам, ранее лишенным пищи, неограниченный доступ к пище до и во время теста. После 24-часового лишения пищи выполните трехчасовой тест на поиск героина, как было продемонстрировано ранее. В исследовании самцы крыс продемонстрировали увеличение нажатий рычагов поиска по мере увеличения графика подкрепления.
В течение тренировочных дней наблюдалось надежное, постоянное количество вливаний героина. Во время наказания крысы уменьшали количество нажатий рычагов и инфузий с увеличением интенсивности удара ногами в течение восьми дней наказания. В тесте на поиск героина состояние лишения пищи значительно увеличило поиск героина после воздержания, назначенного наказанием, и не наблюдалось статистически значимого эффекта ни для времени, ни для поиска наркотиков с течением времени в условиях кормления Важно потратить время на обучение животных обучению в основной цепочке поиска и приема в соответствии с FR.
Без этого шага животные не смогут двигаться вперед в экспериментах. После реализации модели мы теперь можем разрабатывать эксперименты, которые рассматривают нейробиологию вызванного стрессом рецидива после добровольного воздержания.
