Наш метод динамического непрерывного забора крови из сердца крысы очень важен для анализа компонентов крови, способствуя пониманию сердечно-сосудистых заболеваний и связанных с ними заболеваний. По сравнению с традиционными методами отбора проб этот метод имеет преимущества in vivo, в режиме реального времени, динамического и является неинвазивным, без биологических микромолекулярных факторов и предварительной обработки титр-образца для иностранного теста. Этот метод применим не только к сердечно-сосудистым заболеваниям, но также должен работать для диагностики и лечения заболеваний путем обнаружения биомаркеров крови в сочетании с высокофазной жидкостной хроматографией и масс-спектрометрией.
Этот метод может быть использован для исследования сердечно-сосудистых заболеваний, таких как инфаркт миокарда, апноэ и атеросклероз. Кроме того, это также относится к кардиогенному отеку легких и тромбоэмболии легочной и церебральной артерии. После проведения экспериментальной подготовки присоедините входное отверстие зонда диализного блока иглой шприца, адаптером трубки и трубкой FEP.
Проверьте проходимость системы трубопроводов микродиализа путем перфузии раствора декстрозы цитрата антикоагулянта в систему трубопроводов. Сделайте разрез, чтобы обнажить правую яремную вену путем тупого рассечения мягких тканей и периваскулярной фасции. Используя хирургический шов 4-0, сделайте съемный скользящий узел в правой яремной вене на дистальном конце сердца, чтобы временно заблокировать кровоток.
Затем делают разрез в правой яремной вене возле сердца. Вставьте игольчатый катетер в правую яремную вену по направлению к проксимальному концу сердца крысы. Вставьте зонд для микродиализа крови в катетер и имплантируйте зонд с помощью глазных щипцов вдоль косого разреза катетера.
Извлеките направленный катетерный стилет и полностью погрузите полупроницаемую мембрану зонда в правую яремную вену. Распутайте съемный скользящий узел на дистальном конце сердца, чтобы восстановить кровоток в правой яремной вене. Затем используйте хирургические швы 4-0, чтобы связать зонд с правой яремной веной.
Поместите бодрствующую крысу в свободно движущийся резервуар и подключите зонд к системе микродиализа. Затем орошают раствор декстрозы цитрата антикоагулянта со скоростью два микролитра в минуту в течение одного часа, чтобы уравновесить зондовую диализную мембрану. Соберите образцы крови для микродиализа и временно храните их в фракционном контейнере с температурой четыре градуса Цельсия.
Чтобы еще раз подтвердить, что зонд находится в правой яремной вене, рассеките крысу. Извлеките микродиализный зонд из правой яремной вены и поместите его в сверхчистую воду. Подсоедините зонд к трубопроводу и промойте в течение ночи сверхчистой водой, чтобы тщательно смыть остатки соли в трубе и зонде.
Нормальные образцы крови выглядели ярко-красными, в то время как потенциальные сгустки крови наблюдались в гипоксических образцах. Образцы, полученные с помощью метода микродиализа крови, были бесцветными, прозрачными и прозрачными. Чтобы избежать разрушения мембраны и скольжения или смещения зонда, мы должны быть внимательны при размещении и погружении зонда в яремную вену крысы.
Образцы крови, полученные с помощью метода микродиализа, могут быть использованы для анализа биомаркеров различных заболеваний и распределения в крови лекарств и редких метаболитов.
