Эта модель имитирует социальную, изолированную жизнь человека, и это неинвазивный и простой способ создать модель тревоги и легких когнитивных нарушений. Этот метод требует только соответствующих жилищных условий и лечения шнеком, и он не требует утомительных процессов, таких как инъекции или генетические манипуляции. Для социальной изоляции животных возьмите стандартную клетку для мышей с площадью 75 дюймов.
Добавьте половину количества постельного белья и один дюйм квадратного куска хлопка для гнездования. Заверните внешнюю часть стенок клетки в непрозрачные черные пластиковые пакеты без сегмента пакета, доступного изнутри. Закрепите сумку с помощью ленты и убедитесь, что внешняя среда или окружение животного не видны.
Оставьте верхнюю и нижнюю часть клетки незавернутыми, если мыши не смогут видеть через них соседних животных. Держите контрольных мышей в группах по два или три человека в нормальных условиях содержания в стандартной клетке для мышей с полным количеством подстилки, двухдюймовым квадратным куском хлопка или эквивалентом для гнездования, без упаковки непрозрачных пакетов. Убедитесь, что мыши, размещенные в группе, совместимы без конфликтов.
Если нет, исключите агрессора из анализа. Меняйте клетки только один раз в неделю во время темного цикла с тем же пластиковым пакетом, перевернутым в новую клетку, если нет значительных повреждений. Для контрольных мышей меняйте клетки два раза в неделю или более во время темного цикла.
Продолжайте изолировать мышей в течение как минимум четырех недель, чтобы наблюдать оптимальные результаты. Чтобы подготовить обработку, добавьте 3% агара в деионизированную воду и растворите ее примерно при 90 градусах Цельсия с помощью нагревательной пластины или микроволновой печи. Не допускайте просыпания или закипания пузырящегося раствора.
Закрутите раствор до тех пор, пока он не станет однородным. Пока раствор еще теплый, добавьте 5% сахарозы. Закрутите однородный раствор перед заливкой раствора в форму.
Дайте ему остыть и затвердеть при комнатной температуре или 4 градуса Цельсия. В случае светочувствительной обработки защитите плесень от света. После затвердевания нарежьте агар кубиками по 0,5 на 0,5 на 0,5 сантиметра и храните при 4 градусах Цельсия до введения.
Назначайте лечение в запланированные сроки и с частотой с как можно меньшим количеством манипуляций. Тихо и осторожно поместите один куб на небольшую лодку или эквивалент, например, крышку 50-миллилитровой летописной трубки во время темной фазы светлого темного цикла, не касаясь мыши. Позвольте мыши потреблять агар.
После подтверждения полного расхода агара, аккуратно вынимайте путь лодкой из клетки и повторяйте по мере необходимости. Социально изолированные мыши проводят значительно меньше времени в открытой руке и значительно больше времени в закрытой руке по сравнению с контрольной группой. В открытом полевом испытании социально изолированные мыши преодолевали меньшее расстояние, меньше выращивали и проводили больше времени в углах.
Точно так же они проводили меньше времени в центральной области, чем контрольная, что указывает на усиленное тревожное поведение. Социально изолированные мыши также демонстрировали снижение распознавания новых объектов и нового контекста по сравнению с контролем, что свидетельствует о когнитивных нарушениях. Этот метод позволяет нам изучать развитие тревоги и когнитивных нарушений, а не только исход расстройств.
