Questo modello imita la vita sociale e isolativa umana ed è un modo non invasivo e semplice per creare un modello di ansia e decadimento cognitivo lieve. Questa tecnica richiede solo le condizioni abitative e la coclea di trattamento appropriate e non richiede processi noiosi come iniezioni o manipolazione genetica. Per l'isolamento sociale degli animali, prendi una gabbia per topi standard con uno spazio quadrato di 75 pollici.
Aggiungi metà della quantità di biancheria da letto e un pezzo quadrato di cotone da un pollice per la nidificazione. Avvolgere l'esterno delle pareti della gabbia in sacchetti di plastica nera opachi senza segmento del sacchetto accessibile dall'interno. Fissare la borsa con del nastro adesivo e assicurarsi che l'ambiente esterno o l'ambiente circostante dell'animale non siano visibili.
Lasciare la parte superiore e inferiore della gabbia non avvolta a meno che i topi non possano vedere gli animali vicini attraverso di loro. Tenere i topi di controllo in gruppi di due o tre in condizioni normali di gabbia in una gabbia per topi standard con una quantità completa di lettiera, un pezzo quadrato di cotone da due pollici o equivalente per la nidificazione, senza avvolgere sacchetti opachi. Assicurarsi che i topi ospitati in gruppo siano compatibili senza conflitti.
In caso contrario, escludere l'aggressore dall'analisi. Cambiare le gabbie solo una volta alla settimana durante il ciclo buio con lo stesso sacchetto di plastica riavvolto in una nuova gabbia a meno che non siano presenti danni significativi. Per i topi di controllo, cambiare le gabbie due volte a settimana o più durante il ciclo buio.
Continuare a isolare i topi per almeno quattro settimane per osservare i risultati ottimali. Per preparare il trattamento, aggiungere il 3% di agar all'acqua deionizzata e scioglierla a circa 90 gradi Celsius utilizzando una piastra riscaldante o un forno a microonde. Evitare che la soluzione gorgogliante si rovesci o bollisca.
Agitare la soluzione fino a quando non diventa omogenea. Mentre la soluzione è ancora calda, aggiungere il 5% di saccarosio. Ruotare la soluzione omogenea prima di versare la soluzione in uno stampo.
Lasciare raffreddare e solidificare a temperatura ambiente o 4 gradi Celsius. In caso di trattamento sensibile alla luce, proteggere lo stampo dalla luce. Una volta solidificato, tagliare l'agar a cubetti di 0,5 per 0,5 per 0,5 centimetri e conservare a 4 gradi Celsius fino alla somministrazione.
Somministrare il trattamento nei tempi e nella frequenza pianificati con la minor manipolazione possibile. Posiziona silenziosamente e con attenzione un singolo cubo su una piccola barca o equivalente, come il tappo di un tubo cronico da 50 millilitri durante la fase oscura del ciclo buio della luce senza toccare il mouse. Lasciare che il mouse consumi l'agar.
Dopo aver confermato il consumo completo dell'agar, rimuovere con cura la barca dalla gabbia e ripetere se necessario. I topi socialmente isolati trascorrono molto meno tempo nel braccio aperto e un tempo significativamente più lungo nel braccio chiuso rispetto al gruppo di controllo. Nel test in campo aperto, i topi socialmente isolati hanno percorso meno distanza, allevato meno e trascorso più tempo negli angoli.
Allo stesso modo, hanno trascorso meno tempo nell'area centrale rispetto al controllo, indicando un comportamento simile all'ansia. I topi socialmente isolati hanno anche mostrato un ridotto riconoscimento di nuovi oggetti e nuovi contesti rispetto al controllo, suggerendo un deterioramento cognitivo. Questa tecnica ci permette di studiare lo sviluppo dell'ansia e del deterioramento cognitivo piuttosto che solo l'esito dei disturbi.
