Подготовка образцов для криотомографии клеток млекопитающих in situ

Целью данного исследования является разработка методологии пробоподготовки, которая была бы доступной и надежно воспроизводимой. Таким образом, возможности прямой клеточной криоэлектронной томографии могут быть использованы для ответа на широкий спектр биологических вопросов. Существует множество проблем, связанных с подготовкой сетки.

Ячейки плохо прикрепляются к сеткам, и манипуляции могут привести к повреждению углеродного слоя, что приведет к потере визуализируемых областей сетки. Кроме того, распространенность тонкоклеточных выпячиваний снижается без учета надлежащих условий пробоподготовки. Современные протоколы, как правило, требуют специализированного оборудования для устранения основных узких мест посева, таких как микроузоры и напечатанные на 3D-принтере держатели для прикрепления клеток и манипуляций соответственно.

Этот протокол обеспечивает решениям большую доступность, сохраняя при этом гибкость для использования этих специализированных инструментов для последующих приложений.