Применение окрашивания живых митохондрий при сортировке клеток для очистки гепатоцитов, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека

Целью наших исследований является очистка индуцированных человеком плюрипотентных гепатоцитов, полученных из стволовых клеток, с использованием без генетической модификации. Мы стремимся решить проблему опухолевого риска, связанного с недифференцированными клетками среди тех, которые дифференцированы от человеческих iPS-клеток. Одной из текущих экспериментальных проблем является низкая чистота клеток, обусловленная механическим хранением сортировки.

Мы разрабатываем новый метод очистки, который использует уникальные особенности метаболизма гепатоцитов для крупномасштабной очистки. Один неклеточный метод сортировки клеток печени-предшественников не может получить чистые гепатоциты. Другой метод для зрелых гепатоцитов может лечить только небольшую часть гепатоцитов из-за ограниченной экспрессии белка-маркера.

В отличие от этого, наш подход позволяет получить гепатоциты на разных уровнях созревания с более высоким порогом. Гепатоциты человека, полученные из iPS-клеток, крайне незрелы и демонстрируют более сниженную макроэкспрессию гепатоцитов после очистки. Наша будущая цель состоит в том, чтобы улучшить модуляцию гепатоцитов с помощью органоидных технологий и повседневных достижений в области регенеративной медицины и разработки лекарств.