В этом проекте мы сосредоточимся на разработке и применении новых аналитических стратегий, которые позволяют проводить прямой, количественный и глубокий анализ клеточных функций с разрешением для одной клетки. Таким образом, выходя за рамки измерения по одной точке данных, мы стремимся лучше понять и использовать эту многофункциональность, которая возникает в результате сложных реакций в организме хозяина и в тканях. Получить всестороннее понимание этих функциональных возможностей сложно, трудно и требует междисциплинарных подходов.
Таким образом, одной из задач в этом контексте является обеспечение того, чтобы динамический диапазон разрабатываемого анализа был адекватным для учета количества и динамики секретируемого белка, которая может сильно варьироваться в зависимости от образцов, препаратов и тканей. Нарушение регуляции иммунного ответа может вызвать различные расстройства, приводящие к легкой лихорадке и потенциально опасным для жизни осложнениям. Выходя за рамки традиционных измерений конечных точек, мы предложили напрямую измерять дисрегуляцию и активацию иммунных клеток динамически на уровне отдельных клеток, чтобы получить дополнительную информацию.
Таким образом, цитокины обычно обнаруживаются в определенный момент времени в виде концентрации в надосадочной жидкости или концентрации активированных клеток. Объемное измерение непосредственно для количественной оценки секреции каждой отдельной клетки, маскируя клеточную гетерогенность, которая, как конечная точка, не делает различий между одновременной и вторичной секрецией. Если не учитывать динамический аспект реакции, то полная клеточная функциональность относится к способности иммунной клетки секретировать несколько цитокинов одновременно.
Это позволяет им точно настраивать свой ответ на угрозы, например, и измерять эту полифункциональность в динамике, что означает, что со временем может дать более полное представление о различных нюансах иммунного ответа.