Исследование пироптоза методом проточной цитометрии

Цель нашей исследовательской группы состоит в том, чтобы определить, подвергаются ли птичьи клетки пироптозу, подобному пироптозу клеток млекопитающих. Кроме того, мы стремимся определить пироптоз с помощью более точных и простых методов. Многие гены у птиц значительно отличаются от генов у млекопитающих, что затрудняет использование реагентов, обычно используемых в исследованиях клеток млекопитающих, для исследования гибели птичьих клеток.

Таким образом, исследования гибели птичьих клеток намного сложнее, чем исследования человеческих или мышиных клеток. Мы используем характерные поры плазматической мембраны в пироптотических клетках, образованные N-концевыми фрагментами гасдермина, для разработки стратегии определения пироптоза на основе проточной цитометрии. С помощью этого нового подхода мы наблюдали возникновение пироптоза, вызванного инфекционной бурсальной болезнью, в клетках птиц.

В отличие от предыдущих методов, таких как вестерн-блоттинг или анализ АСМ, наш протокол способен точно количественно оценить процент пироптотических клеток по двум параметрам одновременно: образованию пор плазматической мембраны и разрыву плазматической мембраны, что способствует дифференцировке клеток с пироптозом от других форм клеточной гибели.