Esame della piroptosi mediante citometria a flusso

L'obiettivo del nostro team di ricerca è determinare se le cellule aviarie subiscono una piroptosi simile a quella delle cellule di mammifero. Inoltre, miriamo a determinare la piroptosi attraverso mezzi più accurati e semplici. Molti geni nelle specie aviarie differiscono significativamente da quelli nei mammiferi, rendendo difficile l'uso di reagenti comunemente impiegati negli studi sulle cellule di mammifero per la ricerca sulla morte cellulare aviaria.

Pertanto, la ricerca sulla morte delle cellule aviarie è molto più difficile di quella sulle cellule umane o murine. Utilizziamo i caratteristici pori della membrana plasmatica nelle cellule pirottotiche formate da frammenti N-terminali di gasdermin per sviluppare una strategia basata sulla citofluorimetria per la determinazione della piroptosi. Con questo nuovo approccio, abbiamo osservato l'insorgenza di piroptosi indotta da malattia infettiva nelle cellule aviarie.

A differenza dei metodi precedenti come il western blot o l'analisi AFM, il nostro protocollo è in grado di quantificare con precisione la percentuale di cellule pirottotiche in base a due parametri contemporaneamente, la formazione dei pori della membrana plasmatica e la rottura della membrana plasmatica, facilitando la differenziazione delle cellule con piroptosi da altre forme di morte cellulare.