В аспирантуре я очень заинтересовался толерантностью к жаре, особенно ее поведенческими компонентами, и с тех пор меня очень интересует поведенческая терморегуляция и механизмы, которые эндотермы используют для регулирования температуры своего тела. Устойчивость к жаре изучалась в течение десятилетий с помощью научных наблюдений за организмами. В последнее время появились видео- и автоматизированные методы измерения аспектов термоустойчивости.
И я думаю, что будет действительно здорово увидеть, куда эти новые технологии приведут нас с точки зрения изучения некоторых тонкостей поведения и активности, связанных с терморегуляцией. Одна из проблем в этой области заключается в том, что, несмотря на то, что в настоящее время у нас есть способ мониторинга и сбора больших объемов данных об активности, интерпретация того, что означают данные о деятельности, с точки зрения их биологической значимости для реальных применений, остается вопросом, требующим дальнейших исследований. Одним из преимуществ автоматизированной программы является то, что вы можете работать с большими наборами данных гораздо более доступным способом.
Раньше для анализа и интерпретации результатов приходилось вручную просматривать большие файлы Excel. Автоматизированная программа значительно упрощает анализ данных. Для начала загрузите мух в трубки монитора DAM2 и закройте оба конца трубок ватой.
Аспират индивидуум вылетает из пробирок с выдержкой в мониторные трубки. Вставьте пробирки в мониторы активности и тщательно запишите номера слотов, соответствующие каждой группе. Загрузите мониторы в пробирный инкубатор.
Запустите программное обеспечение для сбора данных и убедитесь, что настройки настроены, прежде чем начинать сбор данных для эксперимента. Просматривайте данные монитора и индексный номер в режиме реального времени через интерфейс DAMSystem. Установите вредную температуру на инкубаторе после того, как пройдет определенное количество показателей, обозначающих окончание периода акклиматизации.
Отслеживайте подсчет активности в режиме реального времени с помощью дисплея DAMSystem в программном обеспечении для сбора данных. Кроме того, может быть проще отслеживать данные о деятельности непосредственно в файлах DAMSystem. Скопируйте текстовые файлы и откройте копии вместо оригиналов, чтобы предотвратить помехи при записи данных в реальном времени.
Не наблюдая движения ни у одной из мух в течение нескольких минут, остановите программное обеспечение для сбора данных. После получения данных отсканируйте текстовые файлы на наличие ошибок с помощью указанного программного обеспечения. На основе реализованного интервала акклиматизации перед индукцией вредной температуры выберите конкретные точки начала и окончания для группирования данных об активности перед сохранением отсканированного файла.
Теперь откройте HoTDAM! программное обеспечение для анализа и нажмите кнопку Файл и загрузите данные монитора, чтобы импортировать отсканированные файлы данных монитора. Добавьте обозначения групп, чтобы указать группы обработки, соответствующие каждой ячейке в мониторах DAM2.
Нажмите «Начать определение нескольких групп», чтобы открыть диалоговое окно для добавления обозначения группы. Затем нажмите на соответствующие ячейки, чтобы применить обозначение группы, и нажмите «Остановить обозначение нескольких групп». Чтобы экспортировать TKD для каждого флая в виде файла CSV, нажмите «Файл», «Экспортировать данные Knockdown» и «Экспортировать все мониторы» или «Экспортировать выбранные мониторы».
На выходе будет организован TKD для каждой мухи по обозначению группы. Теперь нажмите «Файл», «Экспорт данных о действиях» и «Экспорт всех мониторов» или «Экспорт выбранных мониторов», чтобы экспортировать данные о действиях для каждого полета в виде файла CSV, сохранив только временные метки и данные о количестве для упрощения файла данных и назначив назначенные групповые метки для каждого полета. У закаленных самок W1118 вероятность нокдауна во время теплового стресса была значительно ниже, чем у контрольных самок.
В то время как у самцов не наблюдалось существенной разницы, закаленные самцы TRPA1 демонстрировали значительно более высокую вероятность нокдауна по сравнению с контрольными самцами во время теплового стресса, в то время как между закаленными и контрольными самками не было обнаружено существенной разницы. Средняя активность во время устойчивости к жаре отчетливо варьировала между закаленными и контрольными группами для стад W1118, демонстрируя пик активности около 30 минут как для самцов, так и для самок. Активность по акциям TRPA1 показала резкий всплеск первоначальной активности, за которым последовало быстрое снижение по всем группам.
