À l’école supérieure, je me suis beaucoup intéressé à la tolérance à la chaleur, en particulier à ses composantes comportementales, et depuis, je suis très intéressé par la thermorégulation comportementale et les mécanismes que les endothermes emploient pour réguler leur température corporelle. La tolérance à la chaleur a été étudiée pendant des décennies avec l’observation des organismes par les chercheurs. Plus récemment, il y a eu l’avènement de méthodes vidéo et automatisées pour mesurer certains aspects de la tolérance à la chaleur.
Et je pense que ce sera vraiment cool de voir où ces nouvelles technologies nous mèneront en termes d’exploration de certaines des subtilités du comportement et de l’activité en ce qui concerne la régulation thermique. L’un des défis sur le terrain est que, bien que nous disposions maintenant d’un moyen de surveiller et de collecter de grandes quantités de données d’activité, l’interprétation de ce que signifient les données d’activité en termes de pertinence biologique pour des applications réelles reste une question qui nécessite des recherches plus approfondies. L’un des avantages d’avoir le programme automatisé est que vous pouvez traiter de grands ensembles de données d’une manière beaucoup plus facilement accessible.
Auparavant, il fallait parcourir manuellement de gros fichiers Excel pour analyser et interpréter les résultats. Le programme automatisé facilite grandement l’analyse des données. Pour commencer, chargez les mouches dans les tubes de moniteur DAM2 et bouchez les deux extrémités des tubes avec du coton.
Aspirer les mouches individuelles des flacons de conservation dans les tubes de contrôle. Insérez les tubes de test dans les moniteurs d’activité et notez soigneusement les numéros de créneaux correspondant à chaque groupe. Chargez les moniteurs dans l’incubateur de test.
Démarrez le logiciel d’acquisition et assurez-vous que les préférences sont définies avant de commencer l’acquisition des données de l’expérience. Affichez les données du moniteur et le numéro d’index en temps réel via l’interface DAMSystem. Réglez la température nocive sur l’incubateur après le nombre défini d’indices, marquant la fin de la période d’acclimatation.
Surveillez le comptage de l’activité en temps réel à l’aide de l’écran DAMSystem dans le logiciel d’acquisition. Il peut également être plus facile de surveiller les données d’activité directement dans les fichiers DAMSystem. Copiez les fichiers texte et ouvrez les copies au lieu des originaux pour éviter toute interférence avec l’enregistrement des données en direct.
Après n’avoir observé aucun mouvement chez l’une des mouches pendant plusieurs minutes, arrêtez le logiciel d’acquisition. Une fois les données acquises, analysez les fichiers texte à la recherche d’erreurs à l’aide du logiciel référencé. En fonction de l’intervalle d’acclimatation mis en œuvre avant l’induction de la température nocive, sélectionnez des points de début et d’arrêt spécifiques pour le regroupement des données d’activité avant d’enregistrer le fichier analysé.
Maintenant, ouvrez le HoTDAM ! logiciel d’analyse, puis cliquez sur Fichier et charger les données du moniteur pour importer les fichiers de données du moniteur analysés. Ajoutez des désignations de groupe pour indiquer les groupes de traitement correspondant à chaque cellule des moniteurs DAM2.
Cliquez sur Démarrer la définition multigroupe pour ouvrir la boîte de dialogue permettant d’ajouter une désignation de groupe. Ensuite, cliquez sur les cellules respectives pour appliquer la désignation de groupe et cliquez sur Arrêter la désignation multigroupe. Pour exporter le TKD de chaque mouche sous forme de fichier CSV, cliquez sur Fichier, Exporter les données de renversement et Exporter tous les moniteurs ou Exporter les moniteurs sélectionnés.
Le résultat organisera le TKD pour chaque désignation de vol par groupe. Cliquez maintenant sur Fichier, Exporter les données d’activité, Exporter tous les moniteurs ou Exporter les moniteurs sélectionnés pour exporter les données d’activité de chaque mouche sous forme de fichier CSV, en conservant uniquement les données d’horodatage et de comptage pour simplifier le fichier de données et en attribuant des étiquettes de groupe désignées pour chaque mouche. Les femelles W1118 durcies présentaient une probabilité significativement plus faible d’être renversées pendant le stress thermique par rapport aux femelles témoins.
Bien qu’aucune différence significative n’ait été observée chez les mâles, les mâles endurcis de TRPA1 présentaient une probabilité significativement plus élevée d’inactivation que les mâles témoins pendant le stress thermique, tandis qu’aucune différence significative n’a été observée entre les femelles endurcies et les femelles témoins. L’activité moyenne pendant la tolérance à la chaleur variait nettement entre les groupes endurcis et les groupes témoins pour les stocks W1118, montrant un pic d’activité d’environ 30 minutes pour les mâles et les femelles. L’activité des actions TRPA1 a montré un pic marqué de l’activité initiale, suivi d’une baisse rapide pour tous les groupes.
