Generazione di biomassa di biofilm batterico maggiore utilizzando dispositivi a micropiastra profonda a piastra PCR

I biofilm batterici sono difficili da sradicare dalle superfici utilizzando interventi antimicrobici convenzionali. I metodi di micropiastre ad alta produttività a 96 pozzetti sono spesso utilizzati per coltivare biofilm batterici per test rapidi di suscettibilità antimicrobica per calcolare i valori minimi di concentrazione di eradicazione del biofilm (MBEC). I dispositivi standard per biofilm sono costituiti da coperchi ancorati in polistirene montati su micropiastre a 96 pozzetti e sono ideali per misurare la biomassa del biofilm e i valori MBEC, ma questi dispositivi sono limitati dalla superficie del piolo disponibile per l'accumulo e il costo della biomassa. Qui, delineiamo un protocollo per utilizzare il dispositivo con coperchio ancorato in polipropilene a 96 pozzetti profondi a 96 pozzetti per far crescere i biofilm Escherichia coli BW25113 e Pseudomonas aeruginosa PAO1. Viene descritto un confronto di biofilm di 24 ore formati su dispositivi di pozzi standard e profondi da ciascuna specie utilizzando la colorazione della biomassa viola cristallina e i saggi di determinazione MBEC. La maggiore superficie dei dispositivi a pozzo profondo ha aumentato la formazione complessiva di biofilm da entrambe le specie di 2-4 volte. P. aeruginosa ha formato una biomassa significativamente maggiore/^mm2 su pioli profondi rispetto al dispositivo standard. E. coli aveva una maggiore biomassa/^mm2 sui dispositivi standard in polistirene rispetto al dispositivo a pozzo profondo. I saggi di eradicazione del biofilm con disinfettanti come l'ipoclorito di sodio (candeggina) o il benzalconio cloruro (BZK) hanno dimostrato che entrambi i composti potrebbero eliminare i biofilm di E. coli e P. aeruginosa da entrambi i dispositivi, ma a valori MBEC diversi. L'eradicazione del biofilm BZK ha portato a valori variabili di E. coli MBEC tra i dispositivi, tuttavia, la candeggina ha dimostrato valori MBEC riproducibili sia per specie che per dispositivi. Questo studio fornisce un metodo di pozzo profondo ad alta produttività per la coltivazione di grandi quantità di biofilm su dispositivi in polipropilene per studi a valle che richiedono quantità più elevate di biofilm statico.