Yetiştirilmesi için Optimum Protokol Fopius arisanus Tephritid Meyve bir parazitoit Sinekler

Özet

Fopius arisanus Tephritid meyve sinekleri bu önemli tropikal zararlıları biyolojik kontrol başarıyla kullanılan bir yumurta larva parazitoit. Biz burada F. yetiştirme için optimize edilmiş bir protokol tarif hazır malzemeler kullanılarak küçük bir ölçekte arisanus.

Özet

Fopius arisanus (Sonan) Tephritid meyve sinekleri en az iki nedenden dolayı önemli bir parazitoit. Birincisi, yumurta evre ¹ sırasında ev sahibi bulaştırmak için bilinen sadece üç opiine parazitoit biridir. İkincisi, olası bir meyve sineği konak geniş bir yelpazeye sahiptir. Belki onun yaşam öyküsü, F. nedeniyle arisanus bir başarıyla, birçok tropikal ^bölgelerde 2-4 meyve sinekleri biyolojik kontrolü için kullanılır olmuştur . F. geniş kullanımı Bir engel meyve sineği kontrolü için arisanus ^5-9 koloni istikrarlı bir laboratuvar kurmak için zor olduğunu. Bu zorluk rağmen, 1990'larda ABD Tarım Bakanlığı araştırmacıları F. laboratuvar nüfusu korumak için güvenilir bir yöntem geliştirdi arisanus ^10-12. F. önemli bir ilgi var. arisanus biyoloji ^13,14, özellikle Tephritid ev sahipliği yapan geniş bir yelpazede ^14-17 kolonize kabiliyetini ile ilgili; ilgi, özellikle son ^on yılda 18 yeni kıtalar alarm Bactrocera meyve sineği zararlıların yayılmasını tarafından tahrik edilir. F. daha fazla araştırma arisanus ve bu türlerin biyolojik kontrol ajanı olarak ek dağıtımları yetiştirme yöntemleri iyileştirmeleri ve geliştirmeleri yarar sağlayacaktır. Bu protokol ve ilişkili video makale F. yetiştirme için optimize edilmiş bir yöntem tarif arisanus önceden tanımlanan bir ^yaklaşım 12 dayanmaktadır . Biz burada açıklamak yöntem sağlar F., yetiştirme Dünyada ve nispeten düşük el emeği gereksinimleri ile tropikal bölgelerde bulunan malzemeler kullanılarak meyve kullanmadan küçük ölçekli arisanus.

Protokol

1. Parasitization için ana meyve sineği yumurtaları hazırlayın

1. Dolu yemekler, her iki tarafta da uzunluğu 10 cm ve 1,5 cm derinliğinde; agar (daha uygun maliyetli bir seçenek, alternatif Gelcarin GP812, MYK Biyopolimer, Ewing NJ) hazırlayarak parazitlenene meyve sineği yumurtaları için bir substrat hazırlayın. G 9 litre suya bir konsantrasyon agar hazırlayın.
2. Sıvı Agar (yaklaşık 70ml) ile ağız yemekleri doldurun ve onları serin ve sağlamlaştırmak için izin (en az 45 dakika).
3. Agar blokları katı sonra, her bloğun en üst kaplama, kağıt mendil, tek bir katman (Georgia Pacific 'Tercih' toplu doku tek bir kat) uygulanır. Doku yüzey nem nedeniyle agar kolayca sopa olmalıdır.
4. Agar blokları doku kaplı yüzey su askıya 0,5 ml hacmi meyve sineği yumurta sürün. Bizim insectary, bu Bactrocera dorsalis (ml'de 12000 yumurta) yaklaşık 6000 yumurta eşdeğerdir.
5. Geniş fırça doku yüzeyi üzerinde eşit meyve sineği yumurtaları yaymak için suya batırılmış temiz bir 2,5 cm kullanın.
6. Yöntemlerinin koloni izin parazitoit kafesleri alt ekranın altında meyve sineği yumurtaları yerleştirin. Yumurta engelleyebilir ölü parazitlerin kaldırmak için alt ekranın alt dokunun. Yumurta alt ekran dokunmatik değilse çok iyi olur.
7. Parazitler, gece ve ertesi gün yaklaşık 21 saat oviposit izin verin. Bu parazitlenene yumurta yüksek bir yüzdesi için yeterli bir süre. Daha uzun maruz kalma riskleri superparasitization.

2. Parazitlenene ev sahibi meyve Tarama ve pupa devresi uçar

1. Yukarı bakacak şekilde yumurta ile ¹⁹ meyve sineği diyet 1.25 litre parazitoitin yumurta 3 ila 3,5 hazırlanan agar bloklar koyarak konteyner yetiştirme hazırlayın.
2. Diyet, daha büyük bir pupa devresi kap içinde ince notu vermikülit veya yıkanmış kum, 1,5 cm derinliğinde katman üzerinde yükseltici yumurta kabı yerleştirin. Pupa devresi konteyner ile maskeleme bandı kenarları kapak ve bant ile kaplayın. Vermikulit (aşağıya bakın) eleme sonra yeniden olabilir.
3. Meyve sineği tarama larva ve aşağıdaki vemiculite içine ²⁰ 'pop' için diyet kabın üst ve pupa devresi konteyner kapağı arasında yeterli boşluk olduğundan emin olun.
4. 27 yaşında bir oda pupa devresi kaplarda taşıyın ° C ve bir hafta boyunca% 80 bağıl nem (RH). Ilk dört gün boyunca karanlık bir bez örtün kaplar sonra kalan günleri için bez çıkarın.
5. Bir hafta sonra larva diyet çıkarın, bir kez bir larva attı ve pupa devresi için vermikülit girmiştir. Vermikülit larva varsa onları bir gecede pupa izin verir.
6. Elek vermikülit pupa. Sonra bir kaba elek (yaklaşık 3 mm) ile başlayın. Vermikülit herhangi kalan kümeleri kaldırmak için bir yandan elek kullanın.

3. Sıralama ve seçim

1. Pupa içeren F. arisanus boyutuna göre kısmen unparasitized meyve sinekleri ayrılmalıdır. Bu parazitlenene sinekler için zenginleştirilmiş olacak gibi, çapı 1.65 mm ve 2.26 mm arasında pupa toplayın. Çoğunlukla cılız parazitoit içeren, büyük pupa çoğunlukla sinekler içeren ^küçük 12 Puparia . Parazitlenene pupa kadınların yüzdesi boyutu ¹² ile pozitif ilişkili olduğunu unutmayın.
2. Pupa boyutuna göre sıralamak için çeşitli yöntemler istihdam edilebilir. Biz özel bir boyut sıralayıcı ²¹ kullanarak mekanik bir yöntem anlatacağım.
3. Yavaş yavaş boyutu sıralayıcı besleyen bir titreşim besleyici üst huni içinde pupa yerleştirin.
4. 30 ° açıyla biraz ıraksak haddeleme barlar bir çift oluşan boyutu sıralayıcı, pupa besleyin. Boyutuna göre ayrı ayrı bir huni boyunca on ayrı kaplar içine boş yuva bir diziye pupa bırakın.
5. , 1.65, boyut aralığı içinde bardak 2.26 mm pupa toplayın ve en sinekler unparasitized pupa ortaya çıkmıştır kadar 7 gün daha ortaya çıkması bir kafese koyun.
6. Sonra, yine de içeren bu böcekler boş puparia ayırmak için fan kullanın.

4. F. arisanus ortaya çıkması ve bakım

1. F. koloni korumak için arisanus yaklaşık 25 cm uzunluğunda her iki tarafta da, çıkarılabilir ön cam ile parazitoit tutan bir kafes kullanırlar. Kafesinin üst ve iki tarafın 1mm ² tarama vardır. Kafesin arka erişim için 9 cm delik olan bir kauçuk levha kaplıdır. Kafesin alt dışarı parazitoit yöntemlerinin koloni için meyve sineği yumurtaları iki agar blokların yerleştirilmesi yetecek kadar büyük 1-2mm ² ekran içinde kapalı bir kesim vardır.
2. Tutan kafesleri de artmış ölüm ile sonuçlanan, kafesin önünde boyunca parazitoit kalabalık oluşturmak ışık en aza indirmek için ön cam alt çeyrek boyunca renkli kısmı olmalıdır.
3. Bu seçim, yaklaşık 11 g yerleştirin.plastik kaplar içine Ted pupa çapı yaklaşık 9 cm. Bu kafes ortalama 600-700 parazitler üretmek gerekir. Boyutu seçimi yaklaşık% 60 kadın neden olacaktır.
4. Konteynerlerin ekranlı kapakları takın. Kapakları 2 mm ² yetişkin F. izin tarama, ile kaplanmış olmalıdır ortaya çıkması üzerine konteyner bırakmak arsianus ama, kalan herhangi bir meyve sinekleri içerecektir.
5. Parazitler 24 ° C ve 12:12 fotoperiyodun ve iyi bir havalandırma ile yaklaşık 45% RH koruyun. Yüksek mortalite ise, birkaç saat ya da artan havalandırma için açık havada kafeslerde hareket azaltabilir. Parazitler, bir hafta içinde oviposit hazır olmalı ve iki hafta boyunca daha verimli olmalı.
6. Streak kafeslerin üst boyunca, haftada ya da her zaman mevcut bal kuru en az üç kez spun bal sulandırılmamış. ,, Bir parmak ucu ile dar çizgiler bükülmüş bal sürün. Not çizgiler çok ağır, bal kafes içine damla olacaktır, eğer çok hafif bal çabuk kurumasına ve sık başvurmamız gerekir.
7. Parazitler nem sağlamak için kafesleri üstleri Yeri agar blokları (10 cm x 10 cm x 4 cm). Bu haftada iki kez değiştirilmelidir.

5. Temsilcisi Sonuçlar:

Biz burada USDA-ARS F. yapılan kalite kontrol prosedürleri sonuçları rapor 5 Ocak ve 22 Haziran 2010 tarihleri ​​arasında Hilo, Hawaii arisanus yetiştirme işlemi . Bu video makale ve protokol açıklanan ölçekte Hilo yerde Yetiştirme Ağustos 2009 yılında başlatılan ve Ocak ayında yeni konumu ile ilk sorunları ve ayarlamaları çoğunlukla çözüldü. Bu nedenle, bu veriler diğer araştırmacıların açıklandığı gibi, protokolü takip ederseniz kendi kolonilerinden başlayarak elde edilen sonuçların temsilcisi olan ve genellikle deneyim yetiştirme böcekler var. Bu dönemde F. küçük bir koloni korumak arisanus: 3600 - F. eşdeğer hakkında 4 haftada üretilen parazitoit tutan kafesleri , arisanus.

Zenginleştirilmiş parasitization oranlarının bir ilk onay, boyut aralığı 1.65, pupa bir 2 g örnek alınarak yapılmıştır - 2.26 mm (zenginleştirilmiş) bir holding kafes gelişme ek bir hafta (önce larva diyet kaldırıldı ve hemen sonra yani pupa elenmiş ve boyutu sıralanır.) bu, 'erken pupa' olarak bakın. 2010 yılının ilk üç ay boyunca zenginleştirilmiş örnek ortalama oran parazitler 0.46 (SD = 0.18) idi. Aşağıdaki çeyreğinde demek, yeni bir konuma kolonisi ve yetiştirme işlemleri stabilizasyonu yansıtan 0.58 (SS = 0.08) oldu. Başarıyla parazitlenene zenginleştirilmiş pupa Gelismekte üretmek vermedi ve bu sinekler üretilen içerdiğini unutmayın.

Boş puparia holding kafes kaldırılması ek bir hafta sonra başka bir iki gramlık bir numunesinde ('geç pupa') alınmıştır. Bu ikinci örnek meyve sinekleri% 1 altında temsil edilmektedir. Kısmen önceki sinek parazitler ile karşılaştırıldığında ortaya çıkması, bu yüzden holding konteyner kaldı en sinekler için meyve sinekleri düşük yüzdesi nedeniyle.

Son olarak, Şekil 1 Haziran 2010 Ocak-pupa kitle verim verir. Pupa zenginleştirilmiş ilgi boyut aralığı 1,65-2,26 mm verimleri ölçülür. Ayarlamalar yeni bir tesis yapılmış iken bu yılın başında büyük bir kitle, bir 'erken pupa yüksek oranda meyve sinekleri ve o anda unemerged pupa gösterir.

Şekil 1 erken zenginleştirilmiş (pupa çapı 1.65-2.26mm) Verim (boyutu seçimi hemen sonra) ve Hilo, Hawaii ARS-USDA F. ariasnus koloni 'geç' (bir hafta tutarak ve boş kılıflar kaldırarak sonra) pupa Ocak - Haziran 2010

Tartışmalar

Bu protokol ve beraberindeki video makalede F. yetiştirme için optimize edilmiş bir protokol tanımlanmıştır ve göstermiştir bir laboratuvar ortamında, Tephritid meyve sinekleri bir parazitoit, ariasnus . Bu protokol bir koloni korumak için ihtiyaç duyulan işgücü ve özel ekipman miktarını en aza indirmek için, yıllar içinde geliştirildi. Biz iyi kurulmuş bir ev sahibi meyve sinekleri, verimli ve istikrarlı bir koloni yetiştirme parazitoit herhangi bir girişim için gerekli olduğunu unutmayın. Bizim insectary Bactrocera dorsalis bir ev sahibi meyve sineği olarak kullanır, ama diğer türlerin yanı sıra ^14-17 yetkili konakları olması gösterilmiştir.

F., çeşitli yönleriyle arisanus koloni bakım keşfedilmeyi kalır. Bunlar bu türün ¹⁰ laboratuvar uyum oranı, ²² öğrenme mekanizmaları ve adaptasyon ve ev sahibi meyve sineği plastisite tutulabilir mekanizmaları ile ortaya çıkabilir genetik değişiklikler.

Fransız Polinezyası, B. B. dorsalis: Dacine sineklerin yayılmasının özellikle son on yıl içinde dünya çapında çok sayıda örnekler, cinsi Bactrocera olanlar var edilmiştir Güney Amerika, B. bölgelerinde carambolae Afrika ve B olarak invadens Afrika ve Kuzey Akdeniz gibi F. biyolojik kontrol ajanları ^3,23,18 Test etkinliğini de Zonata diğer Bactrocera türlere karşı arisanus yüksek bir öncelik olmalıdır ve bu protokol ve beraberindeki Video makalede açıklanan yöntemleri, uygulama F. araştırma hızlandırmak umuyoruz. yerlerde ²⁴ daha geniş bir arisanus. Son olarak, bir başlangıç ​​noktası olarak bu yöntemi kullanarak daha fazla araştırma da roman yumurta parazitoit ^25,1 kolonizasyon için önemli bilgiler verebilir