Psikolojik Stres Başlatmaya Trier Sosyal Stres Testi Protokolü

Özet

Bu makalede, araştırmacılar sağlar tek katılımcılar içinde veya gruplar arasında stres, psikolojik, fizyolojik ve nöroendokrin yanıtları ölçmek için katılımcılara, psikolojik stres inducing için bir protokol tanımlamaktadır.

Özet

Bu makale, bir laboratuvar ortamında kullanmak için bir psikolojik stres protokolü göstermektedir. Araştırmacılar, sağlık ve hastalık stres yanıtı biyolojik yollar çalışma izin Protokolleri stres ve anksiyete araştırmanın ilerlemesi için ^temel 1 laboratuvarda stres yanıtı inducing için çok sayıda protokoller bulunmasına rağmen, pek çok ihmal natüralist bir bağlam veya sağlamak için , sosyal ve psikolojik stres yönleri dahil etmek. Psikolojik stres protokolleri, meta-analiz Trier Sosyal Stres Testi (TSST) TSST özgün açıklamasını stres hormonu reaktivite ² çalışmaları için en yararlı ve en uygun standart bir protokol olduğunu göstermektedir, araştırmacılar bir prosedür tasarım ve değerlendirmek için aradı sağlıklı gönüllülerin çoğu güvenilir bir stres yanıtı ³ inducing yeteneğine Bu araştırmacılar, kalp hızı, kan basıncı ve bazı endokrin stres m yükselme bulundu .TSST yanıt arkers (psikolojik stres) tuzlu bir enjeksiyon (fiziksel bir stres) göre ³ TSST çeşitli araştırma gruplarının ihtiyaçlarını karşılamak için değiştirilmiş olmasına rağmen, genellikle varışta bir bekleme süresi, beklenti konuşma oluşur bir veya daha fazla toparlanma dönemleri izledi hazırlama, konuşma performans ve sözel aritmetik performans süreleri,. TSST katılımcılara bir konuşma hazırlamak ve sunmak için gerektirir ve sosyal değerlendirmeli seyircinin huzurunda sözlü zorlu bir aritmetik problemi cevap ³ Sosyal değerlendirme ve kontrol edilemezliği TSST stres indüksiyon anahtar bileşenleri olarak tespit edilmiştir. ⁴ için kullanmak TSST amacı, on yılı aşkın bir görev sırasında (HPA) hipotalamus-hipofiz-adrenal veya sempatik-adrenal-medüller (SAM) eksen reaktivite, anksiyete ve aktivasyon farklılıkları ölçmek amacıyla sistematik bir stres yanıtı ikna etmek için ... ¹ Researconun genellikle kendi kendine bildirilen anksiyete değişiklikler, fizyolojik tedbirler (örneğin kalp hızı) ve / veya TSST yanıt nöroendokrin indeksleri (stres hormonu kortizol gibi) değerlendirir. Birçok araştırmacı, karıştırıcı kan toplama teknikleri stresi azaltmak için kan örneklemesi için bir alternatif olarak kortizol ve alfa-amilaz (otonom sinir sistemi aktivasyonu bir belirteç) olarak stres belirteçler için tükürük örnekleme kabul ettiler. TSST tamamladıktan bir kişi tarafından yaşanan değişikliklerin yanı sıra, araştırmacılar, farklı tedavi grupları (örneğin klinik karşı sağlıklı kontrol örneklerinde) veya stres azaltılması müdahalelerin etkinliğini arasında değişiklik ^{karşılaştırabilirsiniz} 1

Protokol

1. Kurmak

1. Tüm araştırmalar, uygun bir Kurumsal Değerlendirme Kurulu ya da veri toplama önce insan denekler inceleme komitesi tarafından onaylanmış olması gerekir.
2. İdeal olarak, iki oda TSST yapmak için mevcut olmalıdır. Rahat bir bekleme odası TSST başlangıç ​​ve iyileşme dönemlerinde önce katılımcılara mevcut olmalıdır. Ayrı bir görüşme odası, yenilik ve uncontrolability tanıtmak için konuşma hazırlama, konuşma, performans ve TSST matematik bölümlerini sırasında kullanılmalıdır.
3. Katılımcı konfederasyon görüşmeci ve katılımcı görsel alanda pozisyon video ya da ses kayıt cihazları ile karşı karşıya olacağını görüşme odası düzenleyin. Görüşmeci TSST sırasında stres artırmak için TSST sırasında giymek için Lab kat mevcut olmalıdır. Katılımcılar ile göz teması sürdürmek ve TSST sırasında duygusal yüz ifadeleri yapmaktan kaçınmaya görüşmeci bilgilendirin.
4. Dikkatle inci düşününe araştırma sorusu (ler) bağımlı ölçümler seçerek. : Stres yanıtı çeşitli ölçümler analiz ve yayın için rehber çeşitli kaynaklardan (psikofizyolojik önlemlerin yayın ve analiz için kılavuzlar Psikofizyolojik Araştırma Derneği tarafından sağlanmaktadır http://www.sprweb.org/journal/index tarafından sağlanmaktadır . cfm # kurallar ). deney tasarımı sırasında bu kaynakların ⁵ Danışma tavsiye edilir.
5. TSST fizyolojik, psikolojik ya da endokrin yanıtları kaydetmek için gerekli tüm ekipman kurmak. Kağıt ve kalem ya da elektronik versiyonları Bu cihaz (ancak bunlarla sınırlı değildir) elektrotlar ve elektronik ekipman ve / veya yazılım, kalp atış hızı, kardiyovasküler reaktivite, deri iletkenliği veya yanıt, göz kırpma, kas kasılması / ton, solunum hızı kayıt içerebilir Yat Devlet Sürekli Kaygı gibi psikolojik araçlarBu gösteri için entory; ⁶ tüpleri ve idrar, kan ya da tükürük örnekleri için diğer koleksiyon malzemeleri, ya da video kayıt cihazları, biz üç-kurşun elektrokardiyogram (EKG) TSST sırasında kalp hızını ölçmek için elektrotlar, ve tekrarlanan yönetim kullanarak olacak Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri, stres öncesi ve sonrası psikolojik tepkisini ölçmek için . Biz kalp hızı kayıt fizyolojik tepkileri ölçmek için tasarlanmış basit bir kayıt sistemi (BIOPAC MP36 sistemi) kullanabilir.
6. Eğer deney sırasında toplanan kan örnekleri (yerine tükürük dışında), toplama sırasında ağrı ve rahatsızlık en aza indirmek için çalışmalar yapılmalıdır. Kan toplama yöntemleri, ek fiziksel ya da psikolojik stres, TSST karıştırıcı yanıt tanıtabilirsiniz.
7. Katılımcı geldiğinde, laboratuara hoş geldiniz. Bilgilendirilmiş onam ve koltuk katılımcı rahatlıkla alın.
8. Demografik bilgileri, tarama bilgileri veya additio toplayınnal varış denemenizi tarafından gerekli tedbirler. Katılımcı, yiyecek veya içecek (su dışında) son bir saat içinde tüketilen olmadığını doğrulayın kortizol ölçümleri toplayarak kısa bir açlık dönemi, analiz için tükürük örnekleri toplamaya edilecektir tavsiye edilir. Asitli yiyecek ya da içecek ya da görünür kirlenme ile ilgili pH değişiklikleri doğru tükürük belirteçlerin ölçümü ile müdahale edebilirsiniz . İdrar toksikoloji tarama ilgi tedbirler, ilaç ya da diğer metabolitleri kontamine olabilir eğer gerekli olabilir . Stres yanıtı (örneğin ilaç, hastalık, uyku, son stresli olaylar, sosyal fobi) tarama katılımcılar kabul edilmelidir etkileyebilecek faktörler hakkında bilgiler.

2. Pre-stres Ölçümler

1. Bekleme odasında 45 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek katılımcı bilgilendirin. Emo içeren dergi gibi okuma malzemesi, katılımcı sağlamak için seçebilirsinizizolasyonlu kablo nötr içerik, ya da bu dönemde duygusal olarak nötr bir başka etkinlik.
2. 45 dakikalık bekleme süresinden sonra, ön stresin değerlendirmek için Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri yönetmek ⁶ Alternatif olarak, stres, anksiyete veya rahatlama devlet değişiklikleri değerlendirmek için tasarlanmış diğer araçlar (örneğin, görsel analog ölçekleri) uygulanan olabilir .
3. Bir "ön-stres" tükürük örneği toplayın. Su ile ağzınızı çalkalayın katılımcı bilgilendirin. Katılımcı içme saman 5-10 cm bölüm ve temiz bir, tek 2.0 ml polipropilen flakon verin. Tükürük ağız katta havuz için şişeciğin içine kamışla tükürük geçmesine izin vermek için yönlendirmeniz onların baş eğmek için katılımcı bilgilendirin. Katılımcının yaklaşık 1.5-2.0 ml tükürük toplayın. Alternatif olarak, tükürük emici diş fitil (veya benzeri malzeme) kullanarak ve tükürük ile malzeme çiğnemek ya da bombalamak için katılımcı tarafından toplanan olabilir. Eğer possible, katılımcı gizlilik sağlamak için odayı terk. Etiket ve -20 ° C'de mümkün olduğunca kısa sürede tüm tükürük örnekleri saklamak.
4. 5 dakika öncesi stres fizyolojik ölçümler kaydedin.

3. TSST

1. Ayrı bir görüşme odası (TSST stres etkilerini artırmak için) kullanarak olacaksa, görüşme odasına bekleme salonunda katılımcı getirmek.
2. TSST konuşma hazırlık döneminden başlamak için aşağıdaki komut dosyası, katılımcı okuyun: "Bu görevin konuşma hazırlama bölümü, zihinsel, neden sizin için ideal iş için iyi bir aday olacağını açıklayan beş dakikalık bir konuşma hazırlamak için. konuşma, topluluk önünde konuşma konusunda eğitim almış yargıçların bir panel tarafından videoya ve gözden geçirilmelidir. hazırlamak için on dakikanız var ve zaman şimdi başlıyor. "
3. 10 dakikalık bir konuşma hazırlık döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin. 10 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk.
4. 10 dakika sonra, bir laboratuvar önlüğü giyen odasına dönün. Katılımcı için aşağıdaki komut dosyası okuyun: "Bu görev konuşma bölümü tüm beş dakikalık bir süre için ideal iş için iyi bir aday olacağını açıklayan bir konuşma konuşmak gerekir. zaman şimdi başlıyor. " Değerlendirmeli / performans stres artırmak için pervane video kamera, şimdi açık olmalıdır.
5. 5 dakikalık konuşma performans döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin. Katılımcının konuşması sırasında konuşurken durursa, ona 20 saniye sessiz kalmaya izin verir. O konuşmaya devam etmezse, onlara talimat konuşmaya devam etmek katılımcı istemi: "Hala kalan süre var."
6. 5 dakikalık konuşma performans dönemi sonunda, katılımcı aşağıdaki komut dosyasını okuyun: "1022 sayısı 13 sırayla çıkarmak için istenecektir bu görevin son beş dakikalık matematik bölümü sırasında olacak sözlü.ly yüksek sesle cevaplar rapor ve bir hata yapılmış ise 1.022 başlatmak için istenebilir. Zaman şimdi başlıyor "katılımcı bir hata yaparsa, onları istemi:" Bu yanlış, lütfen 1022 den başlamak "5 dakika için bir dijital zamanlayıcı kurun.
7. 5 dakikalık bir matematik performans döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin.
8. TSST matematik performans dönemi sonunda, bir "post-stres" tükürük örneği toplamak.
9. Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri sonrası stres yönetin.

4. Post-stres Kurtarma Ölçümler

1. Orijinal bekleme salonunda katılımcıların dönün. Ilk iyileşme süresi boyunca, 20 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek için katılımcı kapatın. 20 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk.
2. 20 dakika sonra bekleme odasına dönün ve "Kurtarma 1" tükürük örneği toplamak.
3. Ikinci kurtarma dönemde, yine 20 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek katılımcı talimat. 20 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk.
4. 20 dakika sonra bekleme odasına dönün ve "Kurtarma 2" tükürük örneği toplamak.
5. "Kurtarma" Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri tamamlamak için katılımcı bilgilendirin.
6. Debrief deneyin gerçek doğasını olarak katılımcı. Onların performansını ve kendi konuşma veya matematik performansı hiçbir analiz yapılacaktır olmadığını katılımcı bilgilendirin. Katılımcı sunulduğu görevleri makul olmayan zor ve katılımcının yetenek ya da beceri üzerine yansıtmak olmadığını açıklayın.

5. Veri Analizi

1. Psikolojik önlemleri analiz etmek için, her öncesi stres, post-stres ve iyileşme süresi noktaları Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri puan ⁶
2. Fizyolojik önlemleri analiz etmek "," öncesi stres "," konuşma performans "ve" m konuşma hazırlama, her biri için 5 dakikalık bir ortalama kalp atış hızı puanı hesaplamaksporcudan TSST dönemleri Alternatif olarak, hesaplama TSST sırasında ayrık zaman noktalarında TSST ölçmek veya kalp hızı her dakika için puan ortalamaları ".
3. Nöroendokrin önlemler, piyasada mevcut ÇED kitleri kullanılarak hormon konsantrasyonu için tükürük örnekleri tahlil analiz etmek.

6 İsteğe Bağlı: Ek Tükürük Kortizol Testi Protokol Bilgisi (Salimetrics tükürük kortizol tahlil kiti eklemek çoğaltılamaz)

1. Tüm tükürük tahlil kiti reaktifler oda sıcaklığına getirin.
2. Tampon yıkama kiti talimatlara göre hazırlayın.
3. Yinelenen uygun kuyulara plaka düzeni ve pipet 25 mcL standartlar ve kontroller belirleyin.
4. 15 dakika boyunca 1.500 XG (@ 3,000 RPM) Çözülme tükürük örnekleri, vorteks ve santrifüj.
5. Pipet 25 plaka uygun kuyuları (çift) santrifüje örneklerinden berrak sıvı mcL.
6. Tüm kuyulara enzim konjuge ve pipet 200 mcL hazırlayın.
7. 500 rpm'de 5 dakika plaka karıştırın ve 55 dakika boyunca inkübe edin.
8. Yıkama tamponu ile 4 kez plaka yıkayın ve kurulayın.
9. Bir çok kanallı pipet kullanarak her bir kuyunun 200 mcL tetramethylbenzidine (TMB) çözeltisi ekleyin.
10. 500 rpm'de 5 dakika plaka karıştırın ve ek bir 25 dakika boyunca karanlıkta inkübe edin.
11. 50 mcL durdurma, her iyi çözüm ve reaksiyonları durdurmak için 500 rpm'de 3 dakika boyunca karışımı ekleyin.
12. Plaka alt durak çözüm ekleyerek 10 dakika içinde 450 nm dalga boyunda bir plaka okuyucu plaka temiz ve okumak silin.
13. Kortizol konsantrasyonu hesaplamak için, yinelenen tüm kuyuları için ortalama optik yoğunluk hesaplar. , Ortalaması sıfır, standart, kontrol ve numune kuyuları optik yoğunluk non-spesifik bağlayıcı kuyuların ortalama optik yoğunluk çıkarın.
14. Aver bu kuyulardan ortalama optik yoğunluğu (B) bölünmesi ile her bir standart, kontrol ve örnek için bağlı (B / Bo) yüzde hesaplayınsıfır kuyular (Bo) yaş optik yoğunluk. Lojistik uyumlu yazılımlar kullanarak enterpolasyon yoluyla kontrolleri ve numune konsantrasyonunu belirleyin.

7. Temsilcisi Sonuçlar:

Burada sunulan temsilcisi verileri, sağlıklı yetişkin bir erkek katılımcı ile öğleden sonra laboratuarımızda yapılmıştır edebiyat ve iki çalışma gözden derlenmiştir . Bu veriler, bu yazıda protokolünü kullanarak olabilir sonuçları yaklaşık olarak temsil etmek için tasarlanmıştır.

, Kalp atım hızı (Şekil 3), ve tükürük kortizol konsantrasyonları (Şekil 4) Bu TSST protokolü (Şekil 1) kendi kendine bildirilen anksiyete artar (Şekil 2 Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri ile ölçülen) neden olur. Şekil 1'de gösterildiği deney protokolünde TSST ile bir veri toplama oturumu sırasında çeşitli ölçümler yapılmış olabileceğine dair bir örnek vermek gerekiyordu. ÖLÇME, zamanlamats ve farklı önlemler de dahil, belirli bir araştırma sorusu tarafından dikte olacaktır. Anksiyete ve / veya stres yanıtı, bu önlemler köreldiğini veya zayıflatılmış artış tahmin edilmektedir azaltmak amacıyla, bir müdahale kullanıyorsanız.

Şekil 1. Deneysel protokol Not: Trier Sosyal Stres Testi (TSST), Durumluk Sürekli Kaygı Envanteri (STAI); 5 dakika öncesi Stres döneminde (PS) 10 dakika Geleceğe Stres süresi (konuşma hazırlık) (AS), 5 dakika Konuşma süresi. (S), 5 dakikalık Matematik döneminde (M).

Şekil 2. Temsilci durumluk kaygı puanları Not: Devlet Anksiyete skoru 20-Iten durumluk kaygı ölçümü, Durumluk Sürekli Kaygı envanteri (STAI) hesaplanır Temsilcisi puanları laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayınlanan verileri yansıtır .

Şekil 3. Temsilci kalp hızı verileri Not: dakikadaki atım (BPM) Kalp hızı Temsilcisi değerleri laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayımlanan verileri yansıtmaktadır.

Şekil 4. Temsilci tükürük kortizol verileri Not:. UL / DL kortizol konsantrasyonu Temsilcisi değerleri laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayınlanan veriler yansıtmaktadır.

Tartışmalar

Bu makalede, biz sağlıklı bir gönüllü Trier Sosyal Stres Testi yapmak için nasıl gösterdi. TSST, psikolojik, fizyolojik ve nöroendokrin önlemler sağlam ve güvenilir artışlara neden olur standart bir laboratuvar, sosyal stres. TSST için kullanışlı bir alternatif gibi soğuk dikiş testi veya treadmill yürüme fiziksel streslerinin ve değerlendirici bir kitlenin varlığı performans daha natüralist, psikolojik stres üretir.

Çeşitli araştırma programları ihtiyaçlar...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ekipman / Tedarik Adı	Şirket	Katalog numarası
BSL Psikofizyoloji Sistemi, Mac OS MP36 Veri Toplama Birimi ve üç kurşun elektrokardiyogram elektrotlar	BIOPAC Systems Inc.	BSLPSY-M
Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri	Zihin Bahçe, Inc.	Ağırbaşlı-B
Tükürük Kortizol Enzim İmmüno Testi Kiti	Salimetrics	1-3002
2.0 ml polipropilen flakon	Fisher Scientific	05 40B 146
BioRad Mikroplaka Okuyucu Mikroplaka Manager yazılımı ile Model 680,	BioRad	Plaka Okuyucu: 168 1000 Yazılım: 1706800