Трир социальной протокол стресс-тест для стимулирования психологического стресса

Резюме

В этой статье описывается протокол за склонение психологического стресса у участников, что позволяет исследователям для оценки психологических, физиологических и нейроэндокринные реакции на стресс в рамках единой участниками или между группами.

Аннотация

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting. Protocols that allow researchers to study the biological pathways of the stress response in health and disease are fundamental to the progress of research in stress and anxiety.¹ Although numerous protocols exist for inducing stress response in the laboratory, many neglect to provide a naturalistic context or to incorporate aspects of social and psychological stress. Of psychological stress protocols, meta-analysis suggests that the Trier Social Stress Test (TSST) is the most useful and appropriate standardized protocol for studies of stress hormone reactivity.² In the original description of the TSST, researchers sought to design and evaluate a procedure capable of inducing a reliable stress response in the majority of healthy volunteers.³ These researchers found elevations in heart rate, blood pressure and several endocrine stress markers in response to the TSST (a psychological stressor) compared to a saline injection (a physical stressor).³ Although the TSST has been modified to meet the needs of various research groups, it generally consists of a waiting period upon arrival, anticipatory speech preparation, speech performance, and verbal arithmetic performance periods, followed by one or more recovery periods. The TSST requires participants to prepare and deliver a speech, and verbally respond to a challenging arithmetic problem in the presence of a socially evaluative audience.³ Social evaluation and uncontrollability have been identified as key components of stress induction by the TSST.⁴ In use for over a decade, the goal of the TSST is to systematically induce a stress response in order to measure differences in reactivity, anxiety and activation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) or sympathetic-adrenal-medullary (SAM) axis during the task.¹ Researchers generally assess changes in self-reported anxiety, physiological measures (e.g. heart rate), and/or neuroendocrine indices (e.g. the stress hormone cortisol) in response to the TSST. Many investigators have adopted salivary sampling for stress markers such as cortisol and alpha-amylase (a marker of autonomic nervous system activation) as an alternative to blood sampling to reduce the confounding stress of blood-collection techniques. In addition to changes experienced by an individual completing the TSST, researchers can compare changes between different treatment groups (e.g. clinical versus healthy control samples) or the effectiveness of stress-reducing interventions.¹

протокол

1. Создавать

1. Все исследования должны быть утверждены соответствующие институциональные наблюдательного совета или человеческой обзор предметов комитета до сбора данных.
2. В идеале, две комнаты должны быть доступны для проведения TSST. Удобный зал ожидания должны быть доступны для участников до начала TSST и во время восстановления периоды. Отдельная комната интервью следует применять во время подготовки речи, речи производительности и математику части TSST ввести новизну и uncontrolability.
3. Организовать интервью комнату так, что участник будет сталкиваться сообщник интервьюеров и позиция видео или аудио записывающей аппаратуры на поля зрения участника. Лаборатория пальто должны быть доступны для интервьюеров носить во время TSST увеличить стресс во время TSST. Поручить интервьюерам поддерживать зрительный контакт с участниками и воздерживаться от эмоциональных выражений лица во время TSST.
4. Тщательно рассмотрите йэлектронной исследования вопрос (ы) при выборе зависимых измерений. Руководящие принципы для анализа и публикации различных измерений стрессовой реакции обеспечивается несколькими источниками (руководящие принципы для публикации и анализа психофизиологических меры предоставляются Обществом Психофизиологические исследования: http://www.sprweb.org/journal/index. кубических футов в минуту принципов # ) ^5. Консультации этих ресурсов во время планирования эксперимента рекомендуется.
5. Устанавливает все оборудование, необходимое для записи физиологических, психологических или эндокринные ответы на TSST. Это оборудование может включать (но не ограничиваясь) электроды и электронного оборудования и / или программное обеспечение для записи частоты сердечных сокращений, сердечно-сосудистой реактивности, проводимость кожи или ответ, глаза мигают, сокращение мышц / тона, частоту дыхания, бумаги и карандаш или электронные версии психологические инструменты, такие как состояние тревоги черт Inventory, ⁶ труб и других материалов, коллекция для мочи, крови или слюны;. или оборудования, запись видео Для этой демонстрации, мы будем использовать три привести электрокардиограмму (ЭКГ) электроды для измерения частоты сердечных сокращений во время TSST, и повторное введение Государство тревожности инвентаризации для оценки психологического ответа до и после стресса. Мы будем использовать основной системой записи, предназначенный для измерения физиологических реакций (BioPac MP36 системы) для записи частоты сердечных сокращений.
6. Если образцы крови (а не слюна) будут собраны в ходе эксперимента, усилия, чтобы минимизировать боль и страдания во время сбора должно быть сделано. Процедуры сбора крови можно ввести дополнительные физические или психологические стрессы, смешанные ответ на TSST.
7. Когда участник приходит, приветствовать их в лаборатории. Получить информированное согласие и место участника комфортно.
8. Сбор демографической информации, отбор информации или additioNAL меры прибытия, которые необходимы ваш эксперимент. Убедитесь, что участник не потребляли пищу или напитки (кроме воды) в последний час, если сбор кортизола измерений. Короткий период поста рекомендуется, если вы будете сбора слюны на анализ. Изменения рН связано с кислой пищи или питья или видимых загрязнений может помешать точное измерение слюнных маркеров. Скрининга мочи токсикологии может потребоваться, если меры интересов могут быть загрязнены с помощью лекарств или других метаболитов. Информация о факторах, которые могут повлиять на стрессовую реакцию (например, лекарства, болезни, сон, недавние напряженные события, социальные фобии), также должны рассматриваться при отборе участников.

2. Предварительное напряжение Измерения

1. Попросите участников ждать комфортно в течение 45 минут в зал ожидания. Вы можете предоставить участника с материалами для чтения, такие как журналы, содержащие эмоtionally нейтральным содержанием, или иной эмоционально-нейтральной деятельности в этот период.
2. После 45-минутного периода ожидания, администрировать состояние тревоги черт инвентаризации для оценки предварительно стресс тревога. ⁶ Кроме того, другие инструменты, которые предназначены для оценки изменений состояния стресса, тревоги или релаксации может быть введен (например, визуальной аналоговой шкалы).
3. Сбор "до-стресс" образец слюны. Попросите участника полощут рот водой. Дайте участник 5-10 см раздел питьевой соломки и чистый, одноразовый 2,0 мл полипропиленовые пробирки. Попросите участников, чтобы наклонить голову вперед, чтобы слюна объединить на полу рот затем передать слюной через солому в флаконе. Сбор около 1,5-2,0 мл слюны из участников. Кроме того, слюна может быть собрана с помощью абсорбирующих стоматологических фитиль (или подобный материал) и инструктаж участников жевать или насытить материал со слюной. Если позваны, выйти из комнаты, чтобы обеспечить участников в личную жизнь. Этикетка и хранить все слюны при температуре -20 ° С, как можно скорее.
4. Запись 5 минут предварительного напряжения физиологических измерений.

3. TSST

1. Если вы будете использовать отдельное помещение интервью (для увеличения напряжения эффекты TSST), довести участника из зала ожидания в комнату для интервью.
2. Для начала TSST период подготовки речи, читайте следующий сценарий, чтобы участник: "Это часть речи подготовке задачу: вы мысленно подготовить пятиминутные речи, описывающий, почему вы были бы хорошим кандидатом для идеальной работы. Ваша речь будет записаны на видео и рассматриваются жюри обучение в публичных выступлениях. У вас есть десять минут на подготовку и ваше время начинается сейчас ".
3. Запись физиологических измерений в течение 10-минутного периода подготовки речи. Установить цифровой таймер на 10 минут и выйти из комнаты.
4. Через 10 минут вернуться в комнату носить халат. Прочитайте следующий сценарий для участников: «Это речь часть задачи Вам предстоит выступить с речью, описывающий, почему вы были бы хорошим кандидатом для вашей идеальной работы Вы должны говорить за весь пятиминутный период времени... Ваше время начинается сейчас ". Опора видеокамера должна быть включена в настоящее время, повысить оценочную / производительность стресса.
5. Запись физиологических измерений в течение 5-минутного периода исполнения речи. Если участник перестает говорить во время речи, позволить ему или ей хранить молчание в течение 20 секунд. Если он или она не возобновляет говоря, строки участник продолжать говорить, поручив им: "Вы все еще есть время, оставшееся".
6. В конце 5-минутного периода производительность речь, читать следующий сценарий, чтобы участник: «В течение последних пяти минут математике часть этой задачи вам будет предложено последовательно вычитать число 13 из 1022 Вы словесные.Ly докладе ваши ответы вслух, и попросят начать заново с 1022, если допущена ошибка. . Ваше время начинается сейчас "Если участник допускает ошибку, оперативное их:" Это неправильно, пожалуйста, начать заново с 1022 "Установить цифровой таймер на 5 минут..
7. Запись физиологических измерений в течение 5-минутного периода производительность математике.
8. В конце периода математике производительность TSST, собирать "после стресса" образец слюны.
9. Администрирование пост-напряженного состояния тревожности инвентаризации.

4. После стресса Измерения Восстановление

1. Возвращение участников оригинального зал ожидания. В течение первого периода восстановления, инструктировать участников ждать комфортно в течение 20 минут. Установить цифровой таймер на 20 минут и выйти из комнаты.
2. Вернуться в зал ожидания после 20 минут и собирают "восстановления 1" образец слюны.
3. В течение второго периода восстановления, инструктировать участников снова ждать комфортно в течение 20 минут. Установить цифровой таймер на 20 минут и выйти из комнаты.
4. Вернуться в зал ожидания после 20 минут и собирают "Восстановление 2" образец слюны.
5. Попросите участников для завершения "восстановления" Государственный тревожности инвентаризации.
6. Подведение итогов участника относительно истинного характера эксперимента. Информ участников, что их работа не была записана и что ни анализ их речи и математике производительность будет проводиться. Объясните, что участник задач, с которыми они были представлены необоснованно сложным и не размышлять о способности участника или способности.

5. Анализ данных

1. Для анализа психологических мер, оценка каждого государства Тревога черт инвентаризации с предварительно стресс, после стресса и указывает время восстановления ^6.
2. Чтобы проанализировать физиологические показатели, вычислить средний балл сердечного ритма для каждого из 5-ти минутах "до стресса", "речь подготовка", "речь производительность" и "мАТН "периоды TSST. Кроме того, вычислить средние баллы за каждую минуту TSST или мер курсов сердце в дискретных точках времени, в течение TSST.
3. Для анализа нейроэндокринных меры, пробы слюны образцов для концентрации гормона с использованием коммерчески доступных комплектов ОВОС.

6 Дополнительно:. Дополнительная слюнных Кортизол Пробирной Информация о протоколах (воспроизводится из Salimetrics слюнных вставить анализа комплекта кортизола)

1. Приведите все слюнные реагентов в наборе анализа до комнатной температуры.
2. Подготовка промывочного буфера в соответствии с комплектом инструкций.
3. Определить расположение пластин и пипеткой 25 мкл стандартов и контролей в соответствующие лунки в двух экземплярах.
4. Образцы слюны оттепели, вихревые и центрифуге при 1500 XG (@ 3000 оборотов в минуту) в течение 15 минут.
5. Внесите 25 мкл прозрачная жидкость от центрифугируют образцы в соответствующие лунки в пластине (в двух экземплярах).
6. Подготовка ферментного конъюгата и пипетки 200 мкл во все лунки.
7. Смешайте пластину в течение 5 минут при 500 оборотах в минуту и ​​инкубировать дополнительные 55 минут.
8. Вымойте и промокните пластины 4 раза промывочным буфером.
9. Добавить 200 мкл тетраметилбензидина (ТМБ) раствора в каждую лунку помощью многоканальной пипетки.
10. Смешайте пластину в течение 5 минут при 500 оборотах в минуту и ​​инкубировать в темноте в течение дополнительных 25 минут.
11. Добавить 50 мкл решение остановиться в каждую лунку и перемешать в течение 3 минут при 500 оборотов в минуту, чтобы остановить реакцию.
12. Протрите нижнюю пластину чистой и читать пластины в ридер при 450 нм в течение 10 минут после остановки решения.
13. Для расчета концентрации кортизола, вычислить среднюю оптическую плотность для всех дубликатов скважин. Вычтите средней оптической плотности неспецифического связывания скважин средней оптической плотности нуль, стандарта, контроля и образца скважин.
14. Рассчитать процент оценка (B / Bo) для каждого стандарта, контроля и образца путем деления средней оптической плотности этих скважин (В), средняявозраст оптической плотности нулевого скважин (Бо). Определение концентрации контролей и образцов путем интерполяции использованием программного обеспечения, способного логистики.

7. Представитель Результаты:

Репрезентативные данные, представленные здесь, собраны из обзора литературы и двух исследований, проведенных в нашей лаборатории во второй половине дня с здорового взрослого мужчины участников. Эти данные предназначены для примерно представляют результаты, которые можно найти, используя протокол, представленные в этой статье.

Это TSST протокола (рис. 1) индуцирует рост самооценки тревоги (по данным инвентаризации Тревога черт государства; рис. 2), частота сердечных сокращений (рис. 3), и слюнных концентрации кортизола (рис. 4). Экспериментальный протокол показано на рисунке 1 призван обеспечить один пример того, как различные измерения могут быть сделаны во время сеанса сбора данных с TSST. Сроки ИЗМЕРЕНИЕц и включения различных мер будет определяться конкретные вопросы исследования. При использовании вмешательство, которое предназначено, чтобы уменьшить беспокойство и / или стрессовой реакции, притупляется или ослабленный рост этих мер предсказать.

Рисунок 1. Экспериментальный протокол Примечание: Трир социальной стресс-тест (TSST), Государственная тревожности инвентаризации (СТАИ); 5-ти минутах Предварительно период стресса (ПС), 10-минутный Досрочное период стресса (речь подготовки) (AS), 5-минутной речью период. (S), 5-минутного периода Math (М).

Рисунок 2. Представитель оценки состояния тревоги. Примечание: оценка состояния тревоги рассчитывается с 20-Итен тревожности мера государства тревожности инвентаризации (СТАИ) Представитель оценки отражают данные, собранные в нашей лаборатории и публикуются в литературе..

Рисунок 3. Представитель данных частоты сердечных Примечание:.. Частота сердечных сокращений в ударах в минуту (BPM), представитель ценности отражают данные, собранные в нашей лаборатории и публикуются в литературе.

Рисунок 4. Представитель слюнных данных кортизола Примечание:.. Кортизол концентрации в UL / DL значения представитель отражают данные, собранные в нашей лаборатории и публикуются в литературе.

Обсуждение

В этой статье мы продемонстрировали, как вести Трир социальной стресс-тест в здоровых добровольцев. TSST это стандартизированный лабораторный социального стресса, который вызывает прочный и надежный рост психологических, физиологических и нейроэндокринной мер. TSST является полезной ал...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Наименование оборудования / питания	Компания	Номер по каталогу
BSL психофизиологии системы, Mac OS в том числе MP36 Data Unit Приобретение и три привести электродов ЭКГ	BioPac Systems, Inc	BSLPSY-М
Государство тревожности инвентаризации	Разум Сад, Inc	Степенный-B
Кортизол слюнных ферментов Иммуно Пробирной Kit	Salimetrics	1-3002
2,0 мл полипропиленовые флаконы	Fisher Scientific	05 146 40В
BioRad Считыватель микропланшетов, модель 680, с программным обеспечением менеджер микропланшетов	BioRad	Пластина Reader: 168 1000 Программное обеспечение: 1706800