Kardiyak Stres Testi Dobutamin İndüklemiş ve Farelerde Kalp Kateterizasyonu tarafından İzlenen

Özet

Biz dobutamin ile tetiklenen ve normal farelerde kalp kateterizasyonu tarafından izlenen bir kardiyak stres testi gerçekleştirmek için protokol açıklar. Ayrıca yüksek yağlı diyet bağlı obez farelerde subklinik kardiyak hastalık meydana çıkarmak için uygulama göstermektedir.

Özet

Dobutamin arter (β ₂₎ olarak ifade reseptörlerine göre kalp (β ₁₎ olarak ifade reseptörü için yüksek bir afiniteye sahip bir β-adrenerjik agonistidir. Sistemik olarak uygulandığında, kardiyak tüketimini artırır. Böylece, dobutamin potansiyel enfarktüs riski anormal ritmi veya iskemik alanlar unmasks.

Bir kardiyak stres testi sırasında kalp fonksiyonlarının izlenmesi ekokardiyografi veya kalp kateterizasyonu da yapılabilir. İkincisi bu eski bir invaziv, ancak daha doğru ve bilgilendirici bir tekniktir.

Kalp atım hızı (KAH), sistolik basınç, diyastolik basınç, diyastol sonu basıncı, maksimal pozitif basınç: Kalp stres testi dobutamin ile tetiklenen ve burada açıklandığı gibi başarılı kardiyak kateterizasyon tarafından izlenen tek bir deneyde, aşağıdaki hemodinamik parametrelerin ölçümünde, izin geliştirme (dP / dtmax) ve maksimal olumsuz basınure geliştirme (dP / dt _min), bazal şartlarda ve dobutamin artan dozlarda altında.

Beklendiği gibi, normal farelerin biz İK, dP / dt _max ve dP / dt _min bir dobutamin doza bağlı artış gözlendi. Ayrıca, en yüksek dozda, yüksek yağ içerikli diyet ile endüklenen aşırı şişman farelerde kalp dekompensasyon ortaya çıkmasından sonra (12 ng / g / dak) test edilmiştir.

Protokol

Protokol Facultad de Medicina Clinica Alemana-Universidad del Desarrollo ve Etik Komitesi tarafından onaylandı.

I. Dobutamin İnfüzyon hazırlamak

1. 500 ug / ml dobutamin bir stok çözeltisi elde etmek için, steril distile su, 20 ml dobutamin 10 mg eritilir. -20 ° C'de kısım ve mağaza Bu çözelti 3 ay için en azından kullanılabilir.
2. Oda sıcaklığında dobutamin stok çözeltisi bir kısım çözülme.
3. Dobutaminin (ug / ml) = vücut ağırlığı x 0.2: formül kullanılarak hesaplanır konsantrasyon dobutamin çalışma çözeltisi, elde etmek için, steril% 0.9 NaCI içinde dobutamin stok çözeltisi seyreltilir.
4. Dobutamin çalışma çözeltisi ile 1 ml şırınga 29Gx1 / 2 "doldurun.
5. Bir 20 cm PE-10 tüp içine şırınga iğnesi yerleştirin.
6. Üreticinin talimatları izleyerek infüzyon pompası şırınga ayarlayın.
7. Bir adımda rampa infüzyon ayarlama6 adımlar için, her adım için 10 ul / dak artışla biçimi-to-adım.

II. Basınç Sensörü hazırlanması

1. En az 15 dakika boyunca 37 ° C 'de steril su içinde sinyal kayması, batırmak basınç sensörü en aza indirilmesi. Bu hidrostatik basınç basınç sensörü etkiler önlemek için, daha fazla 0.5 cm derinliğinde kateter emmek etme.
2. Elektronik 25 ve 100 mmHg basınç sensörü kalibre. Elektrik girişi (Volt) basınç sinyali (mmHg) dönüştürülür.
3. 2 k / s örnekleme hızı ayarlayın ve 100 Hz'de kesilerek filtre alçak geçiren kullanın. Basınç sinyali sıfıra mmHg olarak ayarlayın.
4. Sonda ucundan 15 mm işaretleyin. Giriş noktasından kalp ulaşmak için Distant sol ventrikül içine kateter varlığı tespit, ekokardiyografi ile tahmin edilmiştir.

III. Kateterizasyon için Fare hazırlanması

1. Ağırlık C57BL / 6 erkek fareler, haftalık 30-32.
2. Intraperitoneal 60 mg / kg ketamin ve 4 mg / kg ksilazin ¹ enjekte edilir. Not: Diğer anestezikler, örneğin, kullanılan olabilir: 350 - 450 mg / kg avertin, 50 mikrogram / ​​pentobarbital kg veya 1.5 - 2% izofluran ^2-3.
3. Elektrikli ustura ile boyun Tıraş.
4. Isıtılmış bir izotermal ısıtma plakası üzerine sırtüstü pozisyonda anestezi fare yerleştirin. Kağıt bant ile bacaklarda sabitleyin.
5. Tam sedasyon onaylamak için bir ayak tutam gerçekleştirin.
6. Yavaşça vücut sıcaklığını izlemek için bir rektal prob yerleştirin. Vaselinized prob kullanılması önerilir.
7. Vücut ısısı 37 farklıysa ° C ± 0.5 ° C, ısıtma plakası yoluyla ayarlayabilirsiniz.
8. Oksijen kaynağı yakınında fare burun koyun.
9. Stereomikroskop altında fare boyun bölgesinde yerleştirin.

IV. Veri Toplama

1. LabChartPro 7 yazılımı, basınç kayıt için tek kanallı ve kalp hızı için bir kanal (İK) seçinkaydı. Ikincisi için, seçenek "Döngüsel Ölçümleri" ve hızı gibi kurulum ölçümü seçin.
2. 0 ila 150 mmHg: basınç kanalı için ölçek aralığı ayarlayın.
3. 200 ila 600 bpm For: HR kanal ölçek aralığı ayarlayın.
4. Kayıt başlamak için start tuşuna basınız.
5. Prosedürleri, örneğin yapılan gösteren yorumlarla takın: anestezi yönetimi, değişiklikler solunum, dobutamin infüzyonu, dobutamin konsantrasyon başlar.

V. Kalp Kateterizasyonu ^4,5

1. Çene yakın sağ tarafında küçük bir kesi yapın. Makas deri-kas bağ dokusu ayırmak ile.
2. Trakeanın sağ tarafta - bir uzunlamasına diseksiyon (2 cm 1.5) gerçekleştirin. Trakea yakınındaki sağ karotis arter ortaya koymak için, kavisli bir forseps ile bağ dokusu, yağ ve kas ayırın.
3. Karotis arter maruz hayvan sağ tarafına bir genişletici yerleştirin. Vurmalıkalp tarafından oluşturulan basınç arter tarafından bulunması kolaylaşmaktadır. Koyu kırmızı juguler ven, sağ tarafta.
4. Kavisli bir forseps ile bitişik dokulardan arter ayırın. Bir beyaz ipliği andıran vagus siniri, arter boyunca yatıyor.
5. 6/0 ipek iplik ve "çift" bir 20 cm parça kesin.
6. Soldan sağa arter altındaki "çift" iplik geçirin. Ayrı ayrı uçları elde etmek için, iplik kes.
7. Arter altında üçüncü bir iş parçacığı (10 cm) Min.
8. Başlığına yakın konumlandırılmış parçacığı sıkı bir düğüm ve daha distal iplik gevşek bir tek bağla.
9. Orta iplik gevşek bir düğüm ve bir kağıt bant ile ısıtma pedi için orta iplik sağ ucunu sabitleyin.
10. Steril% 0.9 NaCl bırakarak karotis arter nemli tutun. Pamuk tomurcukları ile sıvı aşırı kurumasını bekleyin.
11. Bir hemostat klemp ile alt iplik gerin.
12. P hemostat makas konumunu saptamakkan akışı tıkamak için, karın derisi Santimleme üst iplik germe. Arter çevresinde bağ dokusu çıkarıldığından emin olun. Arter kan dolu ve nabız yoksun olmalıdır. Arter üzerinde bir tork kuvveti üreten Konuları önleyin.
13. Bir Vannas mikro-makas ile arterin alt kısmına yakın bir kesit nick olun. Kan damlaları dökülen edilecektir.
14. Karotis arter içine kateter yerleştirin. Tüm basınç sensörü tanıtmak için emin olun. Hiçbir kan kaybı olduğunu doğrulayın.
15. Nazikçe yerinde tutmak kateter için, orta düğüm iplik ayarlayın. Çok fazla sıkıştırmak etmeyin, basınç sensörü çok kırılgandır.
16. Hayvanın karın hemostat makas bırakın.
17. Kan kaybını önlemek için, el ile kateter tutun ve orta iplik itme. Not: arter kan dolu olmalıdır.
18. Kaydı basınç sinyalleri başlayın.
19. Kateter içinde olduğunda,arteriyel basınç sinyali 60-70 100-120 mmHg dalgalanır. Basıncı sinyalinin şekli Şekil 1.A. Not gösterilmiştir: Eğer ilgilenen varsa sinyal en az 5 dakika boyunca sabit ise, bu kez noktada arter basıncı kaydedebilirsiniz. HR değerleri kayıt sinyali 30 saniye arayla dikkate basınç dalga elde edilmiştir. Bu soruşturma hedefleri doğrultusunda, İK doğrudan ölçümü için de bir EKG yöntemi kullanmak mümkündür.
20. Yavaşça basınç sinyali (Şekil 1.B) şeklinde bir değişiklik gözlemlemek için kateter yukarıya doğru itilir. Kateter sol ventrikül içine sonra, basınç sinyali 0 100-120 mmHg dalgalanır. Bu kateter kaydırın zor ise, iki parmak ile hayvan göğüs çimdik.
21. Sürekli nefes hızı, vücut ısısı, anestezi seviyesi ve basınç sinyalini kontrol. Hepsi de sabit kalmalıdır.

VI. Dobutamin infüzyonu

1. Juguler ven kateterizasyonu için onun perforasyonu önlemek amacıyla, damar çevresinde geri soyma adipoz doku emin olun. Ven oklüzyonu için cerrahi prosedür karotid arter için gösterilen prosedüre benzer.
2. Damar içine PE-10 tüp tanıtın. Kan akımı onaylayın geriye şırınganın pistonu hareket engellenmez.
3. Dobutamin infüzyonu 10 ul / dk ile başlar ve 60 ul / dk ile bitiriyoruz. Her adımda, infüzyon hızı 2 dakika ⁶ için korunur.
4. Son dobutamin dozdan sonra, anestezi, bir doz aşımı ile hayvan ötenazi.

VII. Veri Analizi

1. Veri analizi için, ilgi kayıtlı veri bölümünü seçin. Basınç sinyali stabil olduğu bir zaman aralığı dikkate aldığınızdan emin olun.
2. Kan Basıncı modülü Kurulum simgesini seçin. Basıncı sinyalinin seçilen türü belirtin.
3. Otomatik LabChartPro 7 yazılımı görüntüler demek, maksimumve HR için minimum değerler, sistolik basıncı (P _max), diyastolik kan basıncı (P _min), diyastol sonu basıncı (EDP), maksimal pozitif basınç gelişimi (dP / dtmax) ve maksimal negatif basınç gelişimi (dP / dt _min). Buna ek olarak, kalp parametrelerini basınç izleme üzerinde tasvir edilebilir.

Sonuçlar

Arteriyel basınç sinyali sistolik ve diyastolik kan basıncı ile tanımlanır. Basınç sensörü sol ventrikül içinde olduğunda, onun basınç (LVP) dalga diyastolik basınç sıfır bir damla ve ventrikül kasılma öncesinde sol atriyal kasılma (Şekil 1) ile karakterizedir. Mevcut durum, ketamin-ksilazin anestezisi normal farelerin 280 HR ± 24, 107 P _maks ± 8, 5 P _dk ± 1, 14 ± 2 EDP, dP / 6081 dt _max ± 365 ve dP / dt _min vardı 5230 ± 526.

Tartışmalar

Dobutamin ile tetiklenen ve kardiyak kateterizasyon ile takip Kalp stres testi zahmetli. Bununla birlikte, burada protokolü takip tanımlamak ve eğitim kısa bir süre ile, tek bir deneyde geçen yaklaşık bir saat içinde altı hemodinamik parametreleri değerlendirmek mümkündür.

Sunulan burada protokol kritik adımlar kan damarlarının cannulations vardır. Karotid arter kanülasyonu ile ilgili olarak, yapılan kesi üç doku arter katmanları, ve kateter geçişine izin vermek içi...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
			Reaktifler
PE-50/10	Warner Instruments	64-0752
İpek ipliği 6/0 HR17	Tagum	SN0713K
Xylacin 20 mg / ml	Laboratorio Centrovet
Ketamin 100 mg / ml	Sürükle Pharma
Sodyum klorür% 0.9 '	Lab Sanderson SA
Dobutamin hidroklorür	Sigma-Aldrich	D0676
Şırınga U-100 İnsülin 29G x ½ "	Terumo Medical Co
Mikro 11,5 cm Stil 7 Diseksiyon Forseps	LawtonMedizintechnik	09-0959
Graefe Forseps CVD 0.7mm 7cm	Lawton Medizintechnik	62-0263
Kelepçeleri Dieffenbach bulldog Cl Str 38 mm	Lawton Medizintechnik	60-010
Vannas Makas 8 cm Str Fh	Lawton Medizintechnik	63-1400
			Ekipman
SPR-671 Mikro-Tip Basınç kateter	Millar aletleri	840-6719
PKB-2000 Basınç Kontrol Ünitesi	Millar aletleri	880-0129
PowerLab 4/30	ADinstruments Pty Ltd	ML866
LabChartPro 7	ADinstruments Pty Ltd	MLU260 / 7
Legato200 İnfüzyon Pompası	KdScientific	KD-KDS210P
Tcat-2LV Sıcaklık kontrolörü ve izotermal ısıtma plakası	PhysiTemp aletleri A.Ş.
Medikal Oksijen kaynağı	Indura
Rektal prob	ADinstruments Pty Ltd	MLT1404
Trinoküler Mikroskop, eksenel aydınlatma	LW Scientific	Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF