Reeves'in Muntjac Geyisinde Gebelik Tanısı için Transabdominal Ultrason

Özet

Transabdominal ultrason, Reeves'in muntjac geyiğindeki üreme durumunu değerlendirmek için etkili, noninvaziv bir araç olarak tanımlanır. Bu yöntemler erken gebelik tanısı almak ve fetal canlılığı değerlendirmek için kullanılabilir. Bu tekniğin gelecekteki uygulamaları gebelik yaşının tahminini ve anne hastalığının fetal gelişim üzerindeki etkilerini içerir.

Özet

Reeves'in muntjac geyiği (Muntiacus reevesi) güneydoğu Asya'ya özgü küçük bir serviid türüdür ve şu anda prion hastalığı bulaşma ve patogenezinin potansiyel bir modeli olarak araştırılmaktadır. Dikey bulaşma, prion hastalığı da dahil olmak üzere bulaşıcı hastalıkları inceleyen araştırmacılar arasında ilgi çekici bir alandır ve bu araştırmalar anne enfeksiyonunun üreme performansı üzerindeki etkilerini değerlendirmek için etkili yöntemler gerektirir. Ultrasonografik inceleme, hamileliği teşhis etmek ve birçok hayvan türünde fetal sağlığı değerlendirmek için iyi kurulmuş bir araçtır^1-7, çiftlik rahim ağzı^8-19'unbirkaç türü de dahil olmak üzere , ancak bu teknik Reeves'in muntjac geyiğinde tanımlanmadı. Burada muntjac'ta gebeliği tespit etmek ve gebelik dönemi boyunca fetal büyüme ve gelişmeyi değerlendirmek için transabdominal ultrason uygulamasını açıklıyoruz. Bu prosedür kullanılarak, hamile hayvanlar doe-buck eşleştirmesini takip eden 35 gün kadar erken olarak tanımlandı ve bu, hamileliği düzenli aralıklarla güvenli bir şekilde izlemek için etkili bir araçtı. Bu çalışmanın gelecekteki hedefleri arasında gebelik yaşının tahmini için normal fetal ölçüm referanslarının oluşturulması, gebeliğin çeşitli aşamalarında gebeliğin teşhis edilmesine yönelik tekniğin duyarlılığının ve özgüllüğünün belirlenmesi ve fetal büyüme ve gelişimdeki varyasyonların farklı deneysel koşullar altında belirlenmesi yer alacaktır.

Giriş

Ultrasonografik inceleme, sığır 1, koyun^2,3,keçi^4,at^5,refakatçi hayvanlar^6,7ve diğer evcil hayvan türlerinde iyi tanımlanmış bir gebelik teşhisi yöntemidir. Bu görüntüleme yöntemi ayrıca, fallow geyiği 8-11 , kızıl geyik^12-16, Hokkaido sika geyiği 17 ve ren geyiği^18,19dahilolmak üzere çeşitli esir serviid türlerinde gebelik tespiti ve fetal yaş tahmini için değerli bir araç olarak tanımlanmıştır. Birçok durumda, ultrasonografi serum progesteron veya gebelikle ilişkili glikoprotein analizi^9,18gibi diğer gebelik algılama mekanizmalarına göre daha yüksek doğruluk oranları üretmektedir. Ayrıca, üreme sisteminin ultrasonografik görselleştirmesi fetal canlılık, gebelik yaşı ve aksi takdirde değerlendirilmesi zor olan gelişimsel anormalliklerin tanımlanması hakkında ek bilgi sağlayabilir. Üreme durumunu değerlendirmek için ultrasonografinin faydası, bu metodolojinin aktif üreme programlarının kullanıldığı diğer türlere uyarlanmalıdır.

Reeves'in muntjac geyiliği (Muntiacus reevesi) Güneydoğu Asya'ya özgü küçük bir serviid türüdür²⁰. Bu hayvanların üreme döngüsü kendi bölgelerinde iyi karakterize olmasa da, güney İngiltere'nin bazı bölgelerindeki yabani popülasyonların çalışmaları üreme düzenlerinin anlaşılmasını geliştirmiş²⁰. Çoğu cervid'in aksine, Reeves'in muntjac'ı yıl boyunca ürer, belirgin mevsimsel yaltaklanma zirveleri^20-22. Dişi muntjac tipik olarak 210 günlük bir gebelik dönemini takiben tek bir açık kahverengi doğurur ve 24 saat^20-22içinde doğum sonrası östrusa güvenilir bir şekilde girer. Bu doğum sonrası dönemde gebe kalmaz mı yaklaşık 24-25 gün sonra östrusa geri dönecektir²⁰. Esir durumlarda, üreme tipik olarak bir veya daha fazla bozulmamış erkek ile yapılan konutlarla elde edilir. Bu sistem tatmin edici gebe kalma oranları üretir ve personel için çok az teknik beceri gerektirir, ancak kesin üreme tarihlerinin belirlenmesi imkansız olmasa da zordur.

Muntjac, çok çeşitli diploid kromozom sayıları ve farklı türler arasında yüksek karyotipik çeşitlendirme oranı nedeniyle sitogenetik çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır²³. Bu hayvanlar şu anda prion hastalığı patogenez ve bulaşma modeli olarak da araştırılmaktadır, özellikle serviidlerde kronik israf hastalığının (CWD) dikey olarak bulaşmasının incelenmesine önem verilmektedir. Bir dizi farklı araştırma uygulamasında muntjac'ın önemi, mevcut araştırma prosedürlerini tamamlamak için geliştirilmiş üreme teknolojilerinin oluşturulması gerektiğini göstermektedir. Spesifik olarak, gebelik dönemini değerlendirmek için noninvaziv mekanizmalar, farklı deneysel koşullar altında üreme performansı ve fetal büyüme ve gelişmede kritik varyasyonları potansiyel olarak aydınlatabilir. Ayrıca, üreme tarihlerinin belirlenemediği durumlarda gebelik yaşının tahmininde gerçek zamanlı fetal ölçüm referanslarının geliştirilmesi potansiyel olarak değerli olacaktır. Önceki çalışmalar, serviid türlerinde gebe kalmanın yaklaşık aşamasını tahmin etmek için taç-rump uzunluğu (CRL), göğüs derinliği (CD) ve baş uzunluğu (HL) gibi fetal ölçümlerin kullanılmasına yönelik mekanizmaları^{tanımlamıştır 11-14, 16,17.} Ek olarak, bu çalışmalardan bazıları, iskelet mineralizasyonu veya fetal kalp atışı gibi belirli gelişimsel kilometre taşlarının ne zaman tanımlanabileceğini açıklayan kılavuzlar da oluşturmuştur^8-19. Bu veriler muntjac'ta üreme ultrason analizine rehberlik etmek için yararlı olsa da, incelenen diğer serviid türlerinin çoğu çok daha büyük vücut büyüklüğüne ve daha uzun gebelik dönemlerine sahiptir ve bu çalışmaların muntjac uygulamaları için çevirisel değerini azaltır.

Burada özetlenen protokol, gebeliğin teşhis edilmesi ve izlenmesi amacıyla kadın muntjac'ın transabdominal ultrasonografisini açıklar. Bu protokolün başarılı bir şekilde yürütülmesi erken gebelik tespitini ve fetal büyüme ve gelişmenin değerlendirilmeini kolaylaştırabilir. Bu teknik, küçük bir serviid modelinde bulaşıcı hastalıkların üremesini, rahim gelişimini veya dikey geçişini araştıran çalışmaların yürütülmesinde değerli uygulamalara sahiptir ve esir üreme operasyonlarında klinik amaçlar için de yararlı olabilir.

Protokol

1. Prosedürel Hazırlık

Açıklanan tüm hayvan prosedürleri, Intl. akredite bir kurum olan Laboratuvar Hayvan Bakımı Değerlendirme ve Akreditasyon Derneği (AAALAC) colorado Eyalet Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.

1. Muayeneden önce, rahatlama sağlamak ve uygun konumlandırmaya izin vermek için uygun sedasyon veya anestezi protokollerini kullanarak hayvanları hareketsiz hale getirin. Bir işleyici geyiğini dizginlerken, ikinci bir kişi hayvana sedasyon uygular.
   Not: Yazarlar bu türlerde etkili sedasyon sağlamak için aşağıdaki kombinasyonu bulmuşlardır: gluteal kaslarda kas içi olarak uygulanan butorphanol (0.45 mg/kg), azaperone (0.035 mg/kg) ve medetomidin (0.04 mg/kg).
2. Doe uyumlu işlemeye izin veren bir sedasyon düzlemine ulaştığında, onu bir muayene masasında veya bir V oluğunda dorsal veya yanal reumbency olarak konumlandırın. Rumenal içeriğin kusma ve aspirasyon riskini azaltmak ve işlem sırasında uygun havalandırmayı kolaylaştırmak için baş, boyun ve toraksı hafifçe (yaklaşık 20-30 °) yükseltin.
   Not: Çoğu serviid veya diğer geviş getiren türlerde, ayakta duran hayvanlarda abdominal ultrason yapılır; bununla birlikte, bu türün küçük boyutu ve davranışsal hususları muayene için ağır sedasyon gerektirir ve sternal konumlandırma bu nedenle daha zordur ve etkili görüntüleme tekniğinin önüne geçebilir. Hayvanın sternal ve lateral rekumbens arasında orta sırada konumlandırılması, kusma ve hipoventilasyon riskini azaltmak için ideal olabilir ve mümkünse düşünülmelidir. Herhangi bir recumbent pozisyonda, hayvanların nefeslerini dikkatlice izlemek ve muayeneyi derhal durdurmak ve regurgitasyon veya hipoventilasyon dikkateilirse hayvanı sternal rekumbense yerleştirmek önemlidir.
3. Gerekirse, dönüştürücünün ayak izi ile cilt arasında yeterli teması sağlamak için incelenecek karın bölgesinden saç kırpın.
   Not: Erken gebelikte, meme bezlerinin yakınındaki kaudal karın bölgesinde gebelik kanıtı tespit edilebilir. Muntjac'ın bu bölgesi tipik olarak tüysüzdür ve bu nedenle tıraş şu anda belirtilmeyebilir. Fetüs büyüdükçe ve rahim karında daha kraniyal bir pozisyon işgal etmek için şişildikçe, görüntülemeden önce saçın kırpılması gerekecektir. Jiletlerden kaynaklanan yırtılmalar veya elektrikli makaslardan kaynaklanan termal yaralanmalar da dahil olmak üzere ciltte herhangi bir mekanik travmaya neden olmamak için dikkatli olunmalıdır.
4. Ultrason ünitesini, teknisyenin muayeneyi baskın eliyle yaparken monitörü kolayca görselleştirmesini sağlayan bir konuma yerleştirin. Kaydedilen görüntüleri ve video döngülerini otomatik olarak etiketlemek için sisteme hayvan tanımlama bilgilerini (ad, kimlik numarası vb.)girin.

2. Transabdominal Üreme Ultrason Muayenesi

1. Kaudal karın bölgesine bol miktarda akustik kavrama jeli uygulayın.
2. Kaudal karın derisine 5-10 MHz kavisli doğrusal dönüştürücü yerleştirin, hemen pubis'e kranial ve pelvik boşluk içindeki yapıları değerlendirmek için yavaşça kraniyal yönde hareket ettirın. Muntjac'ın iki boynuzlu rahminin her iki boynuzu değerlendirmek için kaudal karın sol ve sağ kadranlarını tarayın.
   Not: Kapsamlı abdominal ultrason karaciğer, böbrekler, dalak, gastrointestinal sistem, idrar kesesi ve üreme sistemi de dahil olmak üzere tüm abdominal visseranın değerlendirilmesini içerir. Bu protokolün amaçları doğrultusunda, sadece gebeliğin incelenmesi ayrıntılı olarak tartışılacaktır; ancak çalışma süresince bu yapılarla karşılaşılması muhtemel olduğu için diğer kaudal karın organlarının normal görünümü tanınmalıdır. Bu konumda en sık görülen organlar arasında gastrointestinal sistem, idrar kesesi ve üreme yolu segmentleri bulunur. Büyük ve ince bağırsaklar, bağırsak duvarının karakteristik katmanlı görünümü ile tanımlanır. Lümen, sıvı, gaz, mukoza veya gıda parçacıklarını içerebilecek içeriğin türüne ve miktarına bağlı olarak telaffuz edilebilir veya telaffuz edilmeyebilir. İdrarla şişmediği sürece idrar kesesinin tanımlanması zor olabilir ve mesane duvarının katmanları bağırsakların katmanlarından önemli ölçüde daha az farklıdır. Rahim dışında, yumurtalıklar dişi muntjac'ın üreme sisteminin ultrasonunda da bulunabilir. Yumurtalıklar böbreklerin kaudal kutbuna yakın ovoid yapılar olarak görünecektir ve görünümleri östrous döngüsü boyunca değişebilir. Korteks içinde birden fazla olgun, sıvı dolu folikülün varlığı östrus düşündürücüdür.
   Not: Dönüştürücünün tarama başlığını döndürerek ve/veya "fanning" yaparak, yapılar enine veya sagittal düzlemlerde değerlendirilebilir.
   1. Gravid uterusu idrar kesesinden ayırt etmek için gerekirse, kaudal karına hafif basınç uygulayarak veya idrar kateteri yerleştirerek ve taramayı tekrarlayarak mesaneyi manuel olarak boşaltın.
      Not: Mesanenin manuel olarak ifade edilmesi sadece hayvan sternal veya dik pozisyonda olduğunda denenmelidir, bu da karın iç organlarının daha doğal bir yönelimini kolaylaştırır ve diğer yapılara travma riskini azaltır. Rahim, organın duvarının kalınlığı değerlendirilerek idrar kesesinden de ayırt edilebilir. Orta derecede şişmiş bir mesanenin tipik kalınlığı yaklaşık 1,4 mm²⁴, yazarlar ise muntjac'taki gravid uterusun daha kaslı duvarının genellikle 7-8 mm arasında ölçtüğünü bulmuşlardır.
      Not: Erken gebelik, tanımlanabilir fetal yapıların eksikliği nedeniyle kesin olarak teşhis edilmesi zordur ve aslında hamileliğin ilk belirtisi kaudal karında küçük bir sıvı cebi olabilir. Şu anda görülürse, gelişmekte olan embriyo rahim içindeki amorf yapıya hiperekoik, ovoid olarak görünecektir (Şekil 1).
3. Kontrastı ve görüntü ayrıntısını iyileştirmek için derinlik, sıklık ve kazançta gerektiği gibi ayarlamalar yapın.
   Not:Daha yüksek frekanslar, gelişmiş görüntü çözünürlüğü için gerekli olan daha kısa dalga boylarıyla ilişkilidir. Çoğu dönüştürücü, bir frekans aralığında (örneğin, 6-10 MHz)²⁴. Frekans ultrason ünitesindeki tarayıcı kontrolleri kullanılarak ayarlanabilir ve artan frekans daha net bir görüntüye neden olur. Artan frekans aynı anda ses dalgası penetrasyonunun derinliğini azaltır; bu nedenle, daha derin yapıları görselleştirmek için frekansı azaltmak gerekebilir, ancak çözünürlük tehlikeye atılabilir²⁴. Bu nedenle istenilen doku derinliğine ulaşmak için mümkün olan en yüksek frekansı seçmek önemlidir. Kazanç kontrollerindeki ayarlamalar, dokulardan dönüştürücüye dönen ses dalgalarının amplifikasyonu değiştirecek ve görüntüdeki kontrast derecesini^{etkileyecektir 24}. Kazanç, hiperekoik ve hipoekoik dokular arasında optimal kontrastın sağlandığı bir noktaya ayarlanmalıdır ve bu ayarların görüntülenen yapılara bağlı olarak ayarlanması gerekebilir.

3. Fetal Ölçümlerin Eldei

Not: Ultrason muayenesinden elde edilen fetal ölçümler için belirlenen referans aralıkları kullanılarak birçok evcil hayvan türünde gebelik yaşı tahmin edilebilir. En sık kullanılan ölçümler düz taç-rump uzunluğu (SCRL), göğüs derinliği (CD) ve baş uzunluğu (HL)^17'dir. Reeves'in muntjac geyiği içinde güvenilir gebelik yaşı kılavuzları geliştirmek için henüz yeterli veri toplanmasa da, bu referansları oluşturmaya başlamak için ölçümler toplanabilir. Fetal kalp hızı (FHR), diğer serviid ve ruminant türlerinde, gebelik belirli bir noktaya ilerledikçe doğrusal olarak artmaktadır (tipik olarak gebelik 60. gün civarında), bu sırada kalp hızı¹⁷azalmaya başlar. FHR, diğer ultrason gözlemleri ile birlikte gebelik yaşını tahmin etmek için kullanılabilir, ancak daha yaygın olarak fetal canlılık ölçüsü olarak kullanılır^17,24. FHR, Reeves'in muntjac'ında gözlemlenen çiftleşmeden 35 gün sonra hesaplanmıştır.

1. SCRL'yi ölçmek için, uterusu monitörde bulun ve tüm fetüsün sagittal görünümü elde edilene kadar dönüştürücünün konumunda ince ayarlamalar yapın (Şekil 2 ve 3). Görüntüyü dondurun ve kafatasının en dorsal yönü ile sakrum tabanı arasındaki mesafeyi ölçün (Şekil 2 ve 3).
2. CD'yi ölçmek için, fetüsün sagittal bir görünümünü elde edin (aynı görüntü SCRL'yi ölçmek için kullanılabilir) ve toraksın dorsal ve ventral yönleri arasındaki mesafeyi ölçmek için kullanılabilir (Şekil 2 ve 3).
3. HL'yi ölçmek için, SCRL ve CD ölçümleri için açıklandığı gibi fetüsün sagittal görünümünü kullanarak, oksipital tepe ile burun tabanına olan mesafeyi ölçün (Şekil 2 ve 3).
4. Fetal kalp atış hızını hesaplamak için ritmik kasılmalarını görselleştirerek fetüsün torasik boşluğu içindeki kalbi tanımlayın. 1 dakika içinde meydana gelen kasılmaların (kalp atışları) sayısını sayarak kalp atış hızını hesaplayın.
   Not: Kullanılan ultrason ünitesi Doppler yeteneklerine sahipse, bu özellik kalbi diğer spesifik olmayan fetal hareketlerden ayırt etmeye yardımcı olmak için kullanılabilir.
5. Kaydedilen tüm görüntülerin ve video döngülerinin hayvan adı veya numarası, tarih, ölçümler ve uygun yapı etiketleri de dahil olmak üzere gerekli tüm tanımlayıcı bilgileri içerdiğini doğrulayın.

4. Prosedürel Sonuçlar ve İyileşme

1. Yumuşak bir bez veya kağıt havlu kullanarak hayvanın karnındaki tüm ultrason temas jelini çıkarın. Depolamadan önce jeli dönüştürücüden temizleyin.
2. Adım 1.1'de açıklanan sedasyon protokolünü kullanıyorsanız, medetomidinin etkilerini tersine çevirmek için atipamezole deri altından 0.25 mg/ kg dozda verin. Bir antagonistin mevcut olduğu farklı bir sedasyon protokolü kullanıyorsanız, iyileşmeyi hızlandırmak için prosedürün sonunda yayınlanan dozajlara göre bu ajanı hayvana uygulayın.
3. Muntjac'ı sternal rekumbency yumuşak yataklı bir yüzeye yerleştirin, rumenal içeriğin kusma ve aspirasyon riskini azaltmak için kafa hafifçe yükselmiş. Hayvanı tamamen iyileşene ve yardım almadan muhafazanın etrafında ambüle olana kadar yakından izleyin.

Sonuçlar

Burada açıklanan protokol kullanılarak, Reeve'in muntjac geyiğinde minimal invaziv tekniklerle gebelik teşhis edilebilir ve izlenebilir. Gebeliğin yazarlar tarafından tespit edilebileceği en erken zaman noktası, gözlenen çiftleşme davranışından yaklaşık 35 gün sonraydı.

Gebeliğin erken evrelerinde kaudal karın bölgesinde anekoik alan olarak tanımlanan sıvı dolu bir rahim görselleştirilerek gebelik tanısı konuldu. Rahim içinde, gelişmekte olan embriyo az tanımlan...

Tartışmalar

Bu protokol, Reeves'in muntjac geyisinde gebelik tanısı için transabdominal ultrasonografi uygulamasını açıklar. Diğer ultrason çalışmaları ile tutarlı olarak, uygun ekipman ve teknik yeterlilik, muntjac doe'nun başarılı bir üreme muayenesi için zorunludur. Temel memeli anatomisinin dikkatli bir şekilde gözden geçirilmesi, tanısal ultrasonun fiziksel ilkeleri ve abdominal visseranın tipik ultrasonografik görünümü yanlış tanıların azaltılmasına yardımcı olacaktır. Ayrıca, uygun dönü?...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)	Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa	NADA 135-780
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg)	ZooPharm
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg)	ZooPharm
Ultrasound contact gel	Medline, Mundelein, Illinois	MDS092005
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg)	Orion Corporation, Espoo, Finland	NADA 141-033
V-trough (optional)	N/A	N/A	Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough
Electrical clippers or razor blades for hair removal	Oster, McMinnville, Tennessee	78005-140
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound	E.I. Medical Imaging, Loveland, CO	Ibex Pro
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array	E.I. Medical Imaging, Loveland, CO	290420
3 ml syringes	Covidien	1.18E+09
22 G needles	Covidien	8.88E+09