Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
* Bu yazarlar eşit katkıda bulunmuştur
Burada, akupunktur deneyleri sırasında sıçanları etkili bir şekilde hareketsiz hale getirmek için bir sıçan ceketi kullanarak geliştirilmiş bir süspansiyon fiksasyon yöntemi sunuyoruz. Ayrıca, bu fiksasyon aparatının yapısı ve uygulaması ile elektroakupunktur tedavisinde kullanımına ilişkin talimatlar ve değerlendirmeler açıklanmaktadır.
Temel deneysel akupunktur araştırmalarında, sıçanlar genellikle laboratuvar hayvanları olarak kullanılır. Bununla birlikte, sabit bir duruş sürdürmeleri zordur. Elektroakupunktur prosedürleri sırasında, sıçanların uygun şekilde immobilizasyonu esastır. Şu anda anestezi fiksasyonu, yüksek platform fiksasyonu, bağlama fiksasyonu ve kendi kendine yapılan bir sıçan ceketi ile fiksasyon dahil olmak üzere çeşitli sıçan fiksasyon yöntemleri kullanılmaktadır. Bununla birlikte, bu yöntemlerin, deneyin verimliliğini ve çalışabilirliğini bir dereceye kadar etkileyebilecek sınırlamaları vardır. Bu protokol, sıçan giysileri kullanarak sıçanları askıya almak ve sabitlemek için bir yöntem sunar. İlk olarak, sıçanlar, karanlık ve oyuk tercihlerinden yararlanarak vücut şekillerine uygun sıçan ceketleri giydirilir. İğneleme işlemi daha sonra sıçanlar sıçan kıyafetleri giydikten sonra gerçekleştirilebilir. Askıya alındığında, sıçanlar uzuvları hareket edemediği için nispeten hareketsizdir. Bu fiksasyon yöntemi sadece ekonomik ve kullanıcı dostu faydalar sağlamakla kalmaz, aynı zamanda sıçanların rahat bir pozisyonda stabil ve güvenilir bir şekilde sabitlenmesini sağlar. Ayrıca zaman tüketimini, deneysel alanı ve insan gücü kaynaklarını etkili bir şekilde en aza indirir. Ek olarak, bu yöntem sıçanlarda akupunktur için kullanılan çoğu akupunktur noktasının açığa çıkmasına izin verir. Bu makale öncelikle, özel olarak tasarlanmış bir sıçan ceketi, yükseltilmiş bir sabitleme rafı ve bunların bağlantı yapılarını kapsayan cihazın bileşimine odaklanmaktadır. Ek olarak, sıçan elektroakupunktur prosedürlerinde sıçan giysisi bazlı süspansiyon fiksasyon yönteminin uygulanmasını göstermek için açıklayıcı bir örnek sunulacaktır.
Akupunktur, hastalıkları önlemek ve tedavi etmek için belirli akupunktur noktalarında veya diğer pozisyonlarda iğneleme ile karakterize edilen geleneksel bir tedavidir. Elektroakupunktur, filiform iğneleri elektriksel stimülasyon1 ile birleştirir, bu da ilgili parametreleri ayarlayarak stimülasyon miktarı üzerinde hassas kontrol sağlar ve akupunktur tedavisininstandardizasyonunu teşvik eder 2. Son yıllarda, elektroakupunktur mekanizmaları üzerine yapılan araştırmalar genişlemeye ve derinleşmeye devam etmiştir3,4, bu da elektroakupunktur5 mekanizmalarına odaklanan çalışmalarda yıllık bir artışa yol açmıştır.
Elektroakupunktur ile ilgili temel araştırmalarda, sıçanlar en sık kullanılan hayvanlardır. Elektroakupunktur tedavisi sırasında, sorunsuz bir prosedür sağlamak için alıcı hareketsiz kalmalıdır. İnsan deneklerle yapılan klinik deneylerden farklı olarak, hayvan deneylerinde kullanılan küçük hayvanlar, 15-30 dakikalık uzun elektroakupunktur prosedürleri sırasında komutları bilinçli olarak takip edemezler. Bu, araştırmacılara istikrarlı ve güvenilir bir fiksasyon elde etme konusunda birincil bir zorluk sunar. Yanlış fiksasyon, hayvanlarda anksiyete, depresyon ve korku gibi olumsuz duygulara yol açabilir6, bu sadece sıçanlar için yaralanma riskini ve deney personeli için ısırılma şansını artırmakla kalmaz, aynı zamanda araştırma sonuçlarının istikrarını ve ikna ediciliğini de etkiler.
Önceki çalışmalarda, araştırmacılar akupunktur veya elektroakupunktur operasyonlarından önce sıklıkla anestezi fiksasyonu7, yüksek platform fiksasyonu8, bağlanma fiksasyonu 6,9 veya sıçan ceketi fiksasyonu10 kullandılar. Bununla birlikte, anestezinin vücut11 ve beyin fonksiyonu12 üzerindeki etkileri göz önüne alındığında ve klinik vakalarda bilinçli hastalara akupunktur yapıldığı göz önüne alındığında, anestezi araştırma sonuçlarını bir dereceye kadar etkileyebilir. Bu nedenle, anestezi fiksasyonu ile karşılaştırıldığında, sıçanların uyanık durumda rahat bir şekilde sabitlenmesi daha iyi bir seçenektir.
Bununla birlikte, anestezi uygulanmamış durumda, sıçanlarda10 sıçan kürkünün kaplanması nedeniyle sınırlı akupunktur noktası maruziyeti, operasyonu gerçekleştirmek için en az iki kişinin gerekliliği 13, ayarlanamayan fiksatör boyutu14 veya zorunlu pozisyondasıçanların stresli durumu 6 dahil olmak üzere çeşitli fiksasyon yöntemleri de kendi sınırlamalarına sahiptir. Bu teknik sorunları ele almak için, sıçan vücudunun çoğu yerinde akupunktur manipülasyonu için uygun bir sıçan ceketi ve bir sabitleme rafı tasarladık. Bu, araştırmacıların sıçanlarla akupunktur prosedürlerini verimli bir şekilde gerçekleştirmelerine yardımcı olabilir.
Bu protokolün gerekçesi şu şekildedir: ilk olarak, sıçanların ceketindeki kapalı başlık, sıçanların karanlığa ve yuva açmaya olan doğal eğiliminden yararlanır ve böylece faaliyet alanlarını kısıtlar. İkincisi, sıçanların uzuvlarının eklemlerine yakın bağlama ipleri, hareketlerine belirli sınırlamalar getirerek fiziksel sıkıştırma kısıtlaması sağlar. Bununla birlikte, sıçanlar ceketi giyerken bile yatay olarak zıplayabilir ve hareket edebilir. Son olarak, sıçanlar asılı kaldıklarında sabit bir kuvvet noktası olmadan yere temas edemedikleri için, sıçan ceketine bir süspansiyon sabitleme cihazı ekleyerek hareketlerini daha da kısıtladık ve iğnenin tutulmasını sağladık. Sabitleme cihazının bileşimi Şekil 1'de gösterilmiştir.
Şekil 1: Sıçan ceketi ve süspansiyon fiksasyonunun şematik diyagramı. (A) Sıçan ceketinin düz görünümdeki genel görünümü. (B) Sıçan ceketinin üç boyutlu görünümü. (C) Baş ve arka beldeki akupunktur noktalarına yakın bir kesi ile özel olarak tasarlanmış sıçan ceketi. (D) Yükseltilmiş rafta aynı anda asılı duran birden fazla sıçanın çizimi. 1: Kumaşın genel görünümü; 2: Ön ayak çıkışı; 3: Arka bacak çıkışı; 4: İp bağlama; 5: Dikişten sonra oluşan boşluk; 6: Baş akupunktur noktalarını ortaya çıkarmak için kesi; 7: Sırt ve bel akupunktur noktalarını ortaya çıkarmak için kesi. 8: Dikiş pozisyonu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Bu çalışmada sıçanlar üzerinde yapılan tüm prosedürler, Çin Halk Cumhuriyeti tarafından resmi olarak kabul edilen Ulusal Laboratuvar Hayvanı Refahı ve Etik İnceleme Kılavuzları Standardı'na (2018) ve Ulusal Akademiler Yayınları'ndan Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na (15) bağlı kalmıştır. Bu protokol üç ana adımdan oluşmaktadır. İlk olarak, sıçan ceketleri, farklı ağırlıklara sahip sıçanların bireysel vücut şekillerine göre uyarlanır ve takılır. Daha sonra, akupunktur manipülasyonu standart prosedürler izlenerek gerçekleştirilir. Son olarak, sıçanlar ceketlerinde asılı kalırken, iğneler aynı gruptaki sıçanlar arasında eşzamanlı müdahale ihtiyacını karşılamak için yerinde kalır.
1. İğneleme öncesi hazırlık
Şekil 2: Sıçan vücut şekli ve eşleşen sıçan ceketi boyutunun karşılık gelen diyagramı. Diyagramda, a parametresi, üst ekstremiteler ile sıçanın gövdesi arasındaki eklemin arkasındaki enine mesafeyi temsil eder. Bu değer, sıçan ceketinin üst ekstremiteleri için penetran delikler arasındaki boşluk ölçümü olarak kullanılır. Benzer şekilde, b parametresi, sıçanın iki taraflı alt ekstremitelerinin gövdeye bağlandığı sırttaki enine mesafeyi temsil eder. Bu ölçüm, sıçan ceketinin alt ekstremiteleri için delici deliklerin aralığını belirler. C parametresi, sıçanın ceketinin kumaşı için genişlik ölçümü olarak kullanılabilen, sıçanın karnının en kalın kısmının çevresini belirtir. D parametresi, sıçanın koltuk altından iliumunun önüne kadar olan mesafeyi temsil eder ve ceketin üst ve alt delikleri arasındaki uzunlamasına mesafeyi belirler. E parametresi, sıçanın burun ucundan kuyruğunun tabanına kadar olan uzunlamasına mesafeye karşılık gelir ve sıçanın ceket bezi için uzunluk ölçümü görevi görür. F parametresi, üst ekstremite ile sıçanın gövdesini birbirine bağlayan artikülasyonun çevresini gösterir ve üst ekstremitelerin içinden geçtiği deliğin çevresi olarak hizmet eder. G parametresi, alt ekstremiteleri ve sıçanın gövdesini birbirine bağlayan eklemin çevresini temsil eder ve alt ekstremitelerin geçtiği deliğin çevresini belirler. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Vücut Ağırlığı (g) | Vücut Şekli Parametreleri (cm) | ||||||
a | b | c | d | e | f | g | |
220 | 6.0 | 7.0 | 15.0 | 8.0 | 19.0 | 5.0 | 7.0 |
300 | 7.0 | 7.5 | 17.0 | 10.0 | 21.0 | 6.0 | 8.0 |
400 | 8.0 | 8.5 | 19.0 | 11.5 | 23.0 | 6.5 | 9.0 |
520 | 8.0 | 10.0 | 20.0 | 12.5 | 26.0 | 7.0 | 9.5 |
Tablo 1. Farklı vücut ağırlıklarına sahip sıçanların vücut şekil parametrelerinin ölçüm sonuçları.
Şekil 3: Sıçan ceketinin fiziksel görünümünü ve kullanımını gösteren diyagram. (A) Sıçan ceketinin düzlem dış görünümü. Sıçanın ceketinin şekli, sıçanın üst ve alt uzuvlarının geçmesi için sol ve sağ taraflarda ayrı açıklıklar bulunan dik açılı bir yamuğu andırır. (B) Sıçan ceketinin katlanmamış dış görünümü. Başlığın kapatılması, fareleri girmeye ikna etmek için çok önemli bir bileşen görevi gören yarı kapalı bir boşluk oluşturur. (C) Ceket giymiş bir farenin yandan görünümü. Sıçanın uzuvları giysideki açıklıklardan geçtikten sonra, kayışlar gövdenin ventral yüzeyinden geçer ve uygun gerginlikle arkaya güvenli bir şekilde sabitlenir. Bu, sıçanın nispeten hareketsiz olmasını sağlar. (D) Sıçan ceketi giymiş bir sıçanın karın görünümü. Ceketin ventral yüzeyi, sıçanın karın derisini açığa çıkararak ventral noktalarda akupunktur için kolay erişim sağlar. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Video 1: Fare ceketini giyiyor. Bu video, sıçanı ceketin içine giydirmenin tipik bir sürecini göstermektedir. Bu videoyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: Yükseltilmiş sabitleme rafının fiziksel görünümünü ve kullanımını gösteren şema. (A) Yükseltilmiş sabitleme rafı. Bu raf, esas olarak her tepsiye kaynaklanmış iki dikey demir sütundan (60 cm uzunluğunda) ve zemine paralel yerleştirilmiş uzun bir yatay demir çubuktan (145 cm uzunluğunda) oluşur. Yatay çubuğu dikey sütunlarla aynı yükseklikte sabitlemek için vidalar kullanılır. (B) Sabitleme rafında sıçan süspansiyonu. Sıçan ceketlerini giyen sıçanlar, sıçan başına iki S-şekilli kanca kullanılarak sabitleme rafına güvenli bir şekilde sabitlenir. (C) Birden fazla sıçanda eşzamanlı elektroakupunktur tedavisi. Kuyruk hareketinden kaynaklanan herhangi bir potansiyel paraziti önlemek için, sıçanlar arasında bir sıçanın kuyruğunun uzunluğuna eşdeğer uygun mesafenin korunması gerekiyordu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
2. Elektroakupunktur prosedürü
Video 2. Bel bölgesinde iğneleme akupunktur noktaları. Bu video, sıçanın ceket içindeki giydirilmesini, akupunktur iğnelerinin beldeki akupunktur noktalarına yerleştirilmesini ve ardından bir elektroakupunktur aparatının bağlanmasını kapsayan kapsamlı ve tutarlı prosedürü göstermektedir. Bu videoyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Video 3. Karın ve alt ekstremitede iğneleme akupunktur noktaları. Bu video, sıçanın ceket içindeki giydirilmesini, akupunktur iğnelerinin karın ve alt ekstremitede bulunan akupunktur noktalarına yerleştirilmesini ve ardından bir elektroakupunktur aparatının bağlanmasını kapsayan kapsamlı ve tutarlı prosedürü göstermektedir. Bu videoyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Video 4. Sıçan ceketinin çıkarılması. Bu video, ceketi fareden çıkarmanın geleneksel uygulamasını göstermektedir. Bu videoyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Bu deneyde, elektroakupunktur tedavisi için toplam 12 sıçan seçildi ve fiksasyon yöntemi altındaki reaksiyonları gözlendi ( Tablo 2'de gösterildiği gibi). 12 sıçan arasında sadece 1 sıçan, 15 dakikalık elektroakupunktur iğnesi tutma süresi boyunca yoğun mücadele sergiledi. Güçlü hareketlerinin bir sonucu olarak, iğne yarıda çıktı ve toplam sıçan sayısının% 8.33'ünü oluşturdu. Bu sonuç, kullanılan fiksasyon yönteminin genellikle kayda değer bir stabilite ve güvenil...
Elektroakupunkturun bilişsel bozukluk16,17, miyokard hasarı18 ve inflamatuar ağrı 19 gibi çeşitli hastalıklar üzerinde iyi terapötik etkileri olduğu gösterilmiştir. Etki mekanizmasını anlamak için, öncelikle fareler kullanılarak hayvan deneyleri yapılmıştır. İşlemler sırasında hayvanların sabitlenmesi, doğru sonuçlar için çok önemlidir. Birçok çalışmada hayvan anestezisini takiben ...
Tüm yazarlar potansiyel çıkar çatışması olmadığını beyan etmişlerdir.
Yazarlar, bu belgede Şekil 2'yi oluşturmak için kullanılan materyali yetkili lisans kimliği: URUUO5699e ile sağladığı için Araştırmacılar Evi'nin Figdraw bilimsel araştırma çizim platformuna şükranlarını sunarlar. Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81873380, 82074566), Hubei Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (2022CFCO43) ve Ulusal Geleneksel Çin Tıbbı İdaresi'nin Ulusal Ünlü Geleneksel Çin Tıbbı Miras Stüdyosu İnşaat Projesi ([2022] No.5, [2022] No.75) tarafından sağlanan hibelerden destek almıştır.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiDaha Fazla Makale Keşfet
This article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır