Bu çalışma, Amerikan Kalp Derneği predoctoral Bursu 788.808-41.910, NIH-NINDS NS-066.001 ve NS-055.832 ve Araştırma NIH Eğitim Grant 1T32DC010775-01 İşitme Merkezi tarafından desteklenmiştir.

1. Başlarken: Gerekli Cerrahi Aletler Bkz: Şekil 4 <ol><li> Diş matkap (kavo Diş Ekipmanları, Model: UMXL-TM), 2-bit matkap ve 3-bit matkap </li><li> İki ~ 30 ölçü hipodermik iğneleri </li><li> Dişli cımbız, kavisli ucu isteğe bağlı (yararlı ama önemli değil olabilir) </li><li> İki ince uçlu cımbız </li><li> tel kesme </li><li> Dikiş ipliğinin </li><li> Mikro makaslar </li></ol> 2. Cerrahi Pencere oluşturma <ol><li> Anestezi: Prosedürler NIH kurallarına uygun ve UC Irvine Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. Kobay 295-400 g ağırlığında erkek Sprague Dawley fareleri (Charles River Laboratories, Wilmington, MA, ABD) ve aşağıdaki anestezi uygulanarak kullanılmalıdır şunlardır: <ol><li> H atropin bir kas içi enjeksiyon (0.05 mg / kg, color) ardından sodyum pentobarbital bolus (55 mg / kg vücut ağırlığı) ile sıçan intraperitoneal enjekteind bacak ve deri altı suda% 5 dekstroz uygulanan 3.0 cc. </li><li> Sodyum pentobarbital (27.5 mg / kg, color) enjeksiyon gerektiği gibi tamamlayın. Aşağıdaki işlemleri sırasında kornea korumak için gözleri bir oftalmik antibiyotik merhem yönetmek. Her altı saatte bir anestezi sırasında solunum salgıları azaltmak% 5 dekstroz (3 ml) ve atropin (0.05 mg / kg, color) yönetmek. Tedbir vücut bir rektal prob ile sıcaklık, ve kendi kendini düzenleyen termal battaniye ile 37 ° C de vücut ısısını korumak. </li></ol></li><li> Ya tarafından MCA bulun: <ol class="lalpha"><li> Inceltme 2 x 2 mm görüntüleme / kafatası neredeyse saydam oluncaya kadar bir boyutu HP 3 matkap ucu kullanarak somatosensoriyel korteks üzerinde pencere görselleştirme ve daha sonra bir boyutu HP 2 matkap ucu kullanarak tam şeffaflık için inceltme. MCA konumu bu pencere ve ilk segmentinin yaklaşık konuma kullanılan proksimal yörünge ile görülebilir. MCA genellikle bu çapraz çalışırdorsal yöne ventral / kaudal (örneğin, bakış cerrah bakış açısından sol hemisfer izlerken üst / sağ alta doğru sol) bir rostral pencere. Gözlemci M1 segmentinde (kortikal dallanma proksimalinde) ilk pencereden görünen distal dalları dayalı bulunması için tahmin nerede cerrahi camlar üzerinde oluşturulabilir. MCA erişmek için kaldırılır kafatası miktarını en aza indirmek için, görüntüleme / görselleştirme pencere yakın yerleştirilmiş, ancak cerrahi penceresinden ayrı olmalıdır. Veya </li><li> Küçük bir cerrahi pencere yaklaşık 3 mm ön ve yakın kemer kürsü 30,33,34 için foramen ovale veya mandibular sinir lateral 1 mm, yerleştirilmelidir. Etkili bir MCA (ayrıca M1 kademeli olarak da bilinir) ve kök erişmek amacıyla, temporal kas geçici kafatası yüzeyinden dışarı doğru yansıtılır. (Not: uzun süreli sağkalım ameliyatları durumunda, bizim laboratuar deneyimi tha oldutemporal kas onun çapa bağlı kalmasını sağlayarak t, kas sağlıklı beslenme davranışları ve vücut ağırlığının etkili bakım sağlayan, kafatası yüzeyi yeniden tavlama olacaktır. </li></ol></li><li> Başlangıç ​​kortikal şube yatıyor tahmin etmek için görüntüleme penceresinin rostral, ventral köşesi (bir referans olarak kullanarak varsa) MCA izleyin. </li><li> (Bu cerrahi pencere olarak bakın) yeni bir ince-kafatası bölgesi oluşturma biraz rostral ve görüntüleme penceresi (bir referans olarak kullanılıyorsa) MCA M1 segmentinde (ön-kortikal dallanma) olması gereken yerde ventral. ÖNEMLİ NOT: (bir referans olarak kullanılıyorsa) ve cerrahi pencere görüntüleme penceresi arasında yaklaşık 2 mm boşluk bırakın. </li><li> Sadece Şekil 1A ve 1B &#39;de gösterildiği gibi arter kortikal dallanma önce MCA kök (ayrıca M1 kademeli olarak da bilinir) bulun. </li><li> Tahmini M1 segmentinde yer üzerinde kafatası ince, bir boyutu HP-3 matkap ucu kullanarak. Netamamen saydam oluncaya kadar kafatası biraz şeffaf hale, daha hassas boyutu HP-2 matkap ucu ve ince kafatası geçin. Cerrahi pencere alanı damar görmek ve bu noktada M1 yerini değerlendirmek ve 2-3 mm M1 segmentinin uzunluğu iki tarafında var öyle ki pencere (tamamlamak için yeterli ince olduğunda görsel onaylayın bu sağlar ekleme için oda ve MCA her iki tarafında dikiş iğnesinin çıkış). </li></ol> ÖNEMLİ NOT: kafatası kalınlığı plastik wrap benzer olduğunda incelme durdurun. Matkap kafatası ve dura ile bozulursa damar rüptürü olacak. Kafatası Öte yandan yeterince ince değilse, tıkanma çıkarmadan zor olacaktır ve korteks veya artere hasara neden olabilir. <ol start="7"><li> 30 ayar (30 G) derialtı iğne alın ve tırtıklı cımbız kullanarak, iğne ucu bükün. </li><li> Delinme kafatası bakımı için 30 G iğne kullanıntam doğrudan bir arter üzerinde bir alanda. Cımbız kafatası kavramak ve dikkatli cerrahi penceresinin inceltilmiş alanı kaldırmak için izin vermek için bu delinme deliği kullanın. </li><li> , Yeni bir 30 G ihtiyacı alın Adım 6&#39;da olarak ucu viraj ve dikkatle dura çıkarın. </li></ol> NOT: dura Kesme o kabuğu geri ve MCA düşük basınç sonucunda, daha belirgin hale gelecektir neden olur. 3. MCA kapatılmasıy <ol><li> 3-5 mm yaklaşık dikiş iğnesi (yuvarlak 3/8, 16 mm dikiş iğnesi) aşağı kesim yarım eğrisi ters Döşeme tel kesiciler kullanın. </li><li> Şekil 4E de resimde gösterildiği gibi kesilmiş dikiş iğnesi geçirin. ÖNEMLİ NOT: dikiş ipliğinin her iki ucunda eşdeğer uzunluğu vardır ve böylece iğneyi dişli olması önemlidir. Bu iki iplik çekerek aynı zamanda M1 biter sağlayan, iğne sonra MCA etrafında iki knot bağlamak için iplik iki uzunlukları bırakarak ücretsiz kesilebilir. </li><li> Tırtıklı cımbız M1 dikiş iğnesi kayma kullanın. Korteks hasarı en aza indirmek için mümkün olduğunca sığ kadar kalan ama aynı zamanda MCA çok fazla yük kaçınarak, MCA 0,5-1 mm kadar mesafe ile yerleştirin. </li><li> Dikiş iğnesi bu MCA altında olduğu gibi diğer taraftan çıktığı zaman, beslemeye devam ya da dikiş diğer ucunu iterken karşı taraftan dikiş iğne ucu çekmek için (aşağıda gösterildiği gibi) ince bir ucu cımbız kullanın tırtıklı ucu cımbız ile iğne. </li><li> Dikiş iğnesi tamamen MCA altında geçirilir ve çıkardı sonra, iplik uzunluğu MCA her iki tarafında eşit olana kadar dikiş iğnesi veya iş parçacığı üzerinde çekmeye devam edin. Bu MCA üzerindeki gerilimi en aza indirmek için beslenen olduğu gibi iplik bastırarak diş arter altında geçerken rüptürü önlemek için yararlı olabilir. </li><li> Dikiş iğnesi yakın iplik kesin. </li><li> İki çıkan dikiş ipliğinin çözmek için her iki ince nokta cımbız kullanınkadar da değmeyen MCA altında sinirli iki bağımsız konuları olduğunu. İdeal konuları onlar MCA altında geçmek dışında 1 mm hakkında olacak. </li><li> Knot arasındaki boşluk ~ 1 mm transeksiyonu için yer açmak için iddia girişiminde MCA etrafında konuları ile iki ayrı knot (iki bitişik harfler) bağlamak için her iki ince nokta cımbız kullanın. </li></ol> NOT: İç sham kontrol isteniyorsa, gevşek bu yüzden hiç MCA daraltmak olmadığını tıkanıklığı knot bırakarak tıkanıklığı hazırlamak ve knot sıkma ve damar kesme önce veri toplamak. Bu önce tıkanıklığına şey alıcı önlemek ama daha sonra knot sıkma sağlayacak kadar iplik bırakmak iplik kesin. Bu şekilde, herhangi bir temel görüntüleme veya veri toplama tıkanma ve kısa bir süre içinde, uygun bir zaman noktasında sıkılır knot aynı cerrahi işgali ile tüm gerçekleştirilebilir. <ol start="9"><li> Knot olabilir sonraen sıkı, iki knot arasında M1 transect için mikro makas kullanın çekti. </li><li> :, Uzun vadeli hayatta kalma çalışmaları durumunda <ol class="lalpha"><li> Dikiş steril cerrahi iplik ile yeniden kafa derisi flep kazıma veya steril yara klipleri kullanarak doku sabitleyin. </li><li> Yara alanı (basitrasin merhem olarak) ve sistemik ampisilin profilaktik enjeksiyonu (150 mg / kg, IM) tarafından lokal antibiyotik uygulayın. </li><li> Konu gözlere bir oftalmik antibiyotik merhem yönetmek hala anestezi iken. </li><li> Anestezi sırasında solunum salgıları azaltmak için ek atropin (0.05 mg / kg IM) yönetmek. </li><li> Cerrahi sonuç ve ağrı kontrolü için tekrar ertesi sabah (~ 12 saat sonra) de subkutan fluniksin meglumine (1.1 mg / kg) enjekte edilir. </li><li> Hayvanların burun (bu hayvan uyanık kadar nefes kolaylaştırır) eğim üzerindeki kuyruk üzerinde böyle bir kuru, sıcak, eğimli yüzeye hayvan yerleştirin. &lt;/ Li&gt; <li> Uyanık ve kendi başına güvenli bir şekilde hareket kadar hayvan izleyin. </li><li> Hayvan vivaryum geri döndü sonra, hayvanın aktivite, görünümü, seslendirme ve beslenme ve davranış içme günlük olarak takip edilmelidir. </li></ol></li></ol> 4. Ötenazi <ol><li> Her deneyin sonunda, sıçanlar pentobarbital sodyum (2-3 mi, periton içine) ile ötenazi edilmelidir. </li></ol>

<ol>
	<li>Caplan, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Caplan's Stroke, A Clinical Approach. , (2009).</li><li>Blumenfeld, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroanatomy Through Clinical Cases. , (2002).</li><li>Roger, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2011+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. , (2011).</li><li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathobiology+of+ischaemic+stroke:+an+integrated+view.">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ischemic+stroke:+overview+of+major+experimental+rodent+models,+pathophysiology,+and+therapy+of+focal+cerebral+ischemia.">Acute ischemic stroke: overview of major experimental rodent models, pathophysiology, and therapy of focal cerebral ischemia.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 87, 179-197 (2007).</li><li>Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Busto, R., Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cortical+infarction+in+the+rat.+2.+Acute+and+subacute+alterations+in+local+glucose+utilization.">Photochemically induced cortical infarction in the rat. 2. Acute and subacute alterations in local glucose utilization.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 6, 195-202 (1986).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis.">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Ann. Neurol. 17, 497-504 (1985).</li><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema,+I:+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area.">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese Journal of Stroke. 8, 1-8 (1986).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Howells, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+strokes+for+different+folks:+the+rich+diversity+of+animal+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 30, 1412-1431 (2010).</li><li>Trueman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model:+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection.">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Transl. Stroke Res. 2, (2011).</li><li>Dirnagl, U., Waiz, W. o. l. f. g. a. n. g. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuromethods. , (2010).</li><li>Cirstea, M. C., Levin, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+strategies+for+reaching+in+stroke.">Compensatory strategies for reaching in stroke.</a> Brain. 123 (Pt. 5), 940-953 (2000).</li><li>Nakayama, H., Jorgensen, H. S., Raaschou, H. O., Olsen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+age+on+stroke+outcome.+The+Copenhagen+Stroke+Study.">The influence of age on stroke outcome. The Copenhagen Stroke Study.</a> Stroke. 25, 808-813 (1994).</li><li>Nudo, R. J., Plautz, E. J., Frost, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+adaptive+plasticity+in+recovery+of+function+after+damage+to+motor+cortex.">Role of adaptive plasticity in recovery of function after damage to motor cortex.</a> Muscle Nerve. 24, 1000-1019 (2001).</li><li>Chiganos, T. C., Jensen, W., Rousche, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+response+dynamics+during+focal+cortical+infarction.">Electrophysiological response dynamics during focal cortical infarction.</a> J. Neural Eng. 3, 15-22 (2006).</li><li>Traversa, R., Cicinelli, P., Bassi, A., Rossini, P. M., Bernardi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+of+motor+cortical+reorganization+after+stroke.+A+brain+stimulation+study+with+focal+magnetic+pulses.">Mapping of motor cortical reorganization after stroke. A brain stimulation study with focal magnetic pulses.</a> Stroke. 28, 110-117 (1997).</li><li>Weber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+prediction+of+functional+recovery+after+experimental+stroke:+functional+magnetic+resonance+imaging,+electrophysiology,+and+behavioral+testing+in+rats.">Early prediction of functional recovery after experimental stroke: functional magnetic resonance imaging, electrophysiology, and behavioral testing in rats.</a> J. Neurosci. 28, 1022-1029 (2008).</li><li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model.">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+admission+perfusion+computed+tomography+and+qualitative+diffusion-+and+perfusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+in+acute+stroke+patients.">Comparison of admission perfusion computed tomography and qualitative diffusion- and perfusion-weighted magnetic resonance imaging in acute stroke patients.</a> Stroke. 33, 2025-2031 (2002).</li><li>Crafton, K. R., Mark, A. N., Cramer, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+understanding+of+cortical+injury+by+incorporating+measures+of+functional+anatomy.">Improved understanding of cortical injury by incorporating measures of functional anatomy.</a> Brain. 126, 1650-1659 (2003).</li><li>Nudo, R. J., Eisner-Janowicz, I., Lomber, S. t. e. p. h. e. n., Eggermont, J. o. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+12.">Ch. 12.</a> Reprogramming the Cerebral Cortex. , (2006).</li><li>Davis, M. F., Lay, C. C., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amount+but+not+pattern+of+protective+sensory+stimulation+alters+recovery+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Amount but not pattern of protective sensory stimulation alters recovery after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 42, 792-798 (2011).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+completely+protects+the+adult+rodent+cortex+from+ischemic+stroke.">Mild sensory stimulation completely protects the adult rodent cortex from ischemic stroke.</a> PLoS One. 5, e11270 (2010).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+reestablishes+cortical+function+during+the+acute+phase+of+ischemia.">Mild sensory stimulation reestablishes cortical function during the acute phase of ischemia.</a> J. Neurosci. 31, 11495-11504 (2011).</li><li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+young+rat.">Middle cerebral artery occlusion in the young rat.</a> Stroke. 13, 855-859 (1982).</li><li>Risedal, A., Zeng, J., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+training+may+exacerbate+brain+damage+after+focal+brain+ischemia+in+the+rat.">Early training may exacerbate brain damage after focal brain ischemia in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 19, 997-1003 (1999).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+protects+the+aged+rodent+from+cortical+ischemic+stroke+following+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Mild sensory stimulation protects the aged rodent from cortical ischemic stroke following permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of the American Heart Association Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. , (2012).</li><li>Niiro, M., Simon, R. P., Kadota, K., Asakura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximal+branching+patterns+of+middle+cerebral+artery+(MCA)+in+rats+and+their+influence+on+the+infarct+size+produced+by+MCA+occlusion.">Proximal branching patterns of middle cerebral artery (MCA) in rats and their influence on the infarct size produced by MCA occlusion.</a> J. Neurosci Methods. 64, 19-23 (1996).</li><li>Wang-Fischer, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Stroke Models in Rats. , 17-30 (2009).</li><li>Quinn, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+rat's+to+human's+age:+how+old+is+my+rat+in+people+years?.">Comparing rat's to human's age: how old is my rat in people years?.</a> Nutrition. 21, 775-777 (2005).</li><li>Wei, L., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ministrokes+in+rat+barrel+cortex.">Ministrokes in rat barrel cortex.</a> Stroke. 26, 1459-1462 (1995).</li><li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+brain+ischemia+in+the+rat:+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries.">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=External+carotid+artery+territory+ischemia+impairs+outcome+in+the+endovascular+filament+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 34, 2252-2257 (2003).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li><li>Kuge, Y., Minematsu, K., Yamaguchi, T., Miyake, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nylon+monofilament+for+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Nylon monofilament for intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 26, 1655-1657 (1995).</li><li>Laing, R. J., Jakubowski, J., Laing, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.+Which+method+works+best?.">Middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Which method works best?.</a> Stroke. 24, 294-297 (1993).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia:+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry.">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li></ol>

Yazarlar şu anda ifşa hiçbir şey yok.

Bu protokol kemirgen korteks içinde iskemi ikna etmek, ve deneysel konulara az çevresel etki ile bunu yapmak için geliştirilmiştir. Çift tıkanıklığı ve transeksiyonu yöntemi geminin sürekli tıkalı olduğunu görsel onay için izin verir, ve aşırı işgali veya doku zarar vermeden ve yüksek hayatta kalma oranı ile yapılabilir. Bu tıkanıklığı protokol belirli bir kortikal alanı içinde iskemi ikna etmek için kraniotomi üzerinden erişilebilir herhangi bir kortikal gemi uygulanabilir. Bir hayvan...

Etkin insan iskemik inme taklit iskemik koşulları ikna etmek için, çeşitli hayvan inme modelleri yaygın infarkt hacimleri sonucu değişen, istihdam edilmektedir. Photothrombotic modelde, beyin, çevre doku 6 içinde fotokimyasal koagülasyon, ışınlanmış damarlarının tıkanmasına ve iskemi ile sonuçlanan, bir ışığa madde (örneğin gül-bengal gibi) intravenöz enjeksiyon sonrası lazer aydınlatma kullanarak sağlam kafatası yoluyla ışınlanmış 7. Fototromboz infarkt, çok küçük izole bölgeleri neden olabilir ve tipik olarak modelleme &quot;mini-vuruş&quot; veya &quot;mikro-vuruş&quot; için bir araç olarak kullanılır. Özellikle orta serebral arter (MCA), iskemik inme indüklemek için daha yaygın olarak benimsenen teknik, bir filaman cerrahi dış karotis arteri içine yerleştirilir ve ucu MCA baz kapatmasından kadar ilerletilir edildiği intraluminal monofilament modeli 8&#39;dir. Bir PRIintraluminal filament tıkanma mary meydan yüksek ölüm oranı 9 (MCA 3 saat, inme araştırma için ilgili zaman noktası için tıkalı olan% 70) &#39;dir. Yöntemi ile diğer konular mümkün subaraknoid kanama, eksik tıkanıklığı ve değişken infarkt hacmi 10,11 dahil. Bu model, korteks ve subcortically 12 hem de infarkt geniş bir derecesi ile sonuçlanır, ve model büyük bir insan felç. Mikro ve büyük hem de inme modelleri önemli olmakla birlikte, insan vuruş yerde arasında tipik olarak. Büyük klinik çalışmalarda, inme infarkt aralıkları boyutunda ipsi-iskemik yarımkürede 9 4,5-14% çeviren 28-80 cm 3, den. Buna karşılık, bizim sıçan pMCAO infarkt aralıkları ipsi-iskemik yarımkürenin 3 ila 12% oluşturan yaklaşık 9-35 mm 3, den. Bizim pMCAO modeli, bu nedenle, yakından beyin yüzdesi ile insan iskemik inme infarkt hacimleri benzerhacmi. Insan durumuna benzer fonksiyonel ve davranışsal açıkları inme, pMCAO sonuçlarının yapısal hasar modelleme ek olarak. En azından, inme hasar 13-15, kayıp veya motor ve duyusal fonksiyon 16,17, kayıp veya uyarılmış nöronal aktivitenin 16,18 bozulması, serebral kan akımı 19 azalma bozulması için karşı taraf hareket açıklarında inme sonuçları etkili bir modeli, 20 ve infarkt 21,22. Buna göre, pMCAO modelleri MCA ciddi bir tıkanıklık duyusal korteks (ve komşu korteks), nöronal aktivitenin bozulması, MCA kan akımında ciddi azalma ve iskemik inme 23 infarkt-damgasını özelliklerini içinde fonksiyonunun fiziksel engellilik, kaybına neden -25, bu nedenle insan inme etkin bir model olarak hizmet vermektedir. Prosedürel, pMCAO dikkatle gelen kafatası ve dura kaldırmak hangi küçük bir kraniotomi içerirMCA ilk (M1) segmenti üzerinde 2 x 2 mm &quot;cerrahi pencere&quot;, sadece ön ve arka kortikal dalları (Şekil 1A ve 1B) içine MCA birincil çatallanma önce. Biz (pMCAO yürütmek için gerekli olan cerrahi malzemeleri için özel reaktifler ve ekipman Tablo görmek MCA altında ve kortikal yüzeyi üzerinde, menenjlerin pial katmanı üzerinden yarım eğrisi ters kesme dikiş iğnesi ve iplik (6-0 ipek) geçmek .) Daha sonra bir çift bağ kravat, MCA etrafında iki knot sıkın ve iki knot arasındaki gemi transect. M1 ile çift bağ ve transeksiyonu sadece, lentikülostriat dallanma distalinde MCA sadece kortikal dalları etkilenen-böylece sadece kortikal infarkt (yok subkortikal hasar) 26,27 (Şekil 2) oluşur olduğunu böyle ortaya çıkar. Insan inme genellikle subkortikal infarkt ibaret olmasına rağmen, kemirgenlerde bu modelleme artış invaziv (beyin damarları tıkayıp kortikal branchi önce gerektirirng boyun karotis arter yoluyla erişim arterler gerektirir ve teknik ve infarkt artan değişkenliği) ek tıkanıklığı gerektirir. MCA önceki şubelerine erişim basit bir kraniotomi ile mümkün değildir burada açıklandığı gibi modeli daha proksimale gerçekleştirilemez. Bu pMCAO üzeri subkortikal infarkt ikna etmek için cerrahi mümkün olsa da, tıkanma son derece invaziv gerektirecektir ve bu nedenle ideal değildir olacaktır. Oklüzyon etkinliği histolojik olarak lazer Doppler, veya lazer görüntüleme 12,24,25 benek (Şekil 3), ya da ölüm sonrası (Şekil 2) aracılığıyla da teyit edilebilir. Daha önceki araştırmalar duyusal stimülasyon infarkt gelişimi ve sonucu önemli bir rol oynayabilir göstermiştir unutulmamalıdır; pMCAO 2 saat içinde uygulandığında zarar güvenceler verildi ve 3 saat sonrası pMCAO de uygulanan inme zarar artışa neden 24,25,28. Biz 5 saat sonrası pMCAO de, stimülasyon artık sonuç (yayınlanmamış veri) üzerinde bir etkisi olduğunu doğruladı. Bu nedenle, konuların duyusal stimülasyon pMCAO az değişkenlik ile infarkt hacimleri elde etmek için aşağıdaki 5 saat en aza indirilmelidir. Buna göre, bizim grup az duyusal stimülasyon ile, karanlıkta, 5 saat sonrası pMCAO için fareler anestezi tutarak bu tür &quot;tedavi kontrolleri&quot; çalışır, ve açıkça hiçbir bıyık uyarılması. Bu daha fazla dallanma, birden çok ana parçaları, ya da iletişim damar yokluğu ile birlikte MCA yapıda zaman varyasyonu, yetişkin erkek Sprague Dawley sıçanları 29,30 olarak 10-30% arasında bir frekansta oluşabileceğine dikkat edilmelidir. MCA anormallikler gözlenirse, bu tür damar anormallikleri ile hayvanlar ekleyerek infarkt değişkenlik artacak gibi o konu kullanmamayı tavsiye edilir. Buna ek olarak, O ve birkaç pratik yönleri vardırinme soruşturma için avantajlı bu oklüzyon yöntemi yapmak ur prosedürü. İlk olarak, dikişler arter etrafına yerleştirilen ancak bağ ve kesisi sonrası post-iskemik değerlendirme ardından izlenmesi ve değerlendirilmesi, toplamak için sıkılır değil olabilir. Bu şekilde, oklüzyon için gerekli cerrahi hazırlık etkili olan denekler için kontrol edilir. Konularda sabit kalabilir veya tıkanıklığı boyunca stereotaksik çerçeve içinde, kullanımda 25,28 de bu konuda hareket ya da herhangi bir deney ekipmanları bozmadan sırasında ve tıkanıklığı sonra, önce her konunun deneysel değerlendirme yapmak mümkün olduğu için. Ayrıca, daha yaşlı denekler kemirgen içinde çok düşük bir ölüm oranı, bu işlem sonucu 21-24 aylıkken (yaşlı bir insan eşdeğer), 31 ve bu nedenle daha yakından en yaygın model bu sıçanlarda inme tedavisinde değerlendirmek için kullanılabilir inme hastalarının 25,28 yaş dirsek. Gemi transection da birkaç pratik amaca hizmet eder. Kesisi sonrası kanama olmaması geminin tamamen bağ sitelerinde hem de tıkalı olduğu teyit etmektedir. Ayrıca, kan akışı kesisi kalıcı bir bozulma sağlar. Son olarak, transeksiyonu tıkalı damar distal kısımlarının tespit herhangi bir kan akışı alternatif bir kaynak gelmelidir sağlar. Biz özellikle bu el yazması ve video MCA için bu tıkanıklığı tekniği tarif rağmen Son olarak, aynı çift bağ kesisi teknik kraniotomi üzerinden erişilebilir herhangi bir serebral damar uygulanabilir. Laboratuarımızda, örneğin, seçici olarak birincil somatosensor korteks 32 içindeki iskemi ortaya çıkarmak için tasarlanmış tekniklere benzer bir şekilde birinci ve kollateral kan akımı 24 hem de engellemek için distal MCA şube birkaç ilave daimi tıkanıklığı ile bağlantılı olarak pMCAO kullanılmaktadır. Sonuç olarak, Tinme insan klinik literatür ile ilgili en yaygın konum (MCA), tipi (iskemi), ve hasar derecesi (enfarktüs): MCA uygulanan kalıcı tıkanıklığı için onun yöntemi yakın insan iskemik inme üç temel yönü modeller. Ayrıca, kapama bölgesinin bu yöntem, beyin boyunca tek veya birden fazla tıkanıklığı sitelerine tatbik edilebilir, ve hayatta kalma oranı yüksek olan yaşlı kişilerde ifa edilebilir. Bu tıkanma, dinamik, sürekli ve nispeten invaziv olmayan doğası göz önüne alındığında, bu tekniğin korunma ve inme tedavisinde yeni yaklaşımlar değerlendirmek klinik öncesi araştırmacılar için ek bir araç temsil eder.

<table border="1">
 <tr>
 <td>Name of the equipment</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Graefe Forceps - 0.5 mm Tips Slight Curve (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11151-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ceramic Coated Dumont #5 Forceps (2)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11252-50</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Bonn Scissors, straight (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>14084-08</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Round 3/8 (16 mm) Suture Needles</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>12050-02</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>6-0 Braided Silk Suture</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9071061 
 Harvard Apparatus 
 No.:510461</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30 gauge needle, &frac12;" length</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9867376 
 
 No.:ZT-5-030-5-L/COL</td>
 <td></td>
 </tr>
</table>

permanent cerebral vessel occlusion via double ligature and transection

Inme ölüm, sakatlık, ve sosyo-ekonomik kaybı dünya çapında önde gelen nedenidir. Tüm inmelerin çoğunluğu kan akımında bir kesinti (iskemi) 1 kaynaklanabilir. Orta serebral arter (MCA), korteks 2 lateral yüzeyine kan büyük bir çoğunluğu teslim insan inme 3 en sık ve onun sınırları içinde iskemi geniş disfonksiyonu veya ölüme 1,4,5 neden olabilir. Iskemik inme Dul genellikle kaybı veya motor yetenekleri bozulması, duyusal açıkları ve infarkt acı. Inme bu anahtar özellikleri yakalamak ve böylece etkili bir tedavi geliştirmek için bir çaba, vurgu büyük bir MCA iskemi hayvan modellerinde üzerine yerleştirilir. Burada kalıcı bir kortikal yüzey damar tıkanıklığını gidermeye yönelik bir yöntem mevcut. Biz en yaygın türü, yeri ve outcom modeller bir ilgili damar tıkanıklığı bir örnekle bu yöntem sunacakinsan inme, kalıcı orta serebral arter tıkanıklığı (pMCAO) e. Bu modelde, cerrahi yetişkin sıçan MCA ortaya çıkarmak ve daha sonra geminin çift bağ ve kesisi ile tıkamak. Bu pMCAO MCA kortikal bölge, korteks büyük bir kısmının tüm iskemi neden MCA&#39;nın proksimal kortikal kolu bloke eder. Oklüzyon Bu yöntem aynı zamanda daha küçük bir korteks bölge hedef alan daha fazla fokal iskemi elde etmek için kortikal damarlarının daha uzak bölümleri kapatmak için de kullanılabilir. PMCAO en önemli dezavantajları küçük bir kraniotomi MCA erişmek için gerekli olduğu gibi cerrahi işlem minimal doku hasarı bu sonuçlar olsa da, biraz invaziv olmasıdır. Bu modelin en önemli avantajları ise şunlardır: tıkanıklık site de kan akımı azalması derecesi, tutarlı işlevsel ve değer düşüklüğü hızla meydana nörolojik, tanımlanır, infarkt tutarlı ve hayatta kalma yüksek oranda uzun sağlar süreli kronik değerlendirme.

Bir geminin Başarılı tıkanıklığı diğer kan akımı görüntüleme yöntemleri arasında görüntüleme (LSI) benek lazer kullanılarak teyit edilebilir. MCA&#39;nın temel kortikal dallarında kan akımı kayıt sistemi gürültü ve tekniğin hassasiyet seviyesine bağlı olarak ~ 25 taban bölgesinin% ya da daha az aşağıdaki tıkanıklığına damla gerekir. MCA tıkanmasından önce ve sonra MCA bir kortikal kolunun bir parçasını temsil eden bir LSI görüntü için Şekil 3&#3...

Watch this Scientific Journal Video about Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection at JoVE.com

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Biz bir kemirgen büyük bir beyin damar daimi tıkanıklığı için son derece tekrarlanabilir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik çok az çevresel zarar, en az kan kaybı, uzun süreli sağkalım oranının yüksek ve insan klinik nüfusu ile orantılı tutarlı infarkt hacmi ile gerçekleştirilebilir.

Kalıcı Serebral Gemi Tıkanıklığı<em&gt; Ile</em&gt; Çift Ligature ve transeksiyonu

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

permanent-cerebral-vessel-occlusion-via-double-ligature

Research

JoVE Journal

Medicine

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

14.8K Görüntüleme.  University of California, Irvine. Biz bir kemirgen büyük bir beyin damar daimi tıkanıklığı için son derece tekrarlanabilir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik çok az çevresel zarar, en az kan kaybı, uzun süreli sağkalım oranının yüksek ve insan klinik nüfusu ile orantılı tutarlı infarkt hacmi ile gerçekleştirilebilir.

Video: Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Tıp

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to develop suitable animal models to study the events that unfold during ischemic insult. These techniques include transient or permanent, focal or global ischemia models using many different animal models, with the most common being rodents.
The permanent MCA ligation method which is also referred as pMCAo in the literature is used extensively as a focal ischemia model in rodents 1-6. This method was originally described for rats by Tamura et al. in 1981 7. In this protocol a craniotomy was used to access the MCA and the proximal regions were occluded by electrocoagulation. The infarcts involve mostly cortical and sometimes striatal regions depending on the location of the occlusion. This technique is now well established and used in many laboratories 8-13. Early use of this technique led to the definition and description of &#x201C;infarct core&#x201D; and &#x201C;penumbra&#x201D; 14-16, and it is often used to evaluate potential neuroprotective compounds 10, 12, 13, 17. Although the initial studies were performed in rats, permanent MCA ligation has been used successfully in mice with slight modifications 18-20 .
This model yields reproducible infarcts and increased post-survival rates. Approximately 80% of the ischemic strokes in humans happen in the MCA area 21 and thus this is a very relevant model for stroke studies. Currently, there is a paucity of effective treatments available to stroke patients, and thus there is a need for good models to test potential pharmacological compounds and evaluate physiological outcomes. This method can also be used for studying intracellular hypoxia response mechanisms in vivo. 
Here, we present the MCA ligation surgery in a C57/BL6 mouse. We describe the pre-surgical preparation, MCA ligation surgery and 2,3,5 Triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining for quantification of infarct volumes.

Middle cerebral artery (MCA) ligation is a technique to study focal cerebral ischemia in animal models. In this method, the middle cerebral artery is exposed by craniotomy and ligated by cauterization. This method gives highly reproducible infarct volumes and increased post-operative survival rates compared to other methods available.

Fare Daimi Orta Serebral Arter ligasyon Of Uygulama

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be performed in many locations overlying the rat cerebrum, but is most easily carried out by creating a craniectomy over the readily accessible frontal or parietal bones. Most frequently, we have used this technique in combination with the endothelin-1 middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke to quantify the changes in middle cerebral artery vessel diameter that occur with injection of endothelin-1 into the brain parenchyma adjacent to the proximal MCA4, 5. In order to visualize the proximal portion of the MCA during endothelin -1 induced MCAO, we use a technique to create a cranial window through the temporal bone on the lateral aspect of the rat skull (Figure 1). Cerebral arteries can be visualized either with the dura intact or with the dura incised and retracted. Most commonly, we leave the dura intact during visualization since endothelin-1 induced MCAO involves delivery of the vasoconstricting peptide into the brain parenchyma. This bypasses the need to incise the dura directly over the visualized vessels for drug delivery. This protocol will describe how to create a cranial window to visualize cerebral arteries in a step-wise fashion, as well as how to avoid many of the potential pitfalls pertaining to this method.

This article describes a method for visualizing rat cerebral arteries through a cranial window using temporal craniectomy in order to view proximal portions of the middle cerebral artery (Figure 1). This versatile method can be combined with various techniques of drug delivery to measure cerebral artery reactivity in vivo.

Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı sırasında Orta Serebral Arter görselleştirin bir Kranial Pencere kullanmak

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ischemia produces damage to specific brain regions shown to be highly sensitive to ischemia 1. Hippocampal neurons have higher sensitivity to ischemic insults compared to other cell populations, and specifically, the CA1 region of the hippocampus is particularly vulnerable to ischemia/reperfusion 2.
The design of therapeutic interventions, or study of mechanisms involved in cerebral damage, requires a model that produces damage similar to the clinical condition and in a reproducible manner. Bilateral carotid vessel occlusion with hypotension (2VOH) is a model that produces reversible forebrain ischemia, emulating the cerebral events that can occur during cardiac arrest and resuscitation. We describe a model modified from Smith et al. (1984) 2, as first presented in its current form in Sanderson, et al. (2008) 3, which produces reproducible injury to selectively vulnerable brain regions 3-6. The reliability of this model is dictated by precise control of systemic blood pressure during applied hypotension, the duration of ischemia, close temperature control, a specific anesthesia regimen, and diligent post-operative care. An 8-minute ischemic insult produces cell death of CA1 hippocampal neurons that progresses over the course of 6 to 24 hr of reperfusion, while less vulnerable brain regions are spared. This progressive cell death is easily quantified after 7-14 days of reperfusion, as a near complete loss of CA1 neurons is evident at this time.
In addition to this brain injury model, we present a method for CA1 damage quantification using a simple, yet thorough, methodology. Importantly, quantification can be accomplished using a simple camera-mounted microscope, and a free ImageJ (NIH) software plugin, obviating the need for cost-prohibitive stereology software programs and a motorized microscopic stage for damage assessment.

Bilateral carotid occlusion coupled with systemic hypotension produces global brain ischemia in the rat, resulting in damage to the hippocampus with reproducible severity. Animal subjects are impaired with predictable patterns of brain damage, they recover expediently, and mortality rates are comparatively low.

2-Gemi Tıkanıklığı / Hipotansiyon: Küresel Beyin İskemi Rat Modeli

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal models of acute ischemic stroke allows to confirm successful arterial occlusion and exclude subarachnoid hemorrhage. Cerebral perfusion monitoring can also be used to study intracranial collateral circulation, which is emerging as a powerful determinant of stroke outcome and a possible therapeutic target. Despite a recognized role of Laser Doppler perfusion monitoring as part of the current guidelines for experimental cerebral ischemia, a number of technical difficulties exist that limit its widespread use. One of the major issues is obtaining a secure and prolonged attachment of a deep-penetration Laser Doppler probe to the animal skull. In this video, we show our optimized system for cerebral perfusion monitoring during transient middle cerebral artery occlusion by intraluminal filament in the rat. We developed in-house a simple method to obtain a custom made holder for twin-fibre (deep-penetration) Laser Doppler probes, which allow multi-site monitoring if needed. A continuous and prolonged monitoring of cerebral perfusion could easily be obtained over the intact skull.

Cerebral perfusion monitoring has been demonstrated to improve accuracy in ischemic stroke models. Technical difficulties often limit the use of this essential tool for cerebrovascular research. In this video, an optimized system is shown to obtain a single or multi-site hemodynamic monitoring during intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Stereological and Flow Cytometry Characterization of Leukocyte Subpopulations in Models of Transient or Permanent Cerebral Ischemia

Microglia activation, as well as extravasation of haematogenous macrophages and neutrophils, is believed to play a pivotal role in brain injury after stroke. These myeloid cell subpopulations can display different phenotypes and functions and need to be distinguished and characterized to study their regulation and contribution to tissue damage. This protocol provides two different methodologies for brain immune cell characterization: a precise stereological approach and a flow cytometric analysis. The stereological approach is based on the optical fractionator method, which calculates the total number of cells in an area of interest (infarcted brain) estimated by a systematic random sampling. The second characterization approach provides a simple way to isolate brain leukocyte suspensions and to characterize them by flow cytometry, allowing for the characterization of microglia, infiltrated monocytes and neutrophils of the ischemic tissue. In addition, it also details a cerebral ischemia model in mice that exclusively affects brain cortex, generating highly reproducible infarcts with a low rate of mortality, and the procedure for histological brain processing to characterize infarct volume by the Cavalieri method.

Brain myeloid cells characterization following stroke can be performed by stereology using the optical fractionator method, or by a flow cytometric analysis of brain leukocytes suspensions. Both are useful techniques to perform an accurate phenotypical distinction of the main myeloid cell subsets found in the ischemic brain.

Geçici veya kalıcı Serebral İskemi Modelinde lökosit alt popülasyonlarının Stereolojik ve Sitometrisi Karakterizasyonu

Microglia activation, as well as extravasation of haematogenous macrophages and neutrophils, is believed to play a pivotal role in brain injury after ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse model is useful for investigating the pathophysiology of cerebral ischemia-reperfusion and determining potential therapeutic strategies for patients with stroke. Variations in the anatomy of the circle of Willis of C57BL/6 mice affects their infarct volume after cerebral-ischemia-induced injury. Studies have indicated that distal MCA occlusion (MCAO) can overcome this problem and result in a stable infarct size. In this study, we establish a two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion through the interruption of the blood flow to the right MCA. We distally ligate the right MCA and right common carotid artery (CCA) and restore blood flow after a certain period of ischemia. This ischemia-reperfusion injury induces an infarct of stable size and a behavioral deficit. Peripheral immune cells infiltrate the ischemic brain within the 24 h infiltration period. Additionally, the neuronal loss in the cortical area is less for a longer reperfusion duration. Therefore, this two-vessel occlusion model is suitable for investigating the immune response and neuronal recovery during the reperfusion period after cerebral ischemia.

A mouse model of cerebral ischemia-reperfusion is established to investigate the pathophysiology of stroke. We distally ligate the right middle cerebral artery and right common carotid artery and restore blood flow after 10 or 40 min of ischemia.

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...