Genetik Olarak Kodlanmış Kalsiyum İndikatörleri Kullanılarak Virüsle Enfekte İnsan Bağırsak Organoid Tek Tabakalarının Canlı Kalsiyum Görüntülemesi

Çalışmamızla, virüslerin bağırsak epitelinde sinyalleşmeyi nasıl bozduğunu anlamayı amaçlıyoruz. Özellikle, virüsle enfekte olmuş hücrelerin, komşu enfekte olmamış hücrelerin patogeneze katkıda bulunmak için nasıl düzensizleştiğini anlamakla ilgileniyoruz. Yakın zamanda, rotavirüs ile enfekte olmuş hücrelerin, komşu enfekte olmamış hücreleri düzensizleştiren ve viral yayılmayı kolaylaştıran ve hastalığı şiddetlendiren ADP darbeleri salgıladığını keşfettik.

Kalsiyum görüntüleme sinirbilim gibi alanlarda çok popüler olsa da, epitel biyolojisi veya virolojiyi incelemek için yaygın olarak kullanılmamıştır. Bu protokol, kalsiyum sinyalizasyonunu ve canlı virüsle enfekte epitel dokusunu incelemek için mevcut teknolojileri ve model sistemleri uyarlamak için bir yaklaşım sunar. Genetik olarak kodlanmış kalsiyum göstergelerini ifade etmek için organoidleri tasarlayarak, yaklaşımımız, insan bağırsak epitelinin hücresel çeşitliliğini özetleyen bir model sistemde tutarlı, tekrarlanabilir uzun vadeli bir görüntülemeye izin verir.

Virüs kaynaklı parakrin purinerjik sinyallemenin hem konakçı hem de virüs için etkilerini anlamayı amaçlıyoruz. Gelecekteki çalışmalarımız, bu tür sinyallerin diğer virüsler arasında geniş çapta korunup korunmadığını ve etkilerin benzer olup olmadığını da belirleyecektir.