Başlamak için, bir ayak parmağı tutamına yanıt verilmediğini değerlendirerek farenin uyuşturulmasını onaylayın. Fareyi, sırt ve alt arka bacaklar korumalı kalırken, başı ve üst arka omuzları dikdörtgen açıklıktan açıkta kalacak şekilde iç hayvan tutucusuna sabitleyin. Fareyi sabitlemek için üst arka omuzlara cerrahi bant uygulayın.
İç hayvan tutucuyu dış tutucuya yerleştirin. Hayvan tutucunun içindeki ikincil anestezi hattını açtıktan sonra, anestezikin tüpten dışarı sızmasını ve deney sırasında farenin hareket etmesini önlemek için tutucunun ucunu kapatın. Dış hayvan tutucunun dört milimetrelik dairesel diyafram açıklığını doğrudan farenin sol gözünün üzerine hizalayın.
Hayvan tutucuyu, kontrol düğmelerini kullanarak XY masasının üzerine yerleştirin, böylece açıklığı paintball tabancasının namlusu ile aynı hizaya gelir ve dış yüzey namlunun ucundan beş milimetre uzakta olur. Kalibrasyondan sonra, 15 saniyelik aralıklarla 0.5 PSI'lık iki patlama sağlamak için aşırı basınçlı hava dizisini başlatın. Sahte grup faresi için, hayvan tutucuyu namludan uzağa çevirin, havayı bir karton kalkanla bloke edin ve aşırı basınçlı havanın gürültüsüne maruz bırakın.
Sham grubunda sağlıklı, yoğun paketlenmiş aksonlar gözlendi. Buna karşılık, ITON grubu, akson şeklindeki düzensizlikler ve miyelin kılıfının bozulması dahil olmak üzere akson dejenerasyonu belirtileri sergiledi. ITON grubunda toplam akson sayısı, sahte gruba kıyasla önemli ölçüde azalmıştır.
ITON grubunda sham grubuna göre dejeneratif profillerde anlamlı bir artış tespit edildi. ITON farelerinin retinasında artmış mikroglia proliferasyonu gözlendi ve mikroglia dış nükleer tabakaya uzandı. Mikroglia'nın tipik retina katmanlarında kaldığı sahte grupla karşılaştırıldığında.
Çubuk bipolar hücreler ve fotoreseptörler arasındaki sağlam sinaptik bağlantılar, hem ITON hem de sahte farelerde kaydedildi ve sinaptopati tespit edilmedi.
