Yazarlar Şehriye İşleme Testi gelişmekte olan Dr. Deanna Adkins, Dr. Marty Woodlee, Cole, Kocalar, Mónica A. Maldonado, Jackie Kane ve Dr. Tim Schallert yardım için teşekkür ve Capellini geliştirilmesine yardım için Lu Chou Testi İşleme. NIH-NINDS (NS05689) ve NIH-NIA (1F31AG034032 01) hibe tarafından desteklenir.

1. Test başlaması için hazırlık <ol><li> Pişmemiş makarna adet jilet kullanarak uzunlukta kesilir. Skinner marka erişte makarna (1.5 mm çapında), sıçanlar için 7 cm uzunlukta kesilir. Fareler için DeCecco marka Capellini makarna (1.0 mm çapında), 2.6 cm uzunlukta (Şekil 1C) kesilir. Makarna marka taşıma şekilde etkileyebilecek doku ve çapı, değişir, çünkü makarna tek bir kaynaktan tekrar tekrar test için kullanılması tavsiye edilir. </li><li> Neophobic yanıtlarını üstesinden gelmek ve taşıma beceri kurmak için, hayvanların test öncesinde hafta içinde evlerine kafes birkaç kez makarna adet maruz kalmaktadır. (Tipik olarak, 5-10 gün maruz kalma, yaklaşık 4 adet her zaman yeterlidir.) </li><li> Ev kafes daha başka bir odasında test uygulanabilir, ya da evde kafes, test, test ortamında yeme alışkanlık için taşınır. (Hayvanlar bu ortamda kolaylıkla makarna yiyorsun kadar genellikle 3-5 oturumları alır.) </li><li> Hayvanlar makarna hevesle kabul sonra bile büyük bir kamera test alanına yanına taşındığında, aniden suskun olabilir. Bir veya daha fazla alışkanlık oturumları için test ortamı ön kamera yerleştirmek yararlı olur. </li><li> Makarna çok lezzetli gibi çoğu hayvanın hareket, çünkü onları önceden test kısıtlamak gıda şart değildir. Ancak, gıda kaldırılması deneyci ve kamera önünde bir kaç saat önce ya da gece yeme kolaylaştırmak ve test zamanda doymak olmadığını sağlamak olabilir. </li><li> Yemek sırasında makarna parçanın kırılması bir deneme geçersiz kılar. Biz hayvan testlerinde kullanılan olanlardan daha uzun adet verilen asla eğer bu alışkanlığı büyük ölçüde önlenmiş olur bulduk. </li><li> Test oturumları için, makarna parçaları kartlar şablonu (erişte, 1.75 cm aralıklarla ve 0.86 cm aralıklarla Capellini ipliklerini) kullanarak belirli aralıklarla bir ultra ince ucu marker ile işaretlenmiştir. Bu yemek sırasında makarna iplikli hareketinin görselleştirme kolaylaştırır. </li></ol> 2. Testi kurdu <ol><li> Hayvanlar evde kafes veya başka bir cihazı unmarred, temiz duvarlar ya da test edilecek ve test seansı sırasında cagemates izole edilmelidir. </li><li> Sıçanlarda uygulanan bir deneyci (Allred ve ark, 2008) tarafından gerçek zamanlı olarak test edilebilir, ancak bu verilerin, slow-motion video oynatma sırasında toplanan böylece, ölçme video kayıt kolaylaştırılmıştır . Biz onların pençeleri ve hızlı hareketler, küçük boyutları nedeniyle yavaş hareket video oynatma olmadan fare forepaw hareketleri güvenilir bir şekilde ölçmek mümkün değildir. </li><li> Yüksek bir kare hızı ve yeterli zoom ile bir video kamera kullanılır. Biz normal oda aydınlatma koşullarında en az 420 s-1 bir obtüratör hızı için ayarlanmış bir 16x zoom lensi ile bir Canon XL1S fotoğraf makinesi kullanın. Kaydırma ve devrilir bir kafa ile tekerlekli bir tripod kullanımı kamera konumlandırma kolaylaştırır. </li><li> Sıçanlar, çömelmiş vaziyette genellikle makarna yemek için dik oturmak ve pençeleri en kolay, hafif bir yükseliş açısı (Şekil 1A) ile yaklaşık odasının zemin seviyesinde yerleştirilmiş kamera ile görülüyor. Talaşı ile bir kafes test, bazı talaş kaldırılması görünümünü optimize etmek için yararlı olabilir. </li><li> Fare, sıçan daha bir açı daha fazla parça tutarak, makarna yerken öne eğilme eğilimindedir. Böylece, açık bir zemine sahip bir test odasının bir aynanın üstüne yerleştirilir. Kamera yere göre biraz daha yüksek bir seviyede yerleştirilir ve aşağıya doğru açılı, aynaya pençeleri (Şekil 1B) yansıması odaklanmak. Ilk yüzey ayna, video oynatımı için pençeleri netlik büyük ölçüde geliştirir. </li><li> Böylece, ses kayıt yeme doğrulamak için yararlıdır, makarna parça Her ısırık duyulur. </li></ol> 3. Makarna taşıma çalışmalarda Yönetme <ol><li> Test oturumları bir makarna parça ile deneme başına yenen, sıralı çalışmaların oluşur. Biz genellikle sıçan ve fare başına 3-4 çalışmalarda başına 4-5 çalışmalardan elde edilen verileri kaydetmek. </li><li> Önce videoya makarna, bir parça yemek başlatmak için uygun bir kamera görüntüsü hayvan taşımak için odasına yerleştirilir. </li><li> Hayvan kamera yüz ve odak ve forepaws ve tüm rakamlar ile ayrık ayarlamaları görmek için yeterince yakınlaştırma (~ 10-12X) için gereklidir. Hem pençeleri eklemleri izlenebilir olmalıdır. Bu kamera ile en az, biz ilgi bölgeye dar, sadece deneme başlangıcından önce otofokus özelliklerini kullanmak yararlı buluyorum. Biz daha sonra manuel netleme geçmek. </li><li> En kısa sürede hayvan ve kamera konumu olduğu gibi, ilk deneme başlatılır. Bir taş düştü ya da sallanırken ve doğrudan hayvanın ön kayıt başlangıcı yeme önce başlatılan. </li><li> Bundan sonra, çalışmaların hemen arkaya verilmiştir. Hayvanların hareket etmez, böylece çalışmalar arasındaki gecikmeleri en aza indirmek için tavsiye ediliroptimum görüntüleme konumunuza. </li><li> Pençeleri yan görüntülenebilir veya odak kayıp olduğu Denemeler gol değildir. </li><li> Öncesi ve tedavi sonrası tarıdır (ark Allred, 2008 örneğin, merkezi sinir sistemi yaralanma sonrası iyileşme) belgelemek için test oturumları gün, örneğin, içinde tekrar edilebilir. </li><li> Bir meydan kameraya göre istenilen pozisyonda yemek için hayvanların elde edilebilir. Bu test öncesi birkaç dakika için kameranın varlığı utangaçtır hayvanları alıştırarak için gerekli olabilir. Hayvanlar, genellikle ideal bir bölge makarna bırakarak ya da sarkan konuma sürülmesi olabilir. Verilen adet numara tokluk önlemek için minimize edilmelidir, ancak bu istenilen konuma gerçekleştirmek için birkaç parça gerekebilir. </li><li> Sıralı birkaç sıçanlarda test etmek için, biz ortasında tekerlekli bir tripod üzerinde kamera ile, bir daire içinde bir defada kendi kafeslerinin birkaç yapılandırmak için bu uygun bulduk. Bir parça, her bir kafesin ideal bir bölge içine düştü ve kamera sonra ilk uygun bir konumda yemeye başlar sıçan taşındı. Bu kamera ve deneyci varlığı alışabilirsin daha yavaş (pozisyon yemek) sıçanlar için daha fazla zaman sağlar ve aynı zamanda daha hızlı sıçanların ısırma sesleri yemek uyarılmış olabilir. </li></ol> 4. Forepaw ayarlamalar Kantitatif video analizi ve yeme zamanı <ol><li> Whishaw &amp; Coles, 1996; Whishaw ve ark, 1997) ve yaşlanma ile ilgili değişiklikler yerken forepaw ayarlamaları analiz sıçanlarda MSS yaralanma sonrası lateralize bozuklukları duyarlı basit bir kantitatif ölçüsüdür (. Allred ve ark, 2008; farelerde (Tennant ve ark, 2009). </li><li> Araştırmanın sayısal kısmı makarna parça ilk ağız içine yerleştirilen zaman başlar ve makarna son pençeleri serbest ve ağzına kaybolur sona erer. </li><li> Video oynatma (~% 50 gerçek zamanlı), ya kare kare ilerleme ayarlamaları belirlemek için, gerektiğinde kullanılır yavaşladı. </li><li> Bir ayarlama her zaman pençe bültenleri ve yeniden temas makarna parça parça üzerinde pençe tutun reformasyon var, ya da basamaklı bir uzantısı fleksiyon ve abduksiyon-adduksiyon (Şekil 2) var sayılır. Sağ ve sol pençe Her bir ayar için ayrı ayrı kaydedilir. </li><li> Pençe, rakam veya pençe tutun yeniden konumlandırılması herhangi bir hareketi ile makarna parça boyunca slaytlar Ayarlamalar sayılmaz . Pençe hareketleri makarna parçası (yani, sonraki parça hareketleri) ile temas halinde değilken de sayılmaz. </li><li> Yemek için zaman da başlangıcı yeme ve makarna ağzına kaybolur biten ile başlayan, her deneme için kaydedilir. Biz, video oynatma ekran özelliklerini kullanarak zamanların rekorunu, ama o da normal hızda oynatma sırasında bir kronometre ile kaydedilebilir. </li><li> Hayvan yeme duraklar, ama parça üzerinde tutun korur, duraklatılmış toplam süre çıkarılır. Yeme bir duraklama sesli ısırma ağız ya da bırakma parçasının iki hareketi açıktır. </li><li> Kısa adet desen işleme değiştirmez, çünkü deneme yeme herhangi bir bölümü sırasında, pençeleri görüntülemek görünmeyebilir ise analiz ihmal ya da hayvan parçası bozulursa. </li><li> Bazı sıçanlar ve fareler, biri diğerinden daha pençe ile sürekli daha fazla ayarlamalar yapmak. Yaralanmaları zarar öncesi test ayarlamaları (Allred ve ark, 2008) yapılan pençe etkiler tek taraflı santral sinir sistemi yaralanma modelleri için, lateralize bozuklukları daha hassas olarak tespit edilir . </li><li> Fareler bazen makarna parçası yeme ortasında açılan ve kısa bir aradan sonra, bu pick up ve yeme devam edin. Bu günün son deneme, muhtemelen kısmi tokluk ve yeme odaklanmak kaybı nedeniyle en yaygın olanıdır. Bu sağlam farelerde bile yaygın olduğundan, bu çalışmaların açığa çıkarmaz. Ancak, parça düştü olduğu zaman, toplam yeme zaman çıkarılır. </li><li> Sağlam sıçanlarda, parçaları bırakarak genellikle çok gecikmiş ya da hiç yemek atipik ve yeniden başlatılması. Bu tür çalışmalar ayarlamaları ve yeme zamanı analiz atlanmıştır. </li><li> Getirmek için yapılan düzeltmeler önce yemek başlangıcı sayılmaz. Ön yiyen kullanım davranışları, merkezi sinir sistemi yaralanmaları (örneğin, Whishaw ve ark, 1992; Whishaw ve ark, 1986) etkilenir, ama biz henüz bu döneme forepaw ayarlamalar için nicel yöntemler uzun değil . </li><li> Bu veriler şu şekilde özetlenebilir: (a), parça başına pençe ortalama ayarlamalar, (b) parça başına ortalama yeme süresi ve ayarlamalar (ayarlamaları / zaman yeme), (c) oranı ortalama sayısı. </li></ol> 5. Atipik kullanım şekilleri Video analizi <ol><li> Atipik kullanım şekilleri sıçanlarda farklı MSS yaralanma türleri (Allred ve ark, 2008) ve recordi ayırt edebilirsinizng bu davranışların tamamlayıcı bir analizi olarak yararlı olabilir. </li><li> İşleme desen sağlam hayvanlar seyrek gözlenir atipik olarak kabul edilir. Bozulmamış hayvanlar genellikle bir pençe, &quot;kavramak pençe&quot; ile yemek başlatmak makarna düşük yerleştirilir ve &quot;kılavuzu pençe&quot; sonra ağız (Şekil 3A, C) yakın bir yerdedir. Aynı pençe genellikle tüm çalışmalarda kavramak pençe. Sıçanlar sık ​​sık pozisyon ilk makarna uzunluğu boyunca birbirinden uzak pençeleri ve kısaltır parçası olarak birlikte hareket ederler. Fareler genellikle yeme başında bile, kavramak ve birbirine yakın tutulan kılavuzu bacaklarda, ağız yakın hem pençeleri pozisyon. Her iki türde de, pençeleri daha simetrik pozisyonlar, yan yana ya parça çok kısa bir zaman (Şekil 3B, D) hane, interpoze taşıyın. Her iki pençeleri makarna, rehberlik, holding ya da ilerleyen yemek yeme sırasında sürekli kullanımda. </li><li> Sıçan ve fareler pençe pozisyonda Atipik kalıpları arasında aşağıdakiler sayılabilir: (a.), makarna parça uzun zaman simetrik bir tutun, pençeleri birlikte yerleştirerek (orijinal boyunun yarısından fazlası), (b) pençeleri taşımak için başarısız parça tamamen tüketilen ve (c) önce simetrik bir pozisyon ortasında yeme kılavuzu ve kavramak bacaklarda pozisyonları geçiş. </li><li> Sıçan ve olan fareler iki ek atipik davranışlar: (a.) (&quot;iletişim başarısızlık&quot;) yemek sırasında uzun bir süre için tek bir pençe ile makarna parça ve (b) için başarısız ağız yoluyla makarna çekmek için kullanarak (&quot;ağız çekerek&quot;) yeniden konumlandırmak için pençeleri. </li><li> İki davranışları sıçanlar için atipik kabul, ama fareler için tipiktir: (a.) hunched duruş ve (b), yemeye başlar sonra makarna parça bırakarak. Ancak, farelerde damla frekans, merkezi sinir sistemi hasarı sonra artabilir. Böylece, her iki türde de düşüşü frekans kaydedin. </li><li> Diğer atipik davranışlar tek taraflı bir sıçan striatal dopamin eksikliği modeli görülmüştür: (a.) kavramak uzuv yemek sırasında hareketsiz, sert pozisyon düzenlenen bir &quot;demir kavrama&quot;, (b) kılavuz pençe hareketi tekrarladı katı kavramak pençe, ve (c) ve aşırı devirme makarna ağzına açılı olarak baş çevresinde (. Allred ve ark, 2008; Whishaw ve ark ayrıca bkz 1997). </li><li> Biz de yaşlı farelerde genellikle ağzına makarna taşımak için etkisizdir ayarlamalar yapmak olduğunu gözlemledik. Böylece, görünür bir hareket ağzına makarna parçası olmasına yol açmaz ayarlamalar ayrı ayrı kaydedilir. </li><li> Kılavuzu anahtarlama ve kavramak bacaklarda çekerek, iletişim hataları, damlaları, ağız ve diğer tüm atipik davranışlar deneme başına bir kez kaydedilir, olay başına kaydedilir. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar Video analiz sonuçları deneme başına her pençe ayarlamaları, her bir makarna parça yemeği için sayı ve zaman içermelidir. Sensorimotor kortikal lezyonu olan fareler ya da serebral iskemi Sonuçlar hayvanlar bozulmuş (kontra-lezyon) uzuv yaralanmaları sonra en az bir ay için kutsal sayılmaktadır bir etkisi daha az ayarlamalar yapmak göstermektedir. Kontralateral bacak ayarlamalar bir azalma ve ipsilateral ekstremite (Allred ve ark, 2008) ile ayarlamalar bir artış hem de tek taraflı dopamin eksikliği neden olur . Farelerden elde edilen sonuçlar, yaşlı hayvanların makarna adet yemek için daha uzun sürebilir ve genç erişkin farelerde (Tennant ve ark, 2009) ile karşılaştırıldığında, ağzına makarna ilerlemesinde yol açmaz daha fazla ayarlamalar yapmak göstermektedir. Atipik kullanım davranışlarını gözlemler bu testlerin analizi de içerebilir. Striatal hasar ve orta serebral arter oklüzyonu ek anormal yeme davranışları (Allred ve ark, 2008) sıklığının artması ile sonuçlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1 (A) ve (B) farelerde sıçanlarda Makarna işleme duruş. Sıçanlar, fareler makarna üzerinde önsezileri pençe hareketleri görüntülemek için fare altında bir ayna yerleştirilmesi gerektiren, kıç arkanıza yaslanın olduğunu unutmayın. (C) makarna adet örnekleri test etmek için hazırlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2 (AC) ve (DF), bir fare sıçan bir örnek forepaw ayarı. İlk panel düzenleme, daha önce hayvan gösterileri, orta panelde ayar pençe (ler) gösteren bir yıldız, forepaw ayarlama gösterir, ve son panel makarna parça değiştirme gösterir. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3 Kılavuzu ve makarna (A, C) (B, D) uzun ve kısa zaman sıçan ve fareler bacak pozisyonları kavramak.

<ol>
	<li>Allred, R. P., Adkins, D. L., Woodlee, M. T., Husbands, L. C., Maldonado, M. A., Kane, J. R., Schallert, T., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Vermicelli+Handling+Test:+a+simple+quantitative+measure+of+dexterous+forepaw+function+in+rats.">The Vermicelli Handling Test: a simple quantitative measure of dexterous forepaw function in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 170, 229-244 (2008).</li><li>Baird, A. L., Meldrum, A., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+staircase+test+of+skilled+reaching+in+mice.">The staircase test of skilled reaching in mice.</a> Brain Res. Bull. 54, 243-250 (2001).</li><li>Ballermann, M., Metz, G. A., McKenna, J. E., Klassen, F., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pasta+matrix+reaching+task:+a+simple+test+for+measuring+skilled+reaching+distance,+direction,+and+dexterity+in+rats.">The pasta matrix reaching task: a simple test for measuring skilled reaching distance, direction, and dexterity in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 106, 39-45 (2001).</li><li>Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+performance+in+rats.+The+effects+of+pyramidal+tract+section.">Motor performance in rats. The effects of pyramidal tract section.</a> Brain Res. 44, 313-323 (1972).</li><li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+(Mus+musculus)+after+a+focal+motor+cortex+stroke.">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33, 1869-1875 (2002).</li><li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+staircase+test+:+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats.">The staircase test : a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 36, 219-228 (1991).</li><li>Peterson, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+handedness+in+the+rat.">Mechanism of handedness in the rat.</a> Comp Psych Monographs. 9, 1-67 (1934).</li><li>Tennant, K. A., Adkins, D. L., Donlan, N. A., Asay, A. L., Thomas, N., Kleim, J. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+age+on+motor+skill+learning+and+organization+of+the+forelimb+motor+cortical+representation+in+C57BL/6+mice.">The effect of age on motor skill learning and organization of the forelimb motor cortical representation in C57BL/6 mice.</a> Society for Neuroscience Annual Meeting abstract. , 783-784 (2009).</li><li>Tennant, K. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorimotor+behavioral+effects+of+endothelin-1+induced+small+cortical+infarcts+in+C57BL/6+mice.">Sensorimotor behavioral effects of endothelin-1 induced small cortical infarcts in C57BL/6 mice.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 18-26 (2009).</li><li>Whishaw, I. Q., Coles, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Varieties+of+paw+and+digit+movement+during+spontaneous+food+handling+in+rats:+postures,+bimanual+coordination,+preferences,+and+the+effect+of+forelimb+cortex+lesions.">Varieties of paw and digit movement during spontaneous food handling in rats: postures, bimanual coordination, preferences, and the effect of forelimb cortex lesions.</a> Behav. Brain Res. 77, 135-148 (1996).</li><li>Whishaw, I. Q., Coles, B. L., Pellis, S. M., Miklyaeva, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impairments+and+compensation+in+mouth+and+limb+use+in+free+feeding+after+unilateral+dopamine+depletions+in+a+rat+analog+of+human+Parkinson's+disease.">Impairments and compensation in mouth and limb use in free feeding after unilateral dopamine depletions in a rat analog of human Parkinson's disease.</a> Behav Brain Res. 84, 167-177 (1997).</li><li>Whishaw, I. Q., Dringenberg, H. C., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+forelimb+grasping+in+free+feeding+by+rats:+motor+cortex+aids+limb+and+digit+positioning.">Spontaneous forelimb grasping in free feeding by rats: motor cortex aids limb and digit positioning.</a> Behav. Brain Res. 48, 112-125 (1992).</li><li>Whishaw, I. Q., O'Connor, W. T., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contributions+of+motor+cortex,+nigrostriatal+dopamine+and+caudate-putamen+to+skilled+forelimb+use+in+the+rat.">The contributions of motor cortex, nigrostriatal dopamine and caudate-putamen to skilled forelimb use in the rat.</a> Brain. 109, 805-843 (1986).</li></ol>

Bu video, sırasıyla, Şehriye ve Capellini İşleme Testleri sıçan ve fareler nasıl yapılır göstermek. Bu testler, beynin motor sistemleri zarar sonra ya da yaşlanma sırasında, pençe ve normal hayvanlarda haneli işlevi incelemek için basit, kantitatif bir yoldur. Pençe ve araştırmacı her pençe ile yapılan ayarlamalar yanı sıra, deneysel olarak indüklenmiş merkezi sinir sistemi hasarı takiben görülebilir anormal davranışları gözlemlemek ölçmek için izin pişmemiş makarna küçük parçaları işlemek için kullanılan haneli hareketleri slow-motion video analizi. Test oturumları sürekli farklı günlerde yapılan ve hayvanların çoğu, birkaç dakika içinde bir oturumun tamamlaması, tüm duruşmaları olabilir. Böylece, testin daha geniş bir test bataryası ya da deneysel tasarım içine dahil edilmesi için uygundur. Testleri de motor beceri öğrenme (Xu ve ark, 2009), çalışmalarında kullanılan ancak burada zaman içinde kurulmuş bir beceri tahlil değişiklikleri için bir protokol. (; Ballermann ve ark, 2001; Montoya ve ark, 1991. Örneğin, Whishaw ve ark, 1986) ve farelerde (Farr &amp; Whishaw, 2002 Şu anda, yetenekli ulaşan testler sıçanlarda hünerli ön ayakları fonksiyonu en sık kullanılan testler; Tennant &amp; Jones, 2009; Baird ve ark, 2001). Makarna kullanma bimanuel görev ise ulaşmak testleri, her uzuv izole test izin verir. Bununla birlikte, testler (Xu ve ark, 2009) motor korteksin ön ayakları temsil plastisite içerir, her iki test için, yetenekli forepaw fonksiyonu ve beceri edinimi bozuklukları duyarlılıkları benzer. Tecrübemizi ulaşan testleri daha karmaşık ve zahmetli gerçekleştirmek için, bazı deneysel sorular için, bu testler daha verimli bir alternatif sunabilir. Ancak, burada açıklanan testler aksine, yetenekli ulaşan testleri yıllardır kullanılmaktadır (Peterson, 1934) olmuştur ve şimdi çok yönlü, son derece hassas tedbirler ve test parametreleri (Ballermann ve ark, 2001 bir grubunu içerir. Farr &amp; Whishaw, 2002 ; Montoya ve ark, 1991; Whishaw ve ark, 1992). Buna karşılık, Şehriye ve Capellini İşleme Testleri sıçan usta gıda işleme davranışı (Whishaw ve Coles, 1996) nispeten yeni karakterizasyonları uzanır. Yönetim ve analiz hem de bu testler, şüphesiz ince haneli ve bimanuel hareketlerin daha hassas ölçmek için, dil, ağız ve çene koordineli hareketlerini ölçmek için, daha fazla rafine edilmiş ve genişletilmiş, örneğin olabilir.

the vermicelli and capellini handling tests: simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Kemirgen yeme davranışı Önceki karakterizasyonları yiyecek parçaları işlemek için forepaw hareketleri koordine kullandıkları ortaya çıkmıştır. Biz bu işi üzerine lateralize bozukluğu ve yaşa bağlı değişiklikler duyarlı forepaw beceri, basit bir niceliksel tedbir geliştirmek için genişletmiştir. Kemirgenler, usta forepaw ve hevesle tüketmek ince makarna parçaları, yönetmek için basamak hareketleri öğrenirler. Biz daha önce, sıçanlarda erişte taşıma nicel yöntemler nitelendirdi ve tedbirler tek taraflı iskemik lezyonlar, orta serebral arter tıkanıklığında ve tek taraflı striatal dopamin eksikliği [Allred, RP Adkins, DL, Woodlee, MT kaynaklanan ön ayakları bozuklukları çok duyarlı olduğunu gösterdi Kocalar, LC, Maldonado MA, Kane, JR, Schallert, T. &amp; Jones, TA Şehriye İşleme Testi: sıçanlarda hünerli forepaw fonksiyonu basit bir kantitatif ölçüsüdür.<em&gt; J. Neurosci. Yöntemleri</em&gt; 170, 229-244 (2008)]. Burada sıçanlarda bu test için daha ayrıntılı bir protokol mevcut ve fareler, Capellini İşleme Test için yeni geliştirilmiş sürümü ile karşılaştırın. Sırasıyla pişmemiş şehriye veya Capellini makarna, kısa uzunluklarda ele sıçan ve fareler pençe hareketleri görünümünü optimize etmek için yerleştirilmiş bir kamera ile videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamalar belirlenmesi için basamaklı herhangi bir sayı başlar yeme sonra makarna parçası üzerinde herhangi bir farklı kaldırma ve değiştirme pençe, ya da olarak tanımlanan sağlar. Parça başına Forepaw ayarlamalar her seanstan başına çalışmalarda üzerinde ortalaması alınır. Tekrarlanan test zamanla forepaw maharet değişikliklerin duyarlı kantitatif analiz izin verir. Ön test alışkanlık ve taşıma uygulaması için protokollerin yanı sıra atipik işleme desenleri tanımlamak için prosedürler, açıklanmıştır. Sıçanlar ve fareler biraz farklı makarna işleme testleri, bu testlerin idaresi ve puanlama türe özgü farklılıklar vurgulanır. Tüm hayvan kullanımını University of Texas at Austin Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokoller uyarınca oldu.

Watch this Scientific Journal Video about The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice at JoVE.com

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Şehriye ve forepaw beceri Capellini İşleme Testler, becerikli forepaw ve rakam hareketleri kullanarak besin öğeleri işlemek için kemirgenler doğal eğim yararlanmak. Pişmemiş kuru makarna kısa koluyla ele Hayvanlar videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamaları ölçümü için izin verir.

Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

the-vermicelli-capellini-handling-tests-simple-quantitative-measures

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.8K Görüntüleme.  University of Texas at Austin. Şehriye ve forepaw beceri Capellini İşleme Testler, becerikli forepaw ve rakam hareketleri kullanarak besin öğeleri işlemek için kemirgenler doğal eğim yararlanmak. Pişmemiş kuru makarna kısa koluyla ele Hayvanlar videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamaları ölçümü için izin verir.

Video: The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

Fareler Soğuk Hassasiyeti ve Uyum belirlenmesi için Basit ve ucuz Yöntem

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Nörobilim

Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal cord of the majority of these fiber systems have not been thoroughly investigated in any species. Serotonergic fibers, which project to the spinal cord, have been studied in rats and opossums on histological sections and their functional significance has been deduced based on their fiber termination pattern in the spinal cord. With the development of CLARITY and CUBIC techniques, it is possible to investigate this fiber system and its distribution in the spinal cord, which is likely to reveal previously unknown features of serotonergic supraspinal pathways. Here, we provide a detailed protocol for imaging the serotonergic fibers in the mouse spinal cord using the combined CLARITY and CUBIC techniques. The method involves perfusion of a mouse with a hydrogel solution and clarification of the tissue with a combination of clearing reagents. Spinal cord tissue was cleared in just under two weeks, and the subsequent immunofluorescent staining against serotonin was completed in less than ten days. With a multi-photon fluorescent microscope, the tissue was scanned and a 3D image was reconstructed using Osirix software.

Supraspinal projections are important for pain perception and other behaviors, and serotonergic fibers are one of these fiber systems. The present study focused on the application of the combined CLARITY/CUBIC protocol to the mouse spinal cord in order to investigate the termination of these serotonergic fibers.

Kullanımı Netlik Fare Omurilik içinde Serotonerjik Elyaf Görüntüleme / KÜBİK Tekniği

Long descending fibers to the spinal cord are essential for locomotion, pain perception, and other behaviors. The fiber termination pattern in the spinal ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous system. SC-selective genetic manipulation in living animals is a powerful technique for studying the molecular and cellular mechanisms of SC myelination and demyelination in vivo. While knockout/knockin and transgenic mice are powerful tools for studying SC biology, these methods are costly and time consuming. Viral vector-mediated transgene introduction into the sciatic nerve is a simpler and less laborious method. However, viral methods have limitations, such as toxicity, transgene size constraints, and infectivity restricted to certain developmental stages. Here, we describe a new method that allows selective transfection of myelinating SCs in the rodent sciatic nerve using electroporation. By applying electric pulses to the sciatic nerve at the site of plasmid DNA injection, genes of interest can be easily silenced or overexpressed in SCs in both neonatal and more mature animals. Furthermore, this in vivo electroporation method allows for highly efficient simultaneous expression of multiple transgenes. Our novel technique should enable researchers to efficiently manipulate SC gene expression, and facilitate studies on SC development and function.

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

Here, we present an in vivo technique for gene transfer to Schwann cells (SCs) in the rodent sciatic nerve. This simple technique is useful for investigating signaling mechanisms involved in the development and maintenance of myelinating SCs.

Elektroporasyon tarafından Kemirgen Siyatik Sinir Schwann Hücreleri için Vivo Gen Transferi

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Kılcal Besleyici Testi Gıda Alımını içinde Tedbirler<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the molecular and cellular basis of higher brain functions. A whole-mount preparation of adult brains with well-preserved morphology is critical for such whole brain-based studies, but can be technically challenging and time-consuming. This protocol describes an easy-to-learn, one-step dissection approach of an adult fly head in less than 10 s, while keeping the intact brain attached to the rest of the body to facilitate subsequent processing steps. The procedure helps remove most of the eye and tracheal tissues normally associated with the brain that can interfere with the later imaging step, and also places less demand on the quality of the dissecting forceps. Additionally, we describe a simple method that allows convenient flipping of the mounted brain samples on a coverslip, which is important for imaging both sides of the brains with similar signal intensity and quality. As an example of the protocol, we present an analysis of dopaminergic (DA) neurons in adult brains of WT (w1118) flies. The high efficacy of the dissection method makes it particularly useful for large-scale adult brain-based studies in Drosophila.

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

The adult Drosophila brain is a valuable system for studying neuronal circuitry, higher brain functions, and complex disorders. An efficient method to dissect whole brain tissue from the small fly head will facilitate brain-based studies. Here we describe a simple, one-step dissection protocol of adult brains with well-preserved morphology.

Basit Bir adım Yetişkin Tüm montaj Hazırlama Diseksiyon Protokolü<em&gt; Drosophila</em&gt; Brain

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the ...

A Simple Approach to Induce Experimental Autoimmune Neuritis in C57BL/6 Mice for Functional and Neuropathological Assessments

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by immunizing mice with neurogenic peptides to direct an inflammatory attack toward components of the peripheral nervous system (PNS). Recent advances have enabled the induction of EAN in the relatively resistant C57BL/6 mouse line using myelin protein zero (P0)106-125 or P0180-199 peptides delivered in adjuvant combined with the injection of pertussis toxin. The ability to induce EAN in the C57BL/6 strain allows for the use of the numerous genetic tools that exist on this mouse background, and thus allows the sophisticated study of disease pathogenesis and interrogation of the mechanistic action of novel therapeutics in combination with transgenic approaches. In this study, we demonstrate a simple approach to successfully induce EAN using the P0180-199 peptide in C57BL/6 mice. We also outline a protocol for the assessment of functional deficits that occur in this model, accompanied by an array of neuropathological features. Thus, this model is a powerful experimental model to study the pathogenesis of human peripheral demyelinating neuropathies, and to determine the efficacy of potential therapies that aim to promote myelin repair and protect against nerve damage in autoimmune neuritis.

This report outlines a simple approach to successfully induce experimental autoimmune neuritis (EAN) using the myelin protein zero (P0)180-199 peptide in combination with Freund&#39;s complete adjuvant and pertussis toxin. We present a sophisticated paradigm capable of accurately assessing the extent of functional deficits and neuropathology that occur in this EAN.

C57BL/6 farelerde deneysel otoimmün nörite fonksiyonel ve Neuropathological değerlendirmeler için ikna etmek için basit bir yaklaşım

Experimental autoimmune neuritis (EAN) is a well-appreciated experimental model of autoimmune peripheral demyelinating diseases. EAN disease is induced by ...

Intracerebroventricular Treatment with Resiniferatoxin and Pain Tests in Mice

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In addition to its peripheral function, its involvement in brain functions has also been suggested. Resiniferatoxin (RTX), an ultrapotent TRPV1 agonist, has been known to induce long-term desensitization of TRPV1, and this desensitization has been an alternative approach for investigating the physiological relevance of TRPV1-expressing cells. Here we describe a protocol for intracerebroventricular (i.c.v.) treatment with RTX in mice. Procedures are described for testing nociception to peripheral TRPV1 stimulation (RTX test) and mechanical stimulation (tail pressure test) then follow. Although the nociceptive responses of mice that had been administered RTX i.c.v. were comparable to those of the control groups, RTX-i.c.v.-administered mice were insensitive to the analgesic effect of acetaminophen, suggesting that i.c.v. RTX treatment can induce supraspinal-selective TRPV1 desensitization. This mouse model can be used as a convenient experimental system for studying the role of TRPV1 in brain/supraspinal function. These techniques can also be applied to studies of the central actions of other drugs.

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1) in the supraspinal region has been suggested to play some roles in the brain function. Described here is a protocol for intracerebroventricular injection of resiniferatoxin for supraspinal TRPV1 desensitization in mice. Procedures for some pain tests are also presented.

Farelerde Resiniferatoksin ve Ağrı Testleri ile İntracerebroventriküler Tedavi

The transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), a thermosensitive cation channel, is known to trigger pain in the peripheral nerves. In ...

Electrophysiological Investigations of Retinogeniculate and Corticogeniculate Synapse Function

The lateral geniculate nucleus is the first relay station for the visual information. Relay neurons of this thalamic nucleus integrate input from retinal ganglion cells and project it to the visual cortex. In addition, relay neurons receive top-down excitation from the cortex. The two main excitatory inputs to the relay neurons differ in several aspects. Each relay neuron receives input from only a few retinogeniculate synapses, which are large terminals with many release sites. This is reflected by the comparably strong excitation, the relay neurons receive, from retinal ganglion cells. Corticogeniculate synapses, in contrast, are simpler with few release sites and weaker synaptic strength. The two synapses also differ in their synaptic short-term plasticity. Retinogeniculate synapses have a high release probability and consequently display a short-term depression. In contrast, corticogeniculate synapses have a low release probability. Corticogeniculate fibers traverse the reticular thalamic nuclei before entering the lateral geniculate nucleus. The different locations of the reticular thalamic nucleus (rostrally from the lateral geniculate nucleus) and optic tract (ventro-laterally from the lateral geniculate nucleus) allow stimulating corticogeniculate or retinogeniculate synapses separately with extracellular stimulation electrodes. This makes the lateral geniculate nucleus an ideal brain area where two excitatory synapses with very different properties impinging onto the same cell type, can be studied simultaneously. Here, we describe a method to investigate the recording from relay neurons and to perform detailed analysis of the retinogeniculate and corticogeniculate synapse function in acute brain slices. The article contains a step-by-step protocol for the generation of acute brain slices of the lateral geniculate nucleus and steps for recording activity from relay neurons by stimulating the optic tract and corticogeniculate fibers separately.

Here, we present protocols for the preparation of acute brain slices containing the lateral geniculate nucleus and the electrophysiological investigation of retinogeniculate and corticogeniculate synapses function. This protocol provides an efficient way to study synapses with the high-release and low-release probability in the same acute brain slices.

Retinogeniculate ve Kortikogeniculate SYNAPSE fonksiyonunun elektrofizyolojik Incelemeleri

The lateral geniculate nucleus is the first relay station for the visual information. Relay neurons of this thalamic nucleus integrate input from retinal ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of sciatic nerve injury rodent models. In this protocol, we describe a novel kinematic analysis method that uses a three-dimensional (3D) motion capture apparatus for functional evaluations using a rat sciatic nerve crush injury model. First, the rat is familiarized with treadmill walking. Markers are then attached to the designated bone landmarks and the rat is made to walk on the treadmill at the desired speed. Meanwhile, the posterior limb movements of the rat are recorded using four cameras. Depending on the software used, marker tracings are created using both automatic and manual modes and the desired data are produced after subtle adjustments. This method of kinematic analysis, which uses a 3D motion capture apparatus, offers numerous advantages, including superior precision and accuracy. Many more parameters can be investigated during the comprehensive functional evaluations. This method has several shortcomings that require consideration: The system is expensive, can be complicated to operate, and may produce data deviations due to skin shifting. Nevertheless, kinematic analysis using a 3D motion capture apparatus is useful for performing functional anterior and posterior limb evaluations. In the future, this method may become increasingly useful for generating accurate assessments of various traumas and diseases.

We introduce a kinematic analysis method that uses a three-dimensional motion capture apparatus containing four cameras and data processing software for performing functional evaluations during fundamental research involving rodent models.

Siyatik Sinir Ezilme Hasarının Sıçan Modelinde Fonksiyonel Değerlendirme için 3D Kinematik Analiz

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the CSF protein composition delivers crucial information in basic neuroscience research as well as neurological diseases. One caveat is that proteins measured in CSF may derive from both intrathecal synthesis and transudation from serum, and protein analysis of CSF can only determine the sum of these two components. To discriminate between protein transudation from the blood and intrathecally produced proteins in animal models as well as in humans, CSF protein profiling measurements using conventional protein analysis tools must include the calculation of the albumin CSF/serum quotient (Qalbumin), a marker of the integrity of the blood-brain interface (BBI), and the protein index (Qprotein/Qalbumin), an estimate of intrathecal protein synthesis. This protocol illustrates the entire procedure, from CSF and blood collection to quotients and indices calculations, for the quantitative measurement of intrathecal protein synthesis and BBI impairment in mouse models of neurological disorders.

Elevated spinal fluid protein levels can either be the result of diffusion of plasma protein across an altered blood-brain barrier or intrathecal synthesis. An optimized testing protocol is presented in this article that helps to discriminate both cases and provides quantitative measurements of intrathecally synthesized proteins.

Farelerde İntrathecally Sentezlenmiş Proteinlerin Kantitatif Ölçümü

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the ...